一种抗人乙肝病毒药物的筛选方法技术

本发明专利技术公开了一种抗人乙肝病毒药物的筛选方法。具体为将SEQ ID NO：1所示的HBc分别与荧光蛋白的肽段a和肽段b相连，构建得融合蛋白A和B，所述肽段a和肽段b连接共同组成荧光蛋白的全序列；将融合蛋白A和B通过克隆技术共转化同一受体细胞，用待检测药物处理上述转化的受体细胞，同时以未用药物处理的上述转化的受体细胞作为阴性对照；观察细胞中荧光蛋白的信号，如果无荧光蛋白信号或荧光信号低于阴性对照，说明待检测药物可以抗人乙肝病毒，如果荧光信号与阴性对照信号强度相当，说明待检测药物不可以抗人乙肝病毒。本研究通过设计并构建HBc与荧光蛋白的融合蛋白，利用荧光蛋白信号监测HBc组装的过程，简化药物筛选过程中的读出操作，提供了一种用于HBV抗病毒药物的高通量筛选方法。

A screening method for anti HBV drugs

The invention discloses a screening method for anti human hepatitis B virus drugs. The fusion protein A and B were constructed by linking the HBc shown in SEQ ID NO:1 with the peptide A and the peptide B of the fluorescent protein respectively. The fluorescent protein signal in the cells was observed if there was no fluorescent protein signal or the fluorescent signal was lower than the negative control, indicating that the drugs to be tested could resist human hepatitis B virus, and if the fluorescent signal intensity was similar to that of the negative control, indicating that Drugs to be tested should not be anti human hepatitis B virus. In this study, we designed and constructed the fusion protein of HBc and fluorescent protein, monitored the assembly process of HBc by fluorescent protein signal, simplified the readout operation during drug screening, and provided a high throughput screening method for HBV antiviral drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种抗人乙肝病毒药物的筛选方法
本专利技术涉及抗病毒药物筛选
，具体地，涉及一种抗人乙肝病毒药物的筛选方法。
技术介绍
人乙型肝炎病毒感染是世界范围内的重要公共健康问题。急性乙肝病毒感染后，仍有8％左右发展为慢性乙肝感染，持续性HBV感染将导致肝硬化，甚至肝癌。我国是乙肝大国，乙肝病毒携带者接近1.3亿人，约占总人口的9％。尽管随着乙肝疫苗的大范围普及，新乙肝感染率得到有效控制，但乙肝携带人口基数大，防治乙肝成为我国公共健康问题的重中之重。乙肝传播途径主要通过垂直传播与水平传播。垂直传播是指母婴传播；水平传播主要通过血液传播。尽管目前市场上有很多抗HBV药物，主要通过使用干扰素或者核苷类似物进行抗病毒治疗。其中核苷类似物通过抑制HBV复制过程中的逆转录酶活性从而抑制HBV产生。逆转录酶抑制剂虽然可以使患者控制乙肝病毒水平，但是随之产生的耐药性、巨额的医药费用、药物严重的副作用等问题也不容小觑。由于HBV逆转录酶体外表达并不产生酶活性，HBV逆转录酶抑制剂的母环结构主要通过对人免疫缺陷病毒(HIV)的逆转录酶化合物改造修饰。针对HBV本身进行从头抗病毒药物研究成为一种迫切需求。想本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗人乙肝病毒药物的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：将SEQ ID NO：1所示的HBc分别与荧光蛋白的肽段a和肽段b相连，构建得融合蛋白A和B，所述肽段a和肽段b连接共同组成荧光蛋白的全序列；将融合蛋白A和B通过克隆技术共转化同一受体细胞，用待检测药物处理上述转化的受体细胞，同时以未用药物处理的上述转化的受体细胞作为阴性对照；观察细胞中荧光蛋白的信号，如果无荧光蛋白信号或荧光信号低于阴性对照，说明待检测药物可以抗人乙肝病毒，如果荧光信号与阴性对照信号强度相当，说明待检测药物不可以抗人乙肝病毒。

【技术特征摘要】
1.一种抗人乙肝病毒药物的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：将SEQIDNO：1所示的HBc分别与荧光蛋白的肽段a和肽段b相连，构建得融合蛋白A和B，所述肽段a和肽段b连接共同组成荧光蛋白的全序列；将融合蛋白A和B通过克隆技术共转化同一受体细胞，用待检测药物处理上述转化的受体细胞，同时以未用药物处理的上述转化的受体细胞作为阴性对照；观察细胞中荧光蛋白的信号，如果无荧光蛋白信号或荧光信号低于阴性对照，说明待检测药物可以抗人乙肝病毒，如果荧光信号与阴性对照信号强度相当，说明待检测药物不可以抗人乙肝病毒。2.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在在于，所述荧光蛋白为黄色荧光蛋白、蓝绿色荧光蛋白或Venus荧光蛋白。3.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在在于，所述肽段a的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示，肽段b的氨基酸序列如SEQIDNO：3所示；或，肽段a的氨基酸序列如SEQIDNO：4所示，肽段b的氨基酸序列如SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张辉，何欣，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44