The invention discloses a preparation method of epitope antibody capable of recognizing chicken NDV, belonging to the technical field of epitope antibody preparation. The technical scheme of the invention is as follows: according to the screened NDV virus, a polypeptide P25 that can recognize the NDV antibody, and then screening the epitope antibody against the polypeptide P25 according to the polypeptide P25, the polypeptide P25 epitope antibody can react specifically with Newcastle disease virus, thus shortening the preparation process of the epitope antibody against the NDV peptide P25.
【技术实现步骤摘要】
一种能够识别鸡新城疫病毒的表位抗体的制备方法
本专利技术属于表位抗体的制备
，具体涉及一种能够识别鸡新城疫病毒的表位抗体的制备方法。
技术介绍
新城疫(NewcastleDisease)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)引起的一种急性、热性、败血性和高触性禽类传染病，其发病率与死亡率都很高，严重危害着我国养禽业的发展。新城疫病毒属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)、禽腮腺炎病毒属，单股负链RNA病毒，有囊膜，其基因组全长为15186bp，编码6个结构蛋白，包括磷蛋白(P)、核蛋白(NP)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、大蛋白(L)以及血凝素-神经氨酸蛋白(HN)六种蛋白。血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)具有血凝素活性(HA)及神经酸氨酶活性(NA)并能协同F蛋白发挥作用，在病毒感染过程中，HN蛋白特异性地识别宿主细胞表面唾液酸受体，这是病毒感染宿主细胞所必需的，并且能够诱导机体产生保护性免疫抗体。目前，常用的检测方法有血凝素反应(hemagglutinin，HA)、血凝抑制反应(hemagglutinininhi...
【技术保护点】
1.一种能够识别鸡新城疫病毒的表位抗体的制备方法，其特征在于具体步骤为：（1）新城疫病毒高免血清的制备，将新城疫病毒接种于鸡成纤维细胞，72h后收获病毒，用蔗糖梯度离心的方法纯化新城疫病毒，以1mg/mL的浓度肌肉注射给2周龄的小鸡，当出现临床症状时采集血清，用多肽P25通过ELISA方法检测抗体滴度，将收集到的血清于56℃灭活30min，‑70℃保存备用，其中多肽P25的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示；（2）多肽P25表位抗体的制备，根据SulfoLink® Immobilization Kit试剂盒，将多肽P25稀释到500ug/mL，标记免疫亲和层析柱，...
【技术特征摘要】
1.一种能够识别鸡新城疫病毒的表位抗体的制备方法，其特征在于具体步骤为：（1）新城疫病毒高免血清的制备，将新城疫病毒接种于鸡成纤维细胞，72h后收获病毒，用蔗糖梯度离心的方法纯化新城疫病毒，以1mg/mL的浓度肌肉注射给2周龄的小鸡，当出现临床症状时采集血清，用多肽P25通过ELISA方法检测抗体滴度，将收集到的血清于56℃灭活30min，-70℃保存备用...
【专利技术属性】
技术研发人员：王选年，冯春花，李鹏，孙国鹏，王利平，岳锋，朱艳平，张艳芳，张万方，武乐祎，任鹏举，王亚平，王玲玲，
申请(专利权)人：新乡学院，
类型：发明
国别省市：河南,41
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