中和人呼吸道合胞病毒的抗体制造技术

本发明专利技术涉及具有高抗RSV中和滴度的单克隆抗体。本发明专利技术进一步提供了编码本发明专利技术抗体的分离的核酸和用其转化的宿主细胞。本发明专利技术再进一步提供了采用本发明专利技术的抗体和核酸的诊断、预防和治疗方法，特别是作为婴儿和老年人中的被动免疫治疗剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】中和人呼吸道合胞病毒的抗体专利
本专利技术涉及具有高抗RSV中和滴度的人单克隆抗体，以及这些抗体作为婴儿和老年人中的被动免疫治疗剂的用途。专利技术背景副粘病毒是包膜负链RNA病毒，其为重要的人和动物病原体。人呼吸道合胞病毒（hRSV，RSV）属于副粘病毒科（Paramyxoviridae），肺炎病毒亚科（Pneumovirinae）。两种亚型A型和B型已得到鉴定，并且是小于6个月的儿童中严重且有时甚至致命的呼吸道感染的主要原因。患有基础疾病（如COPD、哮喘、癌症、免疫受损状态包括HIV或移植后免疫受损状态）的成人也处于发展严重RSV感染的风险中。超过50岁的成人中由于急性呼吸道感染的每年住院的15%由RSV引起。在美国，RSV每年导致超过100,000次住院，并且估计其每年引起全球约160,000例死亡。目前不存在用于的RSV疫苗，并且用福尔马林灭活病毒的试验与婴儿中由RSV感染时增加的疾病严重性相关。其他科成员包括人偏肺病毒（hMPV）和人副流感病毒（hPIV），其同样导致与hRSV相似的急性呼吸道疾病。hRSV基因组是编码11种蛋白质的大约15kb的单链负义RNA分子。其中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结合人RSV F蛋白的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包括包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的重链可变区CDR1、包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列的重链可变区CDR2、包含SEQ ID NO：3的氨基酸序列的重链可变区CDR3、包含SEQ ID NO：4的氨基酸序列的轻链可变区CDR1、包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列的轻链可变区CDR2和包含SEQ ID NO：6的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.29 US 62/247841;2016.07.27 US 62/3673591.一种结合人RSVF蛋白的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包括包含SEQIDNO：1的氨基酸序列的重链可变区CDR1、包含SEQIDNO：2的氨基酸序列的重链可变区CDR2、包含SEQIDNO：3的氨基酸序列的重链可变区CDR3、包含SEQIDNO：4的氨基酸序列的轻链可变区CDR1、包含SEQIDNO：5的氨基酸序列的轻链可变区CDR2和包含SEQIDNO：6的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。2.一种结合人RSVF蛋白的分离的抗体或其抗原结合片段，其包含轻链免疫球蛋白、重链免疫球蛋白或选自以下的轻链和重链免疫球蛋白两者：1）包括包含SEQIDNO：7的氨基酸序列的重链可变区和/或包含SEQIDNO：8的氨基酸序列的轻链可变区的抗体或其抗原结合片段；2）包括包含与SEQIDNO：7具有至少90%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区和/或包含与SEQIDNO：8具有至少90%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区的抗体或其抗原结合片段；和3）包括包含与SEQIDNO：7具有至少90%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区和/或包含与SEQIDNO：8具有至少90%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区的抗体或其抗原结合片段，其中任何序列变异在所述抗体的构架区中发生。3.权利要求1或2的抗体或抗原结合片段，其中如通过表面等离振子共振（例如BIACORE）或类似技术（例如KinExa或OCTET）测定的，所述抗体或其抗原结合片段以约1x10-9M至约1x10-12M的KD值结合人RSV融合前F蛋白。4.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其与包含SEQIDNO：7的重链可变区和SEQIDNO：8的轻链可变区的抗体结合人RSVF蛋白的相同表位，其中如通过表面等离振子共振（例如BIACORE）或类似技术（例如KinExa或OCTET）测定的，所述抗体或其片段以约1x10-9M至约1x10-12M的KD值结合人RSV融合前F蛋白。5.权利要求4的分离的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体通过下述相互作用中的一种或多种结合人RSVF蛋白：1）轻链CDR3环通过残基Phe91和Leu92，通过在CDR3环中的Phe91和Leu92的羰基氧和人RSVF蛋白的Arg429的胍基氮之间形成的两个氢键，与人RSVF蛋白的Arg429的侧链相互作用；2）轻链CDR2环通过残基Asp50和Glu55与人RSVF蛋白的Asn426和Lys445形成氢键；3）重链CDR3环通过残基Tyr104和Tyr110形成用于与人RSVF蛋白上的Ile432的范德华相互作用的表面；4）重链CDR3环通过Asn107与人RSVF蛋白的Lys433形成氢键；和/或5）轻链针对RSV融合前三聚体的邻近单体的Glu161和Ser182包装。6.权利要求5的分离的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体通过下述全部相互作用结合人RSVF蛋白：1）轻链CDR3环通过残基Phe91和Leu92，通过在CDR3环中的Phe91和Leu92的羰基氧和人RSVF蛋白的Arg429的胍基氮之间形成的两个氢键，与人RSVF蛋白的Arg429的侧链相互作用；2）轻链CDR2环通过残基Asp50和Glu55与人RSVF蛋白的Asn426和Lys445形成氢键；3）重链CDR3环通过残基Tyr104和Tyr110形成用于与人RSVF蛋白上的Ile432的范德华相...

【专利技术属性】
技术研发人员：KA沃拉，KS科克斯，A唐，陈稚峰，D迪斯泰法诺，张岚，苏华甫，
申请(专利权)人：默沙东公司，
类型：发明
国别省市：美国,US