The invention discloses a primer and a method for identifying diploid D genomic cotton seeds or tetraploid cotton seeds. The forward primer sequence of primer du01 is shown as SEQ ID No.1, and the reverse primer sequence of primer du01 is shown as SEQ ID No.2. The specific primer du01 of the invention can amplify a specific 750 BP nucleotide sequence in a PCR template of diploid D genomic cotton seed or tetraploid cotton seed. However, 10 diploid cotton varieties in groups A, B, C, E, F, G and K have no products in PCR. Therefore, it can quickly identify cotton species containing D (sub) genome and solve the problem of unexpected confusion between D (sub) genome cotton species and other cotton species DNA in experimental work, which has important practical value.
【技术实现步骤摘要】
用于二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定的引物及方法
本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一对适用于棉花二倍体D基因组棉种及四倍体棉种鉴定的特异引物du01，及其PCR鉴定方法。
技术介绍
PolymeraseChainReaction(PCR)，聚合酶链式反应，是一种依靠特定引物识别互补位点，依靠DNA聚合酶催化，依据DNA复制原理，扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，是一种在生物体外的人们可控的特殊DNA复制过程。PCR的用途是，能将少量的DNA成千上万倍复制增加。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至95℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqD...
【技术保护点】
1.用于二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定的引物du01，引物du01的正向引物序列如SEQ ID No.1所示，引物du01的反向引物序列如SEQ ID No.2所示。
【技术特征摘要】
1.用于二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定的引物du01，引物du01的正向引物序列如SEQIDNo.1所示，引物du01的反向引物序列如SEQIDNo.2所示。2.根据权利要求1所述的引物du01在二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定上的应用。3.用于二倍体D基因组棉种或四倍体棉种鉴定的试剂盒，其特征在于，包含有权利要求1所述的引物du01。4.一种鉴定棉花二倍体D基因组棉种或四倍体棉种的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)使用权利要求1所述引物du01，以待测棉种的核基因组全部DNA为模板进行PCR扩增；(2)PCR扩增产物做电泳检测；如果得到一条750bp的目的产物，则待测棉种为棉花二倍体D基因组棉种和/或四...
【专利技术属性】
技术研发人员：卢合均，李鹏程，赵艳艳，王坤波，刘方，周忠丽，蔡小彦，王星星，王玉红，许艳超，侯宇清，张振梅，王春英，
申请(专利权)人：中国农业科学院棉花研究所，
类型：发明
国别省市：河南,41
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