层析介质制造技术

本发明专利技术的目的在于提供一种可充分提高保存稳定性的层析介质。本发明专利技术涉及一种层析介质，其具有固定有由蛋白质构成的检测物质的检测部，所述检测部中包含三糖以上的多糖类以及碱性氨基酸。

Chromatography medium

The aim of the invention is to provide a chromatographic medium which can sufficiently improve the preservation stability. The present invention relates to a chromatographic medium, which has a detection unit fixed with a detection substance composed of proteins, and the detection unit contains polysaccharides above trisaccharides and alkaline amino acids.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】层析介质
本专利技术涉及层析介质、免疫层析装置、免疫层析试剂盒以及免疫层析分析方法。
技术介绍
近年来，作为利用(例如)抗体所具有的特异反应性来检测试样液中的抗原的简便的体外诊断试剂盒或便携式诊断装置，无需进行检体的前处理的、基于免疫层析法进行的免疫测定的重要性得到提高。特别是，病毒及细菌等的病原体检查试剂盒是在一般的医院或诊所中也被广泛应用的身边的免疫层析装置。作为以往的免疫层析装置的最简单的结构，其为试样添加部、标记物质保持部、具有检测部的层析介质(层析介质部)、以及对流过了检测部的液体进行吸收的吸收部相互连接而成的结构。上述各部位中，在层析介质的检测部中固定有抗体等蛋白质，其与作为检测对象的被检测物质结合。该蛋白质随温度条件或湿度条件而发生变性，导致检测对象的检测灵敏度降低，因而存在无法长时间稳定地保存免疫层析装置这样的问题。因此，关于抑制层析介质的检测部中所含蛋白质的变性以提高保存稳定性的方法，进行了各种研究。例如，专利文献1中公开了一种免疫层析装置，其通过将糖或糖衍生物用于免疫层析装置的检测部等固相中，适度地保持装置内的湿度，从而具有保存稳定性。此外，在非专利文献1中公开了一种免疫层析装置，其通过使层析介质的膜中分别单独地含有甘氨酸或赖氨酸等氨基酸、或者蔗糖或海藻糖等糖，从而提高抗体的保存稳定性，抑制检测灵敏度的降低。现有技术文献专利文献专利文献1：国际公开第2002/40999号非专利文献非专利文献1：METHODS22,53-60(2000)“DevelopmentofRapidOne-StepImmunochromatographicAssay”
技术实现思路
专利技术所要解决的课题然而，如上所述的现有技术仍然不能够说其效果是充分的，尚有改良的余地。本专利技术的目的在于提供充分地提高保存稳定性的层析介质。用于解决课题的方案本专利技术人为了解决上述课题而进行了详细的研究，结果发现，在用于免疫层析法的免疫层析装置中，通过使层析介质的检测部中含有特定的糖类和碱性氨基酸这两者，从而能够充分地抑制固定于检测部中的作为检测对象的蛋白质的变性，充分地提高保存稳定性，并防止检测物质的活性降低，进一步发现，也能够提高检测物质的活性，由此完成本专利技术。即，本专利技术如下所述。1.一种层析介质，其用于检测检体中的被检测物质的免疫层析法中，并且具有固定有由蛋白质构成的检测物质的检测部，其中所述检测部包含三糖以上的多糖类以及碱性氨基酸。2.根据上述1所述的层析介质，其中，检测部中所含的所述多糖类为选自由棉子糖、黑曲霉三糖(nigerotriose)、麦芽三糖、松三糖、麦芽三酮糖(maltotriulose)、蔗果三糖、蔗果四糖(nystose)、黑曲霉四糖(nigerotetraose)、水苏糖以及麦芽四糖所组成的组中的至少一种多糖类。3.根据上述1或2所述的层析介质，其中，检测部包含5至50nmol的所述多糖类。4.根据上述1至3中任一项所述的层析介质，其中，检测部包含5至50nmol的所述碱性氨基酸。5.根据上述1至4中任一项所述的层析介质，其中，检测部中所含的所述多糖类与所述碱性氨基酸的摩尔比为1:10至10:1。6.根据上述1至5中任一项所述的层析介质，其中，检测部包含选自由精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸以及组氨酸所组成的组中的至少一种碱性氨基酸。7.根据上述1至6中任一项所述的层析介质，其中，检测部包含赖氨酸。8.根据上述1至7中任一项所述的层析介质，其中，被检测物质为糖蛋白质。9.根据上述8所述的层析介质，其中，所述糖蛋白质为HbA1c。10.一种免疫层析装置，其包含上述1至9中任一项所述的层析介质。11.一种免疫层析试剂盒，其包含上述10所述的免疫层析装置以及检体稀释液。12.一种免疫层析分析方法，其使用上述11所述的免疫层析试剂盒，并且依次实施下述步骤(1)至(4)：(1)将检体与检体稀释液一起添加至试样添加部的步骤；(2)通过保持在标记物质保持部中的标记物质来识别所述检体中所含的被检测物质的步骤；(3)使所述检体与标记物质作为移动相在层析介质部中展开的步骤；以及(4)在检测部中检测展开后的移动相中的被检测物质的步骤。专利技术效果根据本专利技术，可以提供一种层析介质，其能够充分地抑制固定于检测部中的作为检测对象的蛋白质的变性，充分地提高保存稳定性，并防止检测物质的活性降低。另外，也能够提高检测物质的活性。附图简要说明[图1]图1是用于说明免疫层析装置的结构的截面图。[图2]图2是表示在实施例1、2及比较例1、2中检测部的显色值的相对活性的图。[图3]图3是表示在实施例3至6及比较例3至10中加湿两天后的检测部的显色值的相对活性的图。具体实施方式以下，说明用于实施本专利技术的方式。需要说明的是，在本说明书中，所谓的“固定”是指抗体等以不移动的方式而配置于膜等载体中；所谓的“保持”是指抗体等以可移动的方式而配置于膜等载体当中或表面上。本专利技术的层析介质具有固定有由蛋白质构成的检测物质的检测部，该层析介质的特征在于：该检测部中含有三糖以上的多糖类以及碱性氨基酸。检测部形成在层析介质上。也就是说，作为与被检测物质结合的检测物质的蛋白质被固定于任意的位置上。据认为，对于本专利技术的层析介质，通过使其检测部中含有三糖以上的多糖类，作为检测部中的检测物质的蛋白质具有耐湿性，结果，能够抑制蛋白质的变性，提高保存稳定性，并能够防止检测物质的活性降低。另外，在多糖类当中，通过使其为在一分子内具有多个可氢键结合的羟基的三糖以上的糖类，从而相较于单糖或二糖，可得到更高的效果。本专利技术的层析介质中，通过使其检测部中含有三糖以上的多糖类从而能够提高检测物质的保存稳定性的作用机制尚未确定，但是据认为，这是因为三糖以上的多糖类能维持作为检测物质的蛋白质的氢键网状结构，因而当结合水由于干燥而从作为检测物质的蛋白质解离时，能够防止蛋白质的立体结构被破坏，防止蛋白质的变性，从而提高保存稳定性，并防止活性降低。多糖类只要是三糖以上，则没有特别的限定。例如，可列举出如下的三糖或四糖。作为三糖，可列举出(例如)棉子糖、黑曲霉三糖、麦芽三糖、松三糖、麦芽三酮糖以及蔗果三糖等。作为四糖，可列举出(例如)蔗果四糖、黑曲霉四糖、水苏糖以及麦芽四糖等。本专利技术中，在多糖类当中，优选三糖或四糖。其中，优选为选自由棉子糖、黑曲霉三糖、麦芽三糖、松三糖、麦芽三酮糖、蔗果三糖、蔗果四糖、黑曲霉四糖、水苏糖以及麦芽四糖所构成的组中的至少一种多糖类。更优选为三糖，而三糖之中更优选为棉子糖。这是因为，通过使用上述的糖，能够抑制被检测物质与检测物质的反应阻碍，适当地维持作为检测物质的蛋白质的氢键网状结构，从而提高保存稳定性，并防止活性降低。三糖以上的多糖类大多是非还原糖，不会因水解而发生官能团转变为氢键性弱的醛或酮，因而能够维持稳固的氢键网状结构。本专利技术的层析介质的检测部中可含有上述一种糖，也可混合含有两种以上。对于检测部中的多糖类的含量，每个层析介质为(例如)5至50nmol，优选为10至40nmol，更优选为20至30nmol。这是因为，通过使其在上述范围内，能够充分地提高保存稳定性，防止活性降低，并能够更加地抑制被检测物质与检测物质的反应阻碍。另外，对于本专利技术的层析介质，通过在其检测部中与上述多糖类本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种层析介质，其用于检测检体中的被检测物质的免疫层析法中，并且具有固定有由蛋白质构成的检测物质的检测部，所述检测部中包含三糖以上的多糖类以及碱性氨基酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.22 JP 2016-0107951.一种层析介质，其用于检测检体中的被检测物质的免疫层析法中，并且具有固定有由蛋白质构成的检测物质的检测部，所述检测部中包含三糖以上的多糖类以及碱性氨基酸。2.根据权利要求1所述的层析介质，其中，检测部中所含的所述多糖类为选自由棉子糖、黑曲霉三糖、麦芽三糖、松三糖、麦芽三酮糖、蔗果三糖、蔗果四糖、黑曲霉四糖、水苏糖以及麦芽四糖所组成的组中的至少一种多糖类。3.根据权利要求1或2所述的层析介质，其中，检测部中包含5至50nmol的所述多糖类。4.根据权利要求1至3中任一项所述的层析介质，其中，检测部中包含5至50nmol的所述碱性氨基酸。5.根据权利要求1至4中任一项所述的层析介质，其中，检测部中所含的所述多糖类与所述碱性氨基酸的摩尔比为1:10至10:1。6.根据权利要求1至5中任一项所述的层析介质...

【专利技术属性】
技术研发人员：加藤伸一，宫田亚纪，伊藤大辅，
申请(专利权)人：田中贵金属工业株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP