一种天麻蜜环菌的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种天麻蜜环菌的培养方法，其包括以下步骤：1、菌种选育，对蜜环菌株母本进行筛选、分离、纯化步骤选出母种；2、菌种扩繁，将母种置于培养皿利用液体培养基培育出种子液态菌种后接种到装有液体培养基的发酵罐继续培育成蜜环菌液体菌种；3、将蜜环菌液体菌种移栽到固体培养基培育成栽培种。本发明专利技术均是挑选人工培育的丛生、粗细适宜、生长健硕、顶端白色的菌索分离出来进行选种培育，首先从源头就保证了菌源的质量，选种后的菌索还需要经过纯化和筛选，如此不仅可以避免其余的菌丝污染，而且原始菌种选育后再扩繁而成的菌种纯度为100％，不含任何杂菌，这样就可以保证最后栽培种培育成的菌丝健康壮硕，品种纯正。

Cultivation method of Armillaria Gastrodia

The invention discloses a cultivation method of Armillaria gastrodiae, which comprises the following steps: 1. strain breeding, screening, isolation and purification of the mother strain of Armillaria mellea to select the mother strain; 2. strain propagation, the mother strain is placed in a Petri dish to cultivate the liquid strain of seeds and inoculated into a liquid culture medium. The liquid strain of Armillaria mellea was cultured in the fermentation tank. 3. The liquid strain of Armillaria mellea was transplanted into the solid medium to cultivate into cultivation species. The present invention is to select and breed clumps, suitable thickness, strong growth and white top fungi. The quality of the fungi is guaranteed from the source first, and the fungi after selection need to be purified and screened, so that not only the remaining mycelial contamination can be avoided, but also the original fungi can be selected and bred. The purity of the strain is 100% without any hybrids, so that the hyphae of the final cultivated strain can be healthy, strong and pure.

【技术实现步骤摘要】
一种天麻蜜环菌的培养方法
本专利技术涉及生物
，特别涉及一种天麻蜜环菌的培养方法。
技术介绍
蜜环菌属于伞菌目、蜜环菌属、子实体一般中等大，该属真菌在全世界约有40多种，在中国分部也较为广泛，华中、西南地区和东北地区均有分布。蜜环菌是名贵中药天麻的重要共生菌，天麻无法自己吸收营养，在其生长期间主要是利用蜜环菌以根状菌索的形式提供营养物质。因此菌种的质量和菌种的纯度等都会对天麻的产量起到很大的影响，现有的天麻商业化生产中生产步骤一般是先用蜜环菌种接种在固体培养基上发育和成长，待发育和成长成熟后作为栽培种与天麻拌种。在这个过程中多半注重培养基和操作过程的无菌操作，但是往往忽略了接种的菌种本身，直接接种的菌种首先是其生长状况不一，无法保证其均为高质量的菌种，其次其内可能混有其他的杂菌，但是在菌种的状态下很难识别出来，除非待其成熟长大方可分辨，直接使用菌种来接种不仅无法保证菌种的纯洁度，而且菌种的质量也是参差不齐，这样的菌种培育成栽培种不仅会影响栽培种的质量和产量，而且会导致后期与天麻伴生后空塘率高。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种天麻蜜环菌的培养方法，其可以保证菌种的纯度和质量，培育出的蜜环菌不含任何杂菌，并且菌丝健康壮硕，品种纯正。本专利技术的技术方案为：一种天麻蜜环菌的培养方法，其包括以下步骤：(1)菌种选育，对蜜环菌株母本进行筛选、分离、纯化步骤选出母种；(2)菌种扩繁，将母种置于培养皿利用液体培养基培育出种子液态菌种后接种到装有液体培养基的发酵罐继续培育成蜜环菌液体菌种；(3)将蜜环菌液体菌种移栽到固体培养基培育成栽培种。进一步的，液体菌种移栽到固体培养基后在室温22℃-26℃，相对湿度65％-80％的暗室培育55-65天得到栽培种。进一步的，液体培养基由以下重量份的材料组成：氨基酸0.1份、葡萄糖1-3份、磷酸二氢钾0.1-0.2份、微量元素0.1-0.3份，硫酸镁0.05-0.1份，水90-100份，蔗糖1-2份。进一步的，氨基酸为谷氨酸、甘氨酸或丙氨酸。进一步的，微量元素为磷酸氢钙、硫酸钾、硝酸钾、氧化铜和硝酸钙按同等重量份混合而成。进一步的，固体培养基由以下重量份的材料组成：青冈木屑80-85份、石膏10份、琼脂2-4份、米糠或麦麸15-20份、玉米粉5-8份、硫酸镁0.2-0.4份。本专利技术的有益之处在于：本专利技术经过选种培育出的菌种比起直接使用菌种接种可以保证菌种的品质和优良性，均是人工培育的丛生、粗细适宜、生长健硕、顶端白色的菌索分离出来进行选种培育，首先从源头就保证了菌源的质量，所以培育出来的栽培种生长状况更加的良好，菌丝相比更健壮，伴生天麻后空塘率由20％-15％降低至10％以下，而且经过纯化后可以保证菌种的纯洁度，将选种后的菌索按无菌操作规程将菌索接种到PDA试管斜面培养基上，在恒温25℃，相对湿度80％条件下培育10天，然后选择长入培养基内的幼嫩菌索进行纯化，筛选出生长形态高度一致的菌索作为菌种，如此不仅可以避免其余的菌丝污染，而且原始菌种选育后再扩繁而成的菌种纯度为100％，不含任何杂菌，这样就可以保证最后栽培种培育成的菌丝健康壮硕，品种纯正。具体实施方式下面对本专利技术的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本专利技术，但并不构成对本专利技术的限定。此外，下面所描述的本专利技术各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。实施例1：(1)菌种选育，选用人工培育的蜜环菌与直径为40-60mm的青冈树枝搅拌混合后植入林下的土中，覆盖阔叶树叶和沙土进行培育成菌柴，14-20个月后取出菌柴，在菌柴上取下蜜环菌作为蜜环菌株母本，筛选出丛生、粗细适宜、生长健硕、顶端白色的菌索，将这些菌索分离出来若干段置于培养皿中，然后按无菌操作规程将菌索接种到PDA试管斜面培养基上，在恒温25℃，相对湿度60％条件下培育6天，然后选择长入培养基内的幼嫩菌索，这个步骤可以挑选出杂菌，对菌种进行纯化，并且筛选出生长形态高度一致的菌索作为母种。(2)菌种扩繁，将母种置于培养皿利用液体培养基培育出种子液态菌种后接种到装有液体培养基的发酵罐继续培育成蜜环菌液体菌种，液体培养基为氨基酸0.1份、葡萄糖1份、磷酸二氢钾0.1份、微量元素0.1份，硫酸镁0.05份，水90份，蔗糖1份，在恒温25℃，相对湿度60％条件下培育25天。(3)将蜜环菌液体菌种移栽到固体培养基培育成栽培种，将以下重量份的材料，青冈木屑80份、石膏10份、琼脂2-4份、米糠或麦麸15份、玉米粉5份、硫酸镁0.2份加水配置固体培养基后进行装瓶，然后在无菌操作下将蜜环菌液体菌种接种到固体培养基上，在室温22℃，相对湿度65％的暗室培育55天得到栽培种。实施例2：(1)菌种选育，从天麻栽种时已经成熟的菌柴上或者栽培种的固体培养基上取下蜜环菌作为蜜环菌株母本，筛选出丛生、粗细适宜、生长健硕、顶端白色的菌索，将这些菌索分离出来若干段置于培养皿中，然后按无菌操作规程将菌索接种到PDA试管斜面培养基上，在恒温25℃，相对湿度80％条件下培育10天，然后选择长入培养基内的幼嫩菌索，这个步骤可以挑选出杂菌，对菌种进行纯化，并且筛选出生长形态高度一致的菌索作为母种。(2)菌种扩繁，将母种置于培养皿利用液体培养基培育出种子液态菌种后接种到装有液体培养基的发酵罐继续培育成蜜环菌液体菌种，液体培养基为氨基酸0.1分、葡萄糖3份、磷酸二氢钾0.2份、微量元素0.3份，硫酸镁0.1份，水100份，蔗糖2份，在恒温25℃，相对湿度80％条件下培育25天。(3)将蜜环菌液体菌种移栽到固体培养基培育成栽培种，将以下重量份的材料，青冈木屑85份、石膏10份、琼脂4份、米糠或麦麸20份、玉米粉8份、硫酸镁0.4份加水配置固体培养基后进行装瓶，然后在无菌操作下将蜜环菌液体菌种接种到固体培养基上，在室温26℃，相对湿度80％的暗室培育65天得到栽培种。上述实施例中氨基酸可以选择谷氨酸、甘氨酸或丙氨酸。微量元素可以选择磷酸氢钙、硫酸钾、硝酸钾、氧化铜和硝酸钙按同等重量份混合而成，当然也可以选择其它可行的配方，只要能保证为菌种的发育提供足够的微量元素即可。经过选种培育出的菌种比起直接使用菌种接种可以保证菌种的品质和优良性，均是挑选人工培育的丛生、粗细适宜、生长健硕、顶端白色的菌索分离出来进行选种培育，首先从源头就保证了菌源的质量，所以培育出来的栽培种生长状况更加的良好，菌丝相比更健壮，伴生天麻后空塘率由20％-15％降低至10％以下，而且经过纯化后可以保证菌种的纯洁度，将选种后的菌索按无菌操作规程将菌索接种到PDA试管斜面培养基上，在恒温25℃，相对湿度80％条件下培育10天，然后选择长入培养基内的幼嫩菌索，这个步骤可以挑选出杂菌，对菌种进行纯化，并且筛选出生长形态高度一致的菌索作为菌种，如此不仅可以避免其余的菌丝污染，而且原始菌种选育后再扩繁而成的菌种纯度为100％，不含任何杂菌，这样就可以保证最后栽培种培育成的菌丝健康壮硕，品种纯正。而传统的直接使用菌种来接种不仅无法保证菌种的纯洁度，而且菌种的质量也是参差不齐，这样的菌种培育成栽培种不仅会影响栽培种的质量和产量，而且会导致后期与天麻伴生后空塘率高。以上对本专利技术的实施方式作本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种天麻蜜环菌的培养方法，其特征在于包括以下步骤：(1)菌种选育，对蜜环菌株母本进行筛选、分离、纯化步骤选出母种；(2)菌种扩繁，将母种置于培养皿利用液体培养基培育出种子液态菌种后接种到装有液体培养基的发酵罐继续培育成蜜环菌液体菌种；(3)将蜜环菌液体菌种移栽到固体培养基培育成栽培种。

【技术特征摘要】
1.一种天麻蜜环菌的培养方法，其特征在于包括以下步骤：(1)菌种选育，对蜜环菌株母本进行筛选、分离、纯化步骤选出母种；(2)菌种扩繁，将母种置于培养皿利用液体培养基培育出种子液态菌种后接种到装有液体培养基的发酵罐继续培育成蜜环菌液体菌种；(3)将蜜环菌液体菌种移栽到固体培养基培育成栽培种。2.根据权利要求1所述的天麻蜜环菌的培养方法，其特征在于：所述液体菌种移栽到固体培养基后在室温22℃-26℃，相对湿度65％-80％的暗室培育55-65天得到栽培种。3.根据权利要求1所述的天麻蜜环菌的培养方法，其特征在于，所述液体培养基由以下重量份的材料组成：氨基酸0.1份、葡...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴玉昌，
申请(专利权)人：施秉县兴昌菌业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52