一种血浆分离及DNA提取方法技术

本申请的目的是公开一种血浆分离及DNA提取方法，包括：步骤一：做处理表单、试剂耗材准备和离心机预冷降温的实验准备；步骤二：标本接收后根据清单和打印的提取表核对样本；低速离心的采血管需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆，血浆吸取时需从上往下，分装2个2.mL离心管中；分完后血浆立即放入高速离心机离心；高速离心完成的血浆样本需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆,分装的2个2.mL离心管中；分离完成的血浆进行下一步实验或保存；步骤三：DNA提取包括自动提取和手动提取步骤，所述自动提取步骤包括：对照DNA提取流程表,核对样本编号；对照流程表,在深孔板各列加入提取试剂；流程科学，标准明确，实践操作效果好。

【技术实现步骤摘要】
一种血浆分离及DNA提取方法
本专利技术属于血浆分离及DNA提取领域，具体是指一种血浆分离及DNA提取方法。
技术介绍
在基因检测实验室，血浆分离及DNA提取是很多检测步骤的前序步骤，但是由于操作复杂，标准不统一，而且由于操作人员的经验和水平限制，由于操作失误造成的实验重复和试剂损耗,耽误时间和人力财力。因此，如何研发一种血浆分离及DNA提取方法，能够解决上述问题，便成为亟待解决的技术问题。
技术实现思路
本申请解决的主要问题是提供一种血浆分离及DNA提取方法，操作简单、流程科学，标准明确，实践操作效果好，以解决一种血浆分离及DNA提取方法成本高、流程不科学，标准不明确，实践操作效果不佳、操作难度高、难以复制操作的技术问题。为了解决上述技术问题，本专利技术公开了一种血浆分离及DNA提取方法，其特征在于，包括：步骤一：做处理表单、试剂耗材准备和离心机预冷降温的实验准备；步骤二：标本接收后根据清单和打印的提取表核对样本,检查样本是否存在样本管破裂、凝血等异常情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表；实验样本按顺序放进低速离心机,进行第一次低速离心,离心后的样本用试管架分装拿出,检查样本是否存在溶血、脂血情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表,其中溶血样本根据等级确定是否进行下一步实验；低速离心的采血管需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆，血浆吸取时需从上往下，分装2个2.mL离心管中；分完后血浆立即放入高速离心机离心；高速离心完成的血浆样本需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆,分装的2个2.mL离心管中；分离完成的血浆进行下一步实验或保存；步骤三：DNA提取包括自动提取和手动提取步骤，所述自动提取步骤包括：对照DNA提取流程表,核对样本编号；对照流程表,在深孔板各列加入提取试剂；对照流程表,在深孔板的第1和第7列的各孔加入不同的样本；深孔板小心安装到仪器的工作台,插入搅拌棒,选择程序运行开始DNA提取，得到提取完成的DNA。进一步的，所述步骤一中具体包括：处理表单:导出岗位清单,打印DNA提取表；试剂耗材准备:准备垃圾桶、移液枪、枪头、离心管、蓝冰板等实验中需要的仪器和耗材；将离心机预冷降温至4度。进一步的，所述步骤三还包括：得到提取完成的DNA按照顺序转4uL到浅孔板，放置-2℃保存,开启仪器的紫外灯,进行自净。进一步的，所述手动提取步骤包括：血浆加PK加磁珠经过旋涡离心，加MLK经过旋涡离心后，37℃恒温混匀仪中放置混匀，通过微离心,上磁力架,静置待澄清，弃上清,加MW1,涡旋微离心,上磁力架,静置待澄清弃上清,加入MW2,涡旋，微离心后上磁力架,静置待澄清后弃上清,加入MW2,涡旋后微离心,上磁力架,静置待澄清，微离心,去残留液,室温晾干磁珠，提前预热AE，加入bufferAE,涡旋打散磁珠，提前调好恒温混匀仪程序，恒温混匀仪中放置，转速，微离心,上磁力架,静置待澄清，澄清后转到EP管中,保存。进一步的，所述步骤三在DNA提取前还包括：试剂耗材准备:根据样本数量选择是否使用自动化提取仪,准备实验用到的试剂和耗材，试剂盒第一次打开写上“:开盒日期,姓名首字母MW2配制后需要在瓶盖加酒精处打钩,并在瓶身写上“加酒精x-mL,日期,姓名首字母”；配置PK,需要在瓶身上写上“已配PK,日期,姓名首字母”；提取磁珠需提前3分钟放置室温温,配制制的磁珠GMX写上“G磁珠MIX,日期,姓名首字母”；仪器准备:预先开启自动提取仪。进一步的，所述步骤二中，吸取时从液面开始吸,枪头不要插得太深,吸取血浆时,至少保证采血管中剩余1厘米的血浆,如遇血浆量过少,可适当减少吸取血浆的体积；离心时,所有的EP管保持一致的朝向,开口方向面对离心机的中心，分离血浆时要在冰盒上操作,如等待离心机,应将血浆放4度冰箱，完成分离的血浆,需要立即进行下一步的提取或放在-2度保存。本申请提供的血浆分离及DNA提取方法操作简单便利并且灵活、降低测序成本，减少测序流程，提高劳动效率，流程科学，标准明确，实践操作效果好。具体实施方式如在说明书及权利要求当中使用了某些词汇来指称特定组件。本领域技术人员应可理解，硬件制造商可能会用不同名词来称呼同一个组件。本说明书及权利要求并不以名称的差异来作为区分组件的方式，而是以组件在功能上的差异来作为区分的准则。说明书后续描述为实施本申请的较佳实施方式，然所述描述乃以说明本申请的一般原则为目的，并非用以限定本申请的范围。本申请的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。实施例一：一种血浆分离及DNA提取方法，其特征在于，包括：步骤一：做处理表单、试剂耗材准备和离心机预冷降温的实验准备；步骤二：标本接收后根据清单和打印的提取表核对样本,检查样本是否存在样本管破裂、凝血等异常情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表；实验样本按顺序放进低速离心机,进行第一次低速离心:1600g(RCF),10分钟,离心后的样本用试管架分装拿出,检查样本是否存在溶血、脂血情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表,其中溶血样本根据等级确定是否进行下一步实验，D级和E级需退单重抽血；低速离心的采血管需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆，血浆吸取时需从上往下，分装2个2.0mL离心管中，每管1800uL；分完后血浆立即放入高速离心机离心，1600g(RCF),10分钟；高速离心完成的血浆样本需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆,分装的2个2.0mL离心管中,1管400(600)uL和1管1800uL；分离完成的血浆进行下一步实验或保存；步骤三：DNA提取包括自动提取和手动提取步骤，所述自动提取步骤包括：对照DNA提取流程表,核对样本编号；对照流程表,在深孔板各列加入提取试剂；对照流程表,在深孔板的第1和第7列的各孔加入不同的样本；深孔板小心安装到仪器的工作台,插入搅拌棒,选择程序运行开始DNA提取，得到提取完成的DNA。所述步骤一中具体包括：处理表单:导出岗位清单,打印DNA提取表；试剂耗材准备:准备垃圾桶、移液枪、枪头、离心管、蓝冰板等实验中需要的仪器和耗材；将离心机预冷降温至4度。所述步骤三还包括：得到提取完成的DNA按照顺序转40uL到浅孔板,标记(格式样本首位编号+日期+姓名首字母)后放置-20℃保存,开启仪器的紫外灯,进行自净(1小时)。所述手动提取步骤包括：400uL血浆加20uLPK加30uL磁珠经过旋涡离心，加500mlMLK经过旋涡离心后，37℃恒温混匀仪中放置混匀15min,转速1000rpm，通过微离心,上磁力架,静置3min待澄清，弃上清,加500u1MW1,涡旋15S微离心,上磁力架,静置1min待澄清弃上清,加入500u1MW2,涡旋15S，微离心后上磁力架,静置1min待澄清后弃上清,加入500u1MW2,涡旋15S后微离心,上磁力架,静置1min待澄清，微离心,去残留液,室温5-10min晾干磁珠，37度提前预热AE。加入41ulbufferAE,涡旋1min打散磁珠，提前调好恒温混匀仪程序。37℃恒温混匀仪中放置5min,转速1000rpm，微离心,上磁力架,静置1min待澄清，澄清后转40ul到EP管中,-20℃保存。所述步骤三在DNA提取前还包括：试剂耗材准备:根据样本数量选择是否使用自动化提取仪,准备实验用到的试剂和耗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血浆分离及DNA提取方法，其特征在于，包括：步骤一：做处理表单、试剂耗材准备和离心机预冷降温的实验准备；步骤二：标本接收后根据清单和打印的提取表核对样本,检查样本是否存在样本管破裂、凝血等异常情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表；实验样本按顺序放进低速离心机,进行第一次低速离心,离心后的样本用试管架分装拿出,检查样本是否存在溶血、脂血情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表,其中溶血样本根据等级确定是否进行下一步实验；低速离心的采血管需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆，血浆吸取时需从上往下，分装2个2.mL离心管中；分完后血浆立即放入高速离心机离心；高速离心完成的血浆样本需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆,分装的2个2.mL离心管中；分离完成的血浆进行下一步实验或保存；步骤三：DNA提取包括自动提取和手动提取步骤，所述自动提取步骤包括：对照DNA提取流程表,核对样本编号；对照流程表,在深孔板各列加入提取试剂；对照流程表,在深孔板的第1和第7列的各孔加入不同的样本；深孔板小心安装到仪器的工作台,插入搅拌棒,选择程序运行开始DNA提取，得到提取完成的DNA。

【技术特征摘要】
1.一种血浆分离及DNA提取方法，其特征在于，包括：步骤一：做处理表单、试剂耗材准备和离心机预冷降温的实验准备；步骤二：标本接收后根据清单和打印的提取表核对样本,检查样本是否存在样本管破裂、凝血等异常情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表；实验样本按顺序放进低速离心机,进行第一次低速离心,离心后的样本用试管架分装拿出,检查样本是否存在溶血、脂血情况,如存在异常样本须填写血液标本质量监控表,其中溶血样本根据等级确定是否进行下一步实验；低速离心的采血管需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆，血浆吸取时需从上往下，分装2个2.mL离心管中；分完后血浆立即放入高速离心机离心；高速离心完成的血浆样本需放置在预冷的蓝冰上吸取血浆,分装的2个2.mL离心管中；分离完成的血浆进行下一步实验或保存；步骤三：DNA提取包括自动提取和手动提取步骤，所述自动提取步骤包括：对照DNA提取流程表,核对样本编号；对照流程表,在深孔板各列加入提取试剂；对照流程表,在深孔板的第1和第7列的各孔加入不同的样本；深孔板小心安装到仪器的工作台,插入搅拌棒,选择程序运行开始DNA提取，得到提取完成的DNA。2.根据权利要求1所述的血浆分离及DNA提取方法，其特征在于，所述步骤一中具体包括：处理表单:导出岗位清单,打印DNA提取表；试剂耗材准备:准备垃圾桶、移液枪、枪头、离心管、蓝冰板等实验中需要的仪器和耗材；将离心机预冷降温至4度。3.根据权利要求2所述的血浆分离及DNA提取方法，其特征在于，所述步骤三还包括：得到提取完成的DNA按照顺序转4uL到浅孔板，放置-2℃保存,开启仪器的紫外灯,进行自净。4.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：李慧源，代冰，
申请(专利权)人：长沙金域医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43