用于确定免疫抑制患者中体液应答的方法技术

本发明专利技术涉及一种在免疫抑制受试者中确定由于存在靶标感染原而引起的体液应答的方法，其通过在所述受试者的生物样本E1中检测当所述受试者感染或已经感染所述靶标感染原时其能够产生的至少一种靶标抗体，所述方法包括以下步骤：a)提供体积V1的样本E1；b)根据稀释比R1，用体积D1的稀释剂稀释体积V1，其中R1等于V1/(V1+D1)，稀释比R1高于非免疫抑制受试者情况时所用的稀释比R2，R2等于V2/(V2+D2)，其中V2和D2分别是非免疫抑制受试者情况时所用的样本E2的体积和稀释剂的体积，以便获得稀释样本；c)在所得的稀释样本中检测所述至少一种靶标抗体，以得出关于体液应答存在可能性的结论。本发明专利技术的另一主题是一种从免疫抑制或非免疫抑制受试者的生物样本中确定由于存在靶标感染原而引起的体液应答的方法，其中根据待研究受试者的免疫抑制或非免疫抑制状态，来选择样本的稀释比。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于确定免疫抑制患者中体液应答的方法本专利技术涉及在受试者中检测应答感染原的体液应答的方法的领域。本专利技术旨在用于免疫抑制受试者。应答外来物质，特别是感染原(细菌、病毒、真菌和寄生虫)时，受试者的生物体会引发免疫应答。体液应答对应于免疫球蛋白(抗体)的产生。这些免疫球蛋白扩散到受试者的血液、组织或粘膜中，并允许生物体自我防御感染原。这种防御可能是以能够中和或防止感染原繁殖或感染原引起新感染的形式。目前，人口中不可忽视的部分处于免疫抑制状态。这种免疫抑制是多种临床情况的结果，其特别包括先天性免疫缺陷、由于免疫系统老化引起的缺陷(免疫衰老)(这是65岁以上观察到的)、与各种疾病(糖尿病、慢性炎症反应、肿瘤形成、血液病、慢性肝病、VIH感染、慢性肾功能不全等)有关的免疫缺陷、某些药物治疗(皮质激素疗法、干扰素、伴随移植物接受的免疫抑制剂治疗等)或手术干预(脾切除)诱导的免疫缺陷。免疫抑制患者对病毒、细菌和/或真菌感染原具有更大的易感性，并且因此需要对于策略和诊断工具以及预防性或治疗性治疗而言适合的医疗护理。每种免疫抑制情况都很复杂，并且以特定的免疫谱为特征。体外诊断测试(IVD)是用于检测对感染原具有特异性的免疫球蛋白(抗体)并确定受试者对所述感染原的体液应答的工具之一。IVD测试产生的检测结果为阴性(没有体液应答，对应于被认为不存在抗体的结果)，或阳性(存在体液应答，对应于被认为存在抗体的结果)，阴性结果(测试的特异性)和阳性结果(测试的灵敏度)被阳性阈值或参考信号分开。在程序性免疫抑制(例如移植、脾切除术)之前，可以通过某些预防感染的疫苗来确保患者得到保护。通过存在特定的免疫球蛋白可以保证疫苗保护的质量，免疫球蛋白的存在可以通过相应的IVD测试结果进行评估。然而，已知免疫抑制可能导致疫苗免疫保护的消退、甚至消失(HautConseildelaSantéPublique，Vaccinationdespersonnesimmunodépriméesouaspléniques；Recommandations；Rapport2012)。回归护理可以使用连续的IVD测试结果进行。对于这种特殊的善后工作，当患者的情况发生变化时，IVD测试可能会出现错误，从而导致通常被认为是正常群体的数据结果。事实上，IVD测试声明了灵敏度和特异性测量结果，这些测量结果被确认为代表正常群体的样本组群。血清或更一般地说来自免疫抑制患者的样本在靶向感染原的诊断测试中应答不同。事实上，免疫抑制可能是造成免疫球蛋白量的减少程度增加或减少的原因，这种免疫球蛋白缺陷可能是对测试错误应答的起源。免疫抑制群体不代表正常群体，并且用正常群体样本确定的测试阳性阈值不再相关(特别参见Zhang等人，Clin.Microbiol.Newslett.2012,34,13,101-105以及MacedodeOliveira等人J.Clin.Virol.2006,35,21-25)。难以针对免疫抑制群体开发专门的测试，因为免疫抑制在统计学上不是正态的，其对应于个体情况，且在数量和质量上强度不同，并且如果它是由一次性免疫抑制剂治疗或非慢性病理所致，则性质上是短暂瞬时的。然而，对感染更敏感的免疫抑制患者需要特定的诊断测试，尽管情况具有特异性，但其阳性阈值也具有代表性。本专利技术要解决的技术问题是使本领域技术人员能够采用最初用于检测针对非免疫抑制群体的体液应答的一种试剂盒或装置，并将其用于免疫抑制群体，而不改变试剂盒或装置的检测试剂。在这方面，本专利技术提供了一种确定方法，用于确定免疫抑制受试者中由于存在靶标感染原而引起的体液应答，其通过在所述受试者的生物样本E1中检测当所述受试者感染或已经感染所述靶标感染原时所述受试者或者更确切地说受试者的生物体能够产生的至少一种靶标抗体，所述方法包括以下步骤：a)提供体积V1的样本E1；b)按照稀释比R1，用体积D1的稀释剂稀释所述体积V1，其中所述稀释比R1等于V1/(V1+D1)，所述稀释比R1高于非免疫抑制受试者所用的稀释比R2，R2等于V2/(V2+D2)，其中V2和D2分别是非免疫抑制受试者所用的样本E2的体积和稀释剂的体积，以此获得稀释样本；以及c)在所得的稀释样本中检测所述至少一种靶标抗体，以得出关于体液应答存在可能性的结论。本专利技术提出使用用于体外检测抗体的相同试剂盒或相同装置，其经验证用于正常群体，在免疫抑制情况下也提供可靠的结果。以下的详细描述使得本专利技术能够被更好地理解。本专利技术的方法使用适合于抗体检测从而检测受试者中的体液应答的试剂盒或装置。术语“试剂盒”是指检测所需并与可能包含或可能不包含电子元件的仪器一同使用的试剂套组。术语“装置”是指检测所需的试剂以及使用试剂的仪器的组合。在本专利技术的背景下，检测到的体液应答是由于当前或过去存在的感染原引起的这种应答。术语“感染原”是指负责感染或侵染的致病生物剂，并且因此包括病毒、细菌、寄生虫和真菌，特别是较低级(或微观)真菌。细菌可能是需氧或厌氧的。可特别提到的是细菌艰难梭菌(Clostridiumdifficile)、幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)、肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae)、梅毒螺旋体(Treponemapallidum)(导致梅毒)和布氏疏螺旋体(Borreliaburgdorferisensulato)(导致莱姆病)。可能提及的病毒的实例是导致风疹的病毒、巨细胞病毒(CMV)、疱疹病毒(HHV-1至HHV-8)、导致麻疹的病毒、导致腮腺炎的病毒、导致水痘的病毒、肝病毒：HBV、HCV、HAV和HEV、HIV病毒、Epstein-Barr病毒EBV(单核细胞增多症)、西尼罗河病毒、登革热病毒和乳头瘤病毒，特别是HPV-16和HPV-18。真菌可以是单细胞的(酵母)或多细胞(丝状真菌或霉菌)。可提及的真菌的实例是念珠菌属(Candida)特别是白色念珠菌(Candidaalbicans)、隐球菌属(Cryptococcus)特别是新型隐球菌(Cryptococcusneoformans)和曲霉属(Aspergillus)特别是烟曲霉(A.fumigatus)、黑曲霉(A.niger)、构巢曲霉(A.nidulans)、黄曲霉(A.flavus)、棒曲霉(A.clavatus)。寄生虫，即以牺牲另一种生物为代价的各种大小的生物，可能是体外寄生虫或体内寄生虫，更确切地说是节肢动物或蠕虫，如蛲虫、绦虫、引起蛔虫病的蛔虫、引起胆汁吸虫病的血吸虫、肝吸虫和原生动物。可以提及的更具体的寄生虫实例是寄生虫刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)(导致弓形体病的寄生虫)和克氏锥虫(Trypanosomiacruzi)(导致Chagas病的寄生虫)。在本专利技术的背景下，抗体的检测在体外进行。检测到的抗体可以是免疫球蛋白IgM和/或IgG和/或IgE和/或IgA。本专利技术的方法涉及检测免疫抑制受试者中的抗体。术语“受试者”是指动物或人受试者。术语“免疫抑制受试者”是指与正常患者相比，具有免疫缺陷的受试者。一般而言，免疫抑制受体者属于下列一种或另一种类别：-具有先天性免疫缺陷的受试者。这可能是：·纯的缺陷，特别是对应于原始的CD4或CD8缺本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在免疫抑制受试者中确定由于存在靶标感染原而引起的体液应答的确定方法，其通过在所述受试者的生物样本E1中检测当所述受试者感染或已经感染所述靶标感染原时能够产生的至少一种靶标抗体，所述方法包括以下步骤：a)提供体积V1的样本E1；b)以稀释比R1，用体积D1的稀释剂稀释所述体积V1，其中所述稀释比R1等于V1/(V1+D1)，所述稀释比R1高于非免疫抑制受试者所用的稀释比R2，R2等于V2/(V2+D2)，其中V2和D2分别是非免疫抑制受试者所用的样本E2的体积和稀释剂的体积，以便获得稀释样本；c)在所得的稀释样本中检测所述至少一种靶标抗体，以得出关于体液应答存在可能性的结论。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.14 FR 16502801.一种在免疫抑制受试者中确定由于存在靶标感染原而引起的体液应答的确定方法，其通过在所述受试者的生物样本E1中检测当所述受试者感染或已经感染所述靶标感染原时能够产生的至少一种靶标抗体，所述方法包括以下步骤：a)提供体积V1的样本E1；b)以稀释比R1，用体积D1的稀释剂稀释所述体积V1，其中所述稀释比R1等于V1/(V1+D1)，所述稀释比R1高于非免疫抑制受试者所用的稀释比R2，R2等于V2/(V2+D2)，其中V2和D2分别是非免疫抑制受试者所用的样本E2的体积和稀释剂的体积，以便获得稀释样本；c)在所得的稀释样本中检测所述至少一种靶标抗体，以得出关于体液应答存在可能性的结论。2.根据权利要求1所述的确定方法，其特征在于其具有以下特征：-提供用于检测针对所述感染原的抗体的试剂盒或装置，其因此能够在受试者中确定由于存在所述靶标感染原而引起的体液应答；-提供稀释剂以稀释测试样本，所述稀释剂可构成所述试剂盒或检测装置的一部分；-提供等于V2/(V2+D2)的稀释比R2，其适用于非免疫抑制受试者群体；-提供等于V1/(V1+D1)的稀释比R1，其适用于免疫抑制受试者群体，其中R1>R2；-考虑从中获得待分析样本的受试者的免疫抑制状态，来选择稀释比R1。3.一种在免疫抑制受试者或非免疫抑制受试者中确定由于存在靶标感染原而引起的体液应答的确定方法，其通过在所述受试者的生物样本中检测当所述受试者感染或已经感染所述靶标感染原时其能够产生的至少一种靶标抗体，所述方法特征在于其具有以下特征：-提供用于检测针对感染原的抗体的试剂盒或装置，其因此能够在受试者中确定由于存在所述靶标感染原而引起的体液应答；-提供稀释剂以稀释测试样本，所述稀释剂可构成所述试剂盒或检测装置的一部分；-提供等于V...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·布沙尔，
申请(专利权)人：生物梅里埃公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR