用于针对肠外致病性大肠杆菌的免疫保护的方法和组合物技术

描述了用于诱导针对肠外致病性大肠杆菌（ExPEC）的免疫应答的组合物和方法，从而提供针对与ExPEC相关的疾病的免疫保护。特别地，描述了关于使用与铜绿假单胞菌（EPA）载体蛋白的解毒外毒素A共价结合的大肠杆菌多糖抗原O25B、O1A、O2和O6A的缀合物作为疫苗的组合物和方法，用于预防由ExPEC血清型O1A、O2、O6A和O25B引起的侵袭性ExPEC疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于针对肠外致病性大肠杆菌的免疫保护的方法和组合物相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119（e）要求于2015年8月24日提交的美国临时专利申请号62/209,091、以及于2015年8月27日提交的美国临时专利申请号62/210,655的优先权，所述美国临时专利申请的公开内容以引用的方式全文并入本文。专利
本专利技术涉及用于诱导针对肠外致病性大肠杆菌（Escherichiacoli）（ExPEC）的免疫应答的组合物和方法，从而提供针对与ExPEC相关的疾病的免疫保护。特别地，本专利技术的实施方案涉及多价疫苗以及该疫苗提供针对ExPEC感染的有效免疫保护的用途，所述多价疫苗含有各自与铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）载体蛋白的解毒外毒素A共价结合的大肠杆菌多糖抗原O25B、O1A、O2和O6A的缀合物。专利技术背景肠外致病性大肠杆菌（ExPEC）是人肠道的通常无害的居住者。然而，ExPEC菌株可以具有毒力因子用于定居和感染胃肠道外的部位，以引起不同的严重侵袭性疾病，每年导致显著的发病率、死亡率和成本（参见例如Johnson等人，JLabClinMed.2002；139（3）:155-162；Kohler等人，IntJMedMicrobiol.2011；301（8）:642-647；Foxman，AmJMed.2002；113Suppl1A:5S-13S；和Russo等人，MicrobesInfect.2003；5（5）:449-456）。ExPEC菌株是泌尿道感染（UTI）最常见的原因。它们也是手术部位感染和新生儿脑膜炎的促成因素（Johnson等人，2002；和Russo等人，2003），与腹部和盆腔感染以及医院性肺炎有关，并且偶尔涉及其他肠外感染如骨髓炎、蜂窝织炎和伤口感染。所有这些主要感染部位都可以导致ExPEC菌血症（Russo等人，2003）。对抗生素的细菌抗性是针对细菌感染的战斗中的主要问题，并且多药抗性（MDR）大肠杆菌菌株变得越来越普遍（参见例如Schito等人，2009，Int.J.Antimicrob.Agents34（5）:407-413；和Pitout等人，2012，ExpertRev.Anti.Infect.Ther.10（10）:1165-1176）。ExPEC序列131型的出现和快速全球传播被视为增加的药物抗性包括多药抗性的主要驱动因素（Johnson等人，AntimicrobAgentsChemother.2010；54（1）:546-550；Rogers等人，JAntimicrobChemother.2011；66（1）:1-14）。该克隆在所有ExPEC临床分离株的12.5%至30%中发现，主要显示出血清型O25B:H4，并且显示高水平的氟喹诺酮抗性，其通常伴随有甲氧苄啶/磺胺甲噁唑抗性（Rogers等人，2011和Banerjee等人，AntimicrobAgentsChemother.2014；58（9）:4997-5004）。O-抗原血清型基于O多糖抗原的化学结构，所述O多糖抗原是革兰氏阴性菌中的脂多糖（LPS）的外膜部分。已报道了超过180种大肠杆菌O-抗原（Stenutz等人，FEMSMicrobialRev.2006；30:382-403）。ExPEC感染可以由任何血清型引起。尽管在ExPEC感染中存在某些血清型的过度呈现，但来自ExPEC分离株的表面多糖仍显示出相当大的抗原性多样性，这使得基于表面多糖的ExPEC疫苗的开发极具挑战性（Russo等人，Vaccine.2007；25:3859-3870）。另外，某些O-抗原可能具有弱免疫原性。此外，基于来自肺炎球菌缀合物疫苗的研究，当许多血清型可以引起疾病时，疫苗组合物如用于包括在疫苗中的血清型的选择以及所包括的血清型的剂量水平可能是关键的，因为使用针对某些血清型的疫苗可能潜在地增加来自未包括在疫苗中的血清型的携带和疾病，或甚至包括在疫苗中但仅在针对血清型的免疫中微弱地有效（Lipsitch，EmergingInfectiousDiseases；1999，5:336-345）。理想地，疫苗应该最大化其在由疫苗中包括的血清型引起的疾病预防中的有益效应，同时最小化来自增加的非疫苗血清型携带的额外疾病的风险。相应地，本领域存在针对ExPEC的疫苗的需要。具体地，存在基于表面多糖的ExPEC疫苗的需要，所述ExPEC疫苗可以用于提供针对ExPECO25B血清型和ExPEC中普遍存在的其他血清型的有效免疫保护。专利技术概述已惊讶地发现，当作为各自与铜绿假单胞菌（EPA）载体蛋白的解毒外毒素A共价结合的O-抗原缀合物进行共价测试时，大肠杆菌O25B抗原看起来比其他大肠杆菌O-抗原（例如O1A、O2和O6A）具有略微较低的免疫原性，并且具有含有大肠杆菌O25B抗原的EPA缀合物和一种或多种另外的大肠杆菌O-抗原的EPA缀合物的组合物以适当剂量和比率的疫苗接种，提供了针对ExPECO25B血清型和一种或多种另外的ExPECO-血清型的改善的免疫应答。相应地，在一个一般方面，本专利技术涉及组合物，其包含以8至48μg/ml的第一浓度的大肠杆菌O25B抗原和以第二浓度的至少一种另外的大肠杆菌O抗原，所述第二浓度为第一浓度的10%至100%，其中大肠杆菌O25B抗原和至少一种另外的大肠杆菌O-抗原各自独立地与EPA载体蛋白共价结合，并且所述组合物在有此需要的个体中有效诱导针对大肠杆菌O25B抗原和至少一种另外的大肠杆菌O抗原的免疫应答。在一个优选实施方案中，至少一种另外的大肠杆菌O-抗原以至少5μg/ml的第二浓度，更优选以至少8μg/ml的第二浓度存在。在一个实施方案中，本专利技术涉及组合物，其包含以10至36μg/ml的第一浓度的大肠杆菌O25B抗原和选自以下的至少一种另外的大肠杆菌O抗原：大肠杆菌O1A抗原、大肠杆菌O2抗原和大肠杆菌O6A抗原，其中另外的大肠杆菌O抗原各自具有的浓度独立地为组合物中的大肠杆菌O25B抗原的第一浓度的50%至100%，并且大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原各自独立地与EPA载体蛋白共价结合。在一个优选实施方案中，本专利技术涉及组合物，其包含以10至36μg/ml的第一浓度的大肠杆菌O25B抗原。以及第二浓度的各大肠杆菌O1A抗原、E.大肠杆菌O6抗原和大肠杆菌O6A抗原，其中大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原各自独立地与EPA载体蛋白共价结合，并且第一浓度与第二浓度的比率为1:1至2:1。优选地，组合物包含重量比为1:1:1:1或2:1:1:1的大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原多糖。更优选地，组合物包含16或32μg/ml的O25B抗原。在另一个一般方面，本专利技术涉及在有此需要的个体中诱导针对肠外致病性大肠杆菌（ExPEC）的免疫应答的方法。该方法包括向个体施用以4至24μg/施用的第一有效量的大肠杆菌O25B抗原，以及以第二有效量的至少一种另外的大肠杆菌O-抗原，所述第二有效量为第一有效量的10%至100%，其中大肠杆菌O25B抗原和至少一种另外的大肠杆菌O-抗原各自独立地与EPA载体蛋白共价结合，并且所述施用在个体中有效诱导针对大肠杆菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，其包含第一浓度的大肠杆菌O25B抗原多糖，以及第二浓度的各大肠杆菌O1A抗原多糖、大肠杆菌O2抗原多糖和大肠杆菌O6A抗原多糖，其中所述第一浓度与第二浓度的比率为1:1至2:1，所述大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原多糖各自独立地与铜绿假单胞菌载体蛋白的解毒外毒素A（EPA）共价结合，并且所述第一浓度为10至36 μg/ml。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.24 US 62/209,091;2015.08.27 US 62/210,6551.一种组合物，其包含第一浓度的大肠杆菌O25B抗原多糖，以及第二浓度的各大肠杆菌O1A抗原多糖、大肠杆菌O2抗原多糖和大肠杆菌O6A抗原多糖，其中所述第一浓度与第二浓度的比率为1:1至2:1，所述大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原多糖各自独立地与铜绿假单胞菌载体蛋白的解毒外毒素A（EPA）共价结合，并且所述第一浓度为10至36μg/ml。2.权利要求1的组合物，其包含重量比为1:1:1:1的所述大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原多糖。3.权利要求1的组合物，其包含重量比为2:1:1:1的所述O25B、O1A、O2和O6A抗原多糖。4.权利要求1至3中任一项的组合物，其包含16μg/mlO25B抗原多糖。5.权利要求1至3中任一项的组合物，其包含32μg/mlO25B抗原多糖。6.一种多价免疫组合物，其包含以5至18μg的第一剂量的大肠杆菌O25B抗原多糖，以及大肠杆菌O1A抗原多糖、大肠杆菌O2抗原多糖和大肠杆菌O6A抗原多糖，其各自的剂量独立地为所述第一剂量的50%至100%，其中所述大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原多糖各自独立地与铜绿假单胞菌载体蛋白的解毒外毒素A（EPA）共价结合。7.一种多价免疫组合物，其包含具有式O25B’结构的大肠杆菌O25B抗原多糖：具有式O1A’结构的大肠杆菌O1A抗原多糖：具有式O2’结构的大肠杆菌O2抗原多糖：具有式O6A’结构的大肠杆菌O6A抗原多糖：其中n独立地为5至25的整数，和所述大肠杆菌O25B、O1A、O2和O6A抗原多糖各自独立地与具有SEQIDNO：1的氨基酸序列的载体蛋白共价结合；和所述组合物中所述大肠杆菌O25B、O1A、O2、O6A抗原多糖的浓度分别为16:8:8:8μg/ml、16:16:16:16μg/ml、32:16:16:16μg/ml或32:32:32:32μg/ml。8.一种在有此需要的个体中诱导针对肠外致病性大肠杆菌（ExPEC）的免疫应答的方法，其包括向个体施用权利要求1至7中任一项的组合物。9.一种在有此需要的个体中诱导针对肠外致病性大肠杆菌（ExPEC）的免疫应答的方法，其包括向个体施用第一有效量的大肠杆菌O25B抗原多糖，以及第...

【专利技术属性】
技术研发人员：JT普尔曼，B雅克米恩，DR阿巴纳特，PI咏，PWM赫曼斯，MT科瓦里克，ML维特，SJ克姆勒，MA豪普特尔，V加姆比拉拉，M马利，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，杨森制药公司，
类型：发明
国别省市：比利时,BE