一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法技术

一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法，属于药物分析技术领域，以直链淀粉‑三（5‑氯‑2‑甲基苯基氨基甲酸酯）涂敷型色谱柱，以正己烷‑无水乙醇‑三氟乙酸为流动相，正己烷‑无水乙醇‑三氟乙酸的体积比为80:20:0.1，检测波长为215nm，流速为1ml/min，柱温为35℃，进样量为20μl进行检测，杂质F的结构式为

A method for determination of impurity F in Captopril Tablets by HPLC

A high performance liquid chromatographic method for the determination of impurity F in captopril tablets belongs to the field of pharmaceutical analysis technology. The column is coated with amylose tris (5_chloro_2_methylphenylcarbamate), and the mobile phase is n-hexane_anhydrous ethanol_trifluoroacetic acid, and the volume of n-hexane_anhydrous ethanol_trifluoroacetic acid. The ratio is 80:20:0.1, the detection wavelength is 215 nm, the flow rate is 1 ml/min, the column temperature is 35 C, the injection quantity is 20_ ml, the structure of impurity F is

【技术实现步骤摘要】
一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法
本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法。
技术介绍
卡托普利是最早发现的血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）,自20世纪90年代问世以来，已经从治疗高血压的专用药物转向治疗其他心血管疾病、类风湿性关节炎等疾病的临床用药发展，其具有巨大的临床价值。卡托普利又名巯甲基丙脯氨酸，其结构式如图1，其在欧洲药典中具有杂质A到杂质0共15个杂质，其中比较特使的是杂质F，其结构式如图2；通过对图1、图2的比较可知，杂质F为卡托普利的非对映异构体，故杂质F的测定就比较困难。经查阅文献可知，目前杂质F仅在EP原料标准中有其测定方法，在其他期刊文献，标准中没有记载；目前，EP原料药标准的测定方法是采用柱前衍生化后，气相色谱面积归一法测定含量。在对卡托普利片仿制药研发的过程中，需要对卡托普利片的杂质F进行研究，试验过程中发现采用EP原料标准测定方法测定卡托普利片中的杂质F时，存在操作繁琐，测定结果不稳定，重复性差的问题。
技术实现思路
本专利技术为克服上述现有技术不足，通过卡托普利片杂质F测定方法进行研究，提供了一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法。本专利技术的目的是通过下述技术方案来实现的：一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法，包括如下步骤：（1）卡托普利杂质F贮备液的制备称取卡托普利杂质F5mg，置于50mL量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为卡托普利杂质F贮备液；（2）系统适用性溶液的制备称取卡托普利对照品25mg，置于10ml量瓶中，加入步骤（1）卡托普利杂质F贮备液0.5mL，再加入无水乙醇4.5mL溶解，再用正己烷稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；（3）供试品溶液的制备称取卡托普利片细粉适量（约相当于卡托普利25mg），置于10mL量瓶中，加入无水乙醇约5mL，超声振摇提取5min，放冷至室温，再用正己烷稀释至刻度，摇匀，过0.45μm滤膜，取续滤液，作为供试品溶液；（4）自身对照品溶液的制备精密量取供试品溶液1ml，置于50mL量瓶中，以无水乙醇稀释至刻度，摇匀；再精密量取1mL置于10mL量瓶中，加入无水乙醇4mL，再以正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。（5）流动相的制备取正己烷800mL，无水乙醇200mL，加入三氟乙酸1mL，混匀，即得。（6）色谱系统建立以直链淀粉-三（5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯）涂敷型色谱柱，以正己烷-无水乙醇-三氟乙酸为流动相，正己烷-无水乙醇-三氟乙酸的体积比为80:20:0.1，检测波长为215nm，流速为1mL/min，柱温为35℃，进样量为20μL；（7）检测分析照高效液相色谱法（中国药典2015年四部通则0512）测定；精密量取系统适用性溶液20μl注入液相色谱仪，出峰顺序为卡托普利杂质F和卡托普利，二者分离度不小于2.0，精密量取自身对照品溶液注入液相色谱仪，主峰的信噪比不得小于10；精密量取自身对照品溶液20μL注入液相色谱仪，精密量取20μL供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；（8）计算依据步骤（7）记录的色谱图，用主成分自身对照法计算卡托普利片中的杂质F的含量，即得；具体计算公式如下：注：0.2%=自身对照溶液占供试品溶液的比例。本专利技术可以定量测定卡托普利片中的杂质F的含量，从而有效的控制卡托普利片的质量。根据本专利技术提供的方法系统适用性溶液中可以证明能使卡托普利与杂质F有效分离，具有精密度好，分离度好，自身对照溶液信噪比大于10，如果样品中含有杂质F可以检出。本专利技术涉及的一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F方法，为以后卡托普利片中杂质F的测定，提供了一种合理的测定方法。附图说明图1为卡托普利结构式；图2为卡托普利杂质F结构式；图3为系统适用性色谱图；图4为C161107批原料供试品溶液色谱图；图5为C161107批原料自身对照品溶液色谱图；图6为20170308批供试品溶液色谱图；图7为20170308批自身对照品溶液色谱图；图8为20170309批供试品溶液色谱图；图9为20170309批自身对照品溶液色谱图；图10为20170310批供试品溶液色谱图；图11为20170310批自身对照品溶液色谱图。具体实施方式以下通过具体实施例对本专利技术涉及的一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法作进一步的详细说明，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法，包括如下步骤：(1)卡托普利杂质F贮备液的制备称取卡托普利杂质F5mg，置于50ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为卡托普利杂质F贮备液；(2)系统适用性溶液的制备称取卡托普利对照品25mg，置于10ml量瓶中，加入（1）0.5ml，再加入无水乙醇4.5ml溶解，再用正己烷稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；(3)供试品溶液的制备称取卡托普利片细粉适量（约相当于卡托普利25mg），置于10ml量瓶中，加入无水乙醇约5ml，超声振摇提取5min，放冷至室温，再用正己烷稀释至刻度，摇匀，过0.45μm滤膜，取续滤液，作为供试品溶液；(4)自身对照品溶液的制备精密量取供试品溶液1ml，置于50ml量瓶中，以无水乙醇稀释至刻度，摇匀；再精密量取1ml置于10ml量瓶中，加入无水乙醇4ml，再以正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。(5)流动相的制备取正己烷800ml，无水乙醇200ml，加入三氟乙酸1ml，混匀，即得。(6)色谱系统建立以直链淀粉-三（5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯）涂敷型色谱柱,以正己烷-无水乙醇-三氟乙酸为流动相，正己烷-无水乙醇-三氟乙酸的体积比为80:20:0.1，检测波长为215nm，流速为1ml/min，柱温为35℃，进样量为20μl；(7)检测分析照高效液相色谱法（中国药典2015年四部通则0512）测定；精密量取系统适用性溶液20μl注入液相色谱仪，出峰顺序为卡托普利杂质F和卡托普利，二者分离度不小于2.0，精密量取自身对照品溶液注入液相色谱仪，主峰的信噪比不得小于10；精密量取自身对照品溶液20μl注入液相色谱仪，精密量取20μl供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；(8)计算依据步骤（7）记录的色谱图，用主成分自身对照法计算卡托普利片中的杂质F的含量，即得；具体计算公式如下：注：0.2%=自身对照溶液占供试品溶液的比例。采用以上方法分别对四批卡托普利片中的杂质F进行了检测，谱图如图4至11所示，谱图4至11所显示的卡托普利片中杂质F具体检测结果如表1所示。表1：卡托普利片中杂质F检测结果由表1测定结果可知：根据本专利技术提供的方法系统适用性溶液中可以证明能使卡托普利与杂质F有效分离，具有精密度高，分离度好，自身对照品溶液信噪比大于10，如果样品中含有对杂质F可以检出。本专利技术涉及的一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F方法，为以后卡托普利片中杂质F的测定，提供了一种合理的测定方法。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1) 制备0.1mg/ml的卡托普利杂质F的乙醇溶液作为卡托普利杂质F贮备液；(2) 称取卡托普利对照品25mg，置于10ml量瓶中，加入步骤（1）0.5mL卡托普利杂质F贮备液，再加入无水乙醇4.5ml溶解，再用正己烷稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；(3) 将卡托普利片研成细粉，精密称取相当于25mg卡托普利的细粉，置于量瓶中，加入无水乙醇使溶解，再用正己烷稀释至刻度，制成每1mL含卡托普利2.5mg的溶液，摇匀，过滤，作为供试品溶液；(4)精密量取供试品溶液1ml，置于50ml量瓶中，以无水乙醇稀释至刻度，摇匀；再精密量取1ml置于10ml量瓶中，加入无水乙醇4ml，再以正己烷稀释至刻度，摇匀，即得自身对照品溶液；(5) 以直链淀粉‑三（5‑氯‑2‑甲基苯基氨基甲酸酯）涂敷型色谱柱，以正己烷‑无水乙醇‑三氟乙酸为流动相，正己烷‑无水乙醇‑三氟乙酸的体积比为80:20:0.1，检测波长为215nm，流速为1ml/min，柱温为35℃，进样量为20μl；(6) 照中国药典2015年四部通则0512公布的高效液相色谱法进行测定；精密量取系统适用性溶液20μl注入液相色谱仪，出峰顺序为卡托普利杂质F和卡托普利，二者分离度不小于2.0，精密量取自身对照品溶液注入液相色谱仪，主峰的信噪比不得小于10；精密量取自身对照品溶液20μl注入液相色谱仪，精密量取20μl供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；(7)依据步骤（6）记录的色谱图，用主成分自身对照法计算卡托普利片中的杂质F的含量，即得；具体计算公式如下：...

【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱法测定卡托普利片中杂质F的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备0.1mg/ml的卡托普利杂质F的乙醇溶液作为卡托普利杂质F贮备液；(2)称取卡托普利对照品25mg，置于10ml量瓶中，加入步骤（1）0.5mL卡托普利杂质F贮备液，再加入无水乙醇4.5ml溶解，再用正己烷稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；(3)将卡托普利片研成细粉，精密称取相当于25mg卡托普利的细粉，置于量瓶中，加入无水乙醇使溶解，再用正己烷稀释至刻度，制成每1mL含卡托普利2.5mg的溶液，摇匀，过滤，作为供试品溶液；(4)精密量取供试品溶液1ml，置于50ml量瓶中，以无水乙醇稀释至刻度，摇匀；再精密量取1ml置于10ml量瓶中，加入无水乙醇4ml，再以正己烷稀释至刻度，摇匀，即得自身对照品溶液；(5)以直链淀粉-三（5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯）涂敷型色谱柱，以正己烷-无水乙醇-三氟乙酸为流动相，正己烷-无水乙醇-三氟乙酸的体积比为80:20:0.1，...

【专利技术属性】
技术研发人员：沙薇，郑海杰，李婷，
申请(专利权)人：郑州泰丰制药有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41