一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备氟苯尼考‑壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，具体包括如下步骤：(1)先溶解得到壳聚糖衍生物的溶液I；(2)将长链羧酸溶解，制得溶液Ⅱ；(3)将溶液I和溶液Ⅱ混合后，加入催化剂，控制体系酸碱度，在超声条件下反应得到壳聚糖‑长链羧酸自组装纳米胶束和催化剂的混合液；(4)混合液经离心分离、透析处理、冷冻干燥洗涤，得到壳聚糖‑长链羧酸纳米胶束；(5)壳聚糖‑长链羧酸纳米胶束在超声条件下与氟苯尼考混合，经过滤、干燥得到本发明专利技术的固体产品。具有操作方便、稳定、原料来源丰富等优点。采用了自组装和超声波粉碎的方法，结果使胶束更加致密、性能更加稳定，具有很好经济开发潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法
本专利技术属于新药研发
，具体涉及一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法。
技术介绍
氟苯尼考(Florfenicol，Flo)是新一代氯霉素类动物专用广谱抗生素，对多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及支原体等具有较强的抗菌活性，对溶血性巴氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌高度敏感，且氟苯尼考能通过血脑屏障对动物细菌性脑膜炎有很好的治疗效果。体外试验表明，氟苯尼考抗菌活性明显优于氯霉素、四环素、氨苄青霉素，在动物疾病防治上有广阔的应用前景。但氟苯尼考几乎不溶于水，只溶于部分有机溶剂，其普通制剂生物利用度较低，使用成本较高等缺陷限制了其广泛应用。研究表明，对于难溶性或亲脂性药物，可采用成盐、超细粉碎化及形成络合物等改变药物的物理化学性质的方法提高药物的溶解度和溶出速率，但这些方法都有一定的局限性，如中性化合物不适合制成盐类，超细粉碎得到的药物极细粉会降低药物的稳定性，有些药物难以形成络合物等。随着纳米技术的发展及其在医药领域的应用，纳米生物技术在增加难溶药物的溶解度、靶向定位给药、药物缓控释、疾病的诊断和辅助治疗等方面有了很大发展。在增加难溶药物溶解度方面，目前常用的纳米材料有纳米胶束，纳米粒，固体纳米脂质体等，其中纳米胶束是由具有两亲性聚合物在分子间作用力的作用下相互聚集形成的一种具有核/壳结构和纳米特性的材料，与普通胶束相比，纳米胶束具有更低的临界胶束浓度和更小的粒径，能在生理环境中表现出更好的生理活性。研究表明，在药物载体方面，纳米胶束的应用前景广阔，如将其应用于难溶性药物新制剂开发，不仅能够提高难溶性药物的溶解度、生物利用度，而且还可以降低其毒副作用。壳聚糖是天然大分子甲壳素通过脱乙酰基等而得的水溶性衍生物，它不仅具有良好的生物可降解性，生物粘附性和生物相容性，而且还具有消炎，抗菌等大多数聚合物所不具备的功能，壳聚糖分子富含高活性的游离的羟基和氨基，如在壳聚糖分子链上引入亲水基团及疏水基团可获得一类结构新颖的两亲性壳聚糖衍生物，因此，壳聚糖在药物研究领域的应用为世人所瞩目。
技术实现思路
针对现有技术中氟苯尼考的普通制剂存在的生物利用度较低，使用成本较高等缺陷限制了其广泛应用的问题，本专利技术的目的在于提供一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，即以壳聚糖衍生物为主要载体辅料制备可溶性的氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，以弥补已有技术的不足。本专利技术采取的技术方案为：一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，具体包括如下步骤：(1)采用壳聚糖衍生物为原料，先溶解得到质量浓度为4％-12％的壳聚糖衍生物的溶液I；(2)将长链羧酸溶解，制得质量浓度为1％-10％的溶液Ⅱ；(3)将步骤(1)中的溶液I和步骤(2)中的溶液Ⅱ按质量比为0.1-6混合，然后进行探头超声处理并向其中加入催化剂，加入pH调节试剂控制体系酸碱度为pH为1-12，在超声条件下，通过控制反应温度5-70℃、反应时间1-2h，即得到壳聚糖-长链羧酸自组装纳米胶束和催化剂的混合液；(4)壳聚糖-长链羧酸自组装纳米胶束和催化剂的混合液经离心分离、透析处理、冷冻干燥洗涤，得到壳聚糖-长链羧酸纳米胶束；(5)壳聚糖-长链羧酸纳米胶束，在超声条件下将其加入到有机分散相中与氟苯尼考混合，透析处理，最后经过滤、干燥得到本专利技术的固体产品。进一步的，所述步骤(1)中的壳聚糖衍生物的脱乙酰度范围是50％-98％，分子量为10,000Da-2,000Da。进一步的，所述步骤(1)中的壳聚糖衍生物包括部分脱乙酰基几丁质、全部脱乙酰基几丁质(即氨基多糖)、羧甲基氨基多糖、羟乙基氨基多糖、羟丙基氨基多糖、氨基多糖季氨盐或聚乙烯醇接枝氨基多糖。进一步的，所述步骤(2)中的长链羧酸为棕榈酸、油酸、共轭亚油酸、顺-15-二十四碳烯酸、脂蜡酸或亚油酸。进一步的，所述步骤(3)中的催化剂为EDC、NHS、DCC、DIC、HOBt、PyBop、DIEA中的任意两种的组合。更进一步的，所述步骤(3)中的催化剂采用EDC和NHs催化剂联合应用，EDC、NHS按照质量比(1-3):(2-6)混合。本反应体系的催化剂，也可称活化剂，如EDC在一定的pH值下可以活化长链羧酸的羧基，使其能够与氨基多糖的氨基发生缩合反应，NHS的存在可以使这种缩合反应的效率大大提高。进一步的，所述步骤(3)和步骤(5)中的超声条件一致且均为：控制超声输出功率10-200w，超声时间2-12s，间隔时间4-16s，超声次数60-150次。进一步的，所述步骤(3)中pH调节试剂为碳酸氢铵、氢氧化钠、氨水、氢氧化钾、盐酸或醋酸中的任意一种。进一步的，所述步骤(4)和步骤(5)中透析处理所使用的透析袋截留分子量(MwCO)为6kD-8kD或12kD-14kD或8kD-10kD；步骤(4)中冷冻干燥温度为-20℃--40℃，时间为24-48h。进一步的，所述步骤(5)中分散相为乙醇、低浓度醋酸、甲醇、异丙醇或正丁醇中的任意一种。氟苯尼考水溶性很差，所以，是先将氟苯尼考溶解在有机分散相中，有利于提高溶解性，再与壳聚糖-长链羧酸纳米胶束混合，最终制备氟苯尼考壳聚糖-长链羧酸纳米胶束冻干粉。进一步的，所述步骤(5)中壳聚糖-长链羧酸纳米胶束与氟苯尼考按照质量比(1-6):(1-4)混合，得到的氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束通过20-45℃干燥便得到胶束制品，便于储存和运输，还可以提高制剂的稳定性。本专利技术的有益效果为：本专利技术利用壳聚糖糖链上存在的-NH2等高活性位点，在催化剂的作用下首先与长链羧酸的羧基进行化学嫁接形成含有亲水性壳聚糖部分和疏水性长链羧酸部分的具有两亲性的阳离子接枝聚合物，随后该聚合物在水性介质中在一定条件下形成内部疏水、外部亲水的阳离子聚合物胶团，再经超声分散、过滤透析、冷冻干燥最终制得目标产物-水溶性的氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉，经查新证明国内外无类同报告，该研究对于提高氟苯尼考的疗效，降低其不良反应，并为开发新型氟苯尼考替代药物以及适合畜禽群体给药的氟苯尼考饮水剂提供了新的制造技术，具有巨大的社会效益及经济效益。本专利技术具有操作方便，制备技术工艺简便稳定和制造成本低廉等优点。本专利技术对原材料有广泛的适用性，所有具有游离氨基的甲克质衍生物均可以适用。因此，本专利技术的原料来源十分广泛。本专利技术的重要意义还在于纳米胶束制备中采用了自组装和超声波粉碎的方法，结果使胶束更加致密、性能更加稳定。本专利技术采用的材料安全无毒副作用、具有良好的生物相容性、生物可降解性、成束性能好等特点。本专利技术开发得到一种新型氟苯尼考替代药物，具有良好的研究和开发应用前景。因此，该专利技术技术具有很好经济开发潜力。附图说明图1为本专利技术实施例2中的氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉样品图。图2为本专利技术实施例2中的壳聚糖(CS)、长链羧酸(LCCA)和壳聚糖-长链羧酸阳离子接枝聚合物(CS-LCCAcomplex)的红外谱图。图3为本专利技术实施例2中的CS-LCCA阳离子接枝聚合物(CS-LCCAcomplex)、CS-LCCA空白纳米胶束(CS-LCCAnanomicelle)、Flo、Flo-CS-LC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备氟苯尼考‑壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(1)采用壳聚糖衍生物为原料，先溶解得到质量浓度为4％‑12％的壳聚糖衍生物的溶液I；(2)将长链羧酸溶解，制得质量浓度为1％‑10％的溶液Ⅱ；(3)将步骤(1)中的溶液I和步骤(2)中的溶液Ⅱ按质量比为0.1‑6混合，然后进行探头超声处理并向其中加入催化剂，加入pH调节试剂控制体系酸碱度为pH为1‑12，在超声条件下，通过控制反应温度5‑70℃、反应时间1‑2h，即得到壳聚糖‑长链羧酸自组装纳米胶束和催化剂的混合液；(4)壳聚糖‑长链羧酸自组装纳米胶束和催化剂的混合液经离心分离、透析处理、冷冻干燥洗涤，得到壳聚糖‑长链羧酸纳米胶束；(5)壳聚糖‑长链羧酸纳米胶束，在超声条件下将其加入到有机分散相中与氟苯尼考混合，透析处理，最后经过滤、干燥得到本专利技术的固体产品。

【技术特征摘要】
1.一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(1)采用壳聚糖衍生物为原料，先溶解得到质量浓度为4％-12％的壳聚糖衍生物的溶液I；(2)将长链羧酸溶解，制得质量浓度为1％-10％的溶液Ⅱ；(3)将步骤(1)中的溶液I和步骤(2)中的溶液Ⅱ按质量比为0.1-6混合，然后进行探头超声处理并向其中加入催化剂，加入pH调节试剂控制体系酸碱度为pH为1-12，在超声条件下，通过控制反应温度5-70℃、反应时间1-2h，即得到壳聚糖-长链羧酸自组装纳米胶束和催化剂的混合液；(4)壳聚糖-长链羧酸自组装纳米胶束和催化剂的混合液经离心分离、透析处理、冷冻干燥洗涤，得到壳聚糖-长链羧酸纳米胶束；(5)壳聚糖-长链羧酸纳米胶束，在超声条件下将其加入到有机分散相中与氟苯尼考混合，透析处理，最后经过滤、干燥得到本发明的固体产品。2.根据权利要求1所述一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的壳聚糖衍生物的脱乙酰度范围是50％-98％，分子量为10,000Da-2,000Da。3.根据权利要求1所述一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的壳聚糖衍生物包括部分脱乙酰基几丁质、全部脱乙酰基几丁质(即氨基多糖)、羧甲基氨基多糖、羟乙基氨基多糖、羟丙基氨基多糖、氨基多糖季氨盐或聚乙烯醇接枝氨基多糖。4.根据权利要求1所述一种制备氟苯尼考-壳聚糖/长链羧酸纳米胶束冻干粉的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的长链羧酸为棕榈酸、油酸、共轭亚油酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋益民，齐晓丹，贾喜乐，李媛媛，周莉，罗尚，满华，潘爱红，
申请(专利权)人：青岛科技大学，
类型：发明
国别省市：山东,37