小麦过敏原结合核酸分子及其用途制造技术

提供了一种可用于检测小麦过敏原的新的核酸分子。根据本发明专利技术的小麦过敏原结合核酸的特征在于它是对小麦过敏原具有20nM以下的解离常数的核酸分子。例如，所述小麦过敏原结合核酸分子优选地含有包含由SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2任一者所表示的碱基序列的多核苷酸。

Wheat allergens combined with nucleic acid molecules and their use

A new nucleic acid molecule that can be used to detect wheat allergens is provided. The wheat allergen binding nucleic acid according to the present invention is characterized in that it is a nucleic acid molecule with a dissociation constant of less than 20nM for the wheat allergen. For example, the wheat allergens combined with nucleic acid molecules preferably contain polynucleotides containing a base sequence expressed by either SEQ ID NO:1 or SEQ ID NO:2.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】小麦过敏原结合核酸分子及其用途
本专利技术涉及一种结合到小麦过敏原的核酸分子及其用途。
技术介绍
小麦是一种人们日常频繁摄取的食物。近年来，小麦过敏症患者的增加被视为一个问题。小麦被用于大量各种不同的加工食品例如面包和面条中。就此而言，检查加工食品、其生产线等中作为原材料的小麦的存在，是非常重要的。过敏原是引起过敏症的物质，通常是蛋白质及其降解产物(肽)，分析过敏原的主流方法是使用以所述过敏原作为抗原的抗体。例如对于小麦来说，已知麸质(gluten)这种小麦蛋白质是一种过敏原。作为分析麸质的方法，已报道了使用ELISA的方法(非专利文献1和2)。然而，抗体是蛋白质，因此在稳定性方面存在问题。因此，难以在能够容易地以低成本进行的测试方法中使用抗体。引用列表非专利文献非专利文献1：HiroshiAKIYAMA等，“开发用于过敏物质(小麦)的通知ELISA方法的多个实验室评价研究(Inter-laboratoryEvaluationStudiesforDevelopmentofNotifiedELISAMethodsforAllergicSubstances(Wheat))”，食品卫生学杂志,2004,第45卷,第3期,第128-134页非专利文献2：Sorell,L.等，“一种用于麸质分析的基于抗体鸡尾酒的创新性夹心ELISA系统”(AninnovativesandwichELISAsystembasedonanantibodycocktailforglutenanalysis)，FEBS快报,1998,第439卷,第46-50页
技术实现思路
本专利技术待解决的问题考虑到上述内容，本专利技术的目的是提供一种可用于检测小麦过敏原的新的核酸分子。用于解决问题的手段本专利技术提供了一种小麦过敏原结合核酸分子，以20nM以下的解离常数结合到小麦过敏原。本专利技术还提供了一种小麦过敏原分析传感器，包含本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子。本专利技术还提供了一种小麦过敏原分析方法，包括下述步骤：通过使样品与根据本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子彼此发生接触从而使所述样品中的小麦过敏原和所述核酸分子结合，来检测所述样品中的小麦过敏原。本专利技术的效果本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子能够以上述解离常数结合到小麦过敏原。因此，根据本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子，能够在例如有无与小麦过敏原的结合的基础上，高度准确地检测样品中的小麦过敏原。因此可以说，本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子在例如食品制造、食品管理、食品流通等领域中，是用于检测小麦过敏原的非常有用的工具。附图说明[图1]图1是示出了本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子的推定二级结构的实例的示意图。[图2]图2显示的图示出了本专利技术的实施例1中适体(aptamers)对小麦过敏原的结合能力。具体实施方式在本专利技术的核酸分子中，所述小麦过敏原可以是例如麸质或其亚单位(subunit)。在本专利技术的核酸分子中，所述小麦过敏原可以是例如未变性过敏原或热变性过敏原。本专利技术的核酸分子可以包含例如选自由下述多核苷酸(a)至(d)组成的组中的至少一种多核苷酸：(a)由SEQIDNO：1和2的任一碱基序列构成的多核苷酸，(b)由通过在多核苷酸(a)的任一碱基序列中缺失、替换、插入和/或添加一个或多个碱基而获得的碱基序列构成，并且结合到所述小麦过敏原的多核苷酸，(c)由与多核苷酸(a)的任一碱基序列具有至少80％的序列一致性的碱基序列构成，并且结合到所述小麦过敏原的多核苷酸，(d)由与在严格条件下杂交到多核苷酸(a)的任一碱基序列的多核苷酸互补的碱基序列构成，并且结合到所述小麦过敏原的多核苷酸。在本专利技术的核酸分子中，所述多核苷酸可以是例如DNA。本专利技术的分析传感器还可以包含例如形成G-四分体结构的核酸分子。在本专利技术的分析传感器中，所述形成G-四分体结构的核酸分子可以是例如脱氧核酶(DNAzyme)或核酶(RNAzyme)。本专利技术的分析传感器还可以包含例如卟啉。在本专利技术的分析方法中，所述样品可以是选自例如由食品、食品原料和食品添加剂组成的组中的至少一者。(1)小麦过敏原结合核酸分子如上所述，本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子的特征在于它以20nM以下的解离常数结合到小麦过敏原。本专利技术的核酸分子结合到例如麸质(小麦的主要过敏原)、其亚单位或其结构域。所述小麦过敏原可以是例如没有通过加热变性的未变性过敏原或通过加热进行变性的变性过敏原。本专利技术的核酸分子能够结合到例如未变性和变性过敏原两者。本专利技术的核酸分子以例如20nM以下或15nM以下的解离常数结合到所述小麦过敏原。本专利技术的核酸分子对小麦过敏原的最低可检测浓度是例如250nM或125nM。本专利技术的核酸分子以例如20nM以下或15nM以下的解离常数结合到麸质。本专利技术的核酸分子对麸质的最低可检测浓度是例如250nM或125nM。本专利技术的核酸分子与所述小麦过敏原之间的结合可以通过例如表面等离子体共振分子相互作用(SPR；表面等离子体共振)分析来确定。所述分析可以使用例如ProteON(商品名，BioRad公司)来进行。本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子的具体实例如下所示。本专利技术的核酸分子是例如包含下述多核苷酸(a)的核酸分子。在本专利技术中，所述包含多核苷酸(a)的核酸分子涵盖了例如包含选自由多核苷酸(b)至(d)组成的组中的至少一种多核苷酸的核酸分子。(a)由SEQIDNO：1和2的任一碱基序列构成的多核苷酸，(b)由通过在多核苷酸(a)的任一碱基序列中缺失、替换、插入和/或添加一个或多个碱基而获得的碱基序列构成，并且结合到所述小麦过敏原的多核苷酸，(c)由与多核苷酸(a)的任一碱基序列具有至少80％的序列一致性的碱基序列构成，并且结合到所述小麦过敏原的多核苷酸，(d)由与在严格条件下杂交到多核苷酸(a)的任一碱基序列的多核苷酸互补的碱基序列构成，并且结合到所述小麦过敏原的多核苷酸。在本专利技术的核酸分子中，所述多核苷酸的构成单元是例如核苷酸残基，其实例包括脱氧核糖核苷酸残基和核糖核苷酸残基。所述多核苷酸是例如由脱氧核糖核苷酸残基构成的DNA或包含脱氧核糖核苷酸残基和核糖核苷酸残基的DNA，并且所述多核苷酸还可以包含非核苷酸残基，正如下文所述。本专利技术的小麦过敏原结合核酸分子在例如后文中也被称为“DNA适体”。根据本专利技术的核酸分子可以例如由多核苷酸(a)至(d)中任一者构成，或者可以包含多核苷酸(a)至(d)中任一者。在后一种情况下，本专利技术的核酸分子可以包含例如选自多核苷酸(a)至(d)的两个以上多核苷酸，正如下文所述。所述两个以上多核苷酸可以是具有相同序列或不同序列的多核苷酸。另外，在后一种情况下，本专利技术的核酸分子还可以包含例如连接物和/或附加序列。多核苷酸(a)是由SEQIDNO：1和2的任一碱基序列构成的多核苷酸。[表1]SEQIDNO：2是SEQIDNO：1的截短的序列。在上面的表1中，SEQIDNO：1中的下划线区域对应于SEQIDNO：2的碱基序列。图1示出了分别由SEQIDNO：1和2的碱基序列构成的多核苷酸的推定的二级结构。然而应该指出，本专利技术不限于此。对于多核苷酸(b)来说，术语“一个或多个”不受限制，只要例如它在多核苷酸(b)结合到所述小麦过敏原的范围之内即可。在多核苷酸(a)的任一碱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种小麦过敏原结合核酸分子，以20nM以下的解离常数结合到小麦过敏原。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种小麦过敏原结合核酸分子，以20nM以下的解离常数结合到小麦过敏原。2.根据权利要求1所述的小麦过敏原结合核酸分子，其中所述小麦过敏原是麸质或其亚单位。3.根据权利要求1或2所述的小麦过敏原结合核酸分子，其中所述小麦过敏原是未变性过敏原或热变性过敏原。4.根据权利要求1至3中任一项所述的小麦过敏原结合核酸分子，包含下述多核苷酸(a)：(a)由SEQIDNO：1和2的任一碱基序列构成的多核苷酸。5.根据权利要求4所述的小麦过敏原结合核酸分子，其中所述多核苷酸是DNA。6.一种小麦过敏原分析传感器，包含：根据权利要求1至5中任一项所述的小麦过敏原结合核酸分子。...

【专利技术属性】
技术研发人员：白鸟朋子，金子直人，白鸟行大，堀井克纪，皆川宏贵，秋富穣，吉田嘉仁，和贺岩，
申请(专利权)人：日本电气方案创新株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP