针对BCMA的单克隆抗体制造技术

本发明专利技术涉及针对BCMA的新型抗体及其制造和用途。

Monoclonal antibodies against BCMA

The invention relates to a novel antibody for BCMA and its manufacture and application.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对BCMA的单克隆抗体本专利技术涉及针对BCMA的新型抗体及其制造和用途。专利技术背景人B细胞成熟抗原，也称为BCMA；TR17_HUMAN、TNFRSF17(UniProtQ02223)是在分化的浆细胞中优先表达的肿瘤坏死受体超家族的成员(Laabi等人，1992年；Madry等人，1998年)。BCMA是非糖基化的III型跨膜蛋白，它参与B细胞成熟、生长和存活。BCMA是TNF超家族的两个配体的受体：APRIL(增殖诱导配体)，其为BCMA的高亲和力配体，以及B细胞活化因子BAFF，其为BCMA的低亲和力配体(THANK、BlyS、B淋巴细胞刺激因子、TALL-1和zTNF4)。APRIL和BAFF显示出结构相似性和重叠但不同的受体结合特异性。负调节因子TACI也结合至BAFF和APRIL两者。APRIL和BAFF与BCMA和/或TACI的协同结合活化转录因子NF-κB，且增加促存活Bcl-2家族成员(如Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1、A1)的表达和促凋亡因子(如Bid、Bad、Bik、Bim等)的下调，从而抑制凋亡和促进存活。该组合作用促进B细胞分化、增殖、存活和抗体产生(如RickertRC等人，ImmunolRev(2011)244(1):115-133所综述)。针对BCMA的抗体例如在GrasM-P等人，IntImmunol.7(1995)1093-1106、WO200124811、WO200124812、WO2010104949和WO2012163805中有所描述。针对BCMA的抗体及其用于治疗淋巴瘤和多发性骨髓瘤的用途例如在WO2002066516和WO2010104949中有所提及。WO2013154760和WO2015052538涉及包含BCMA识别部分和T细胞活化部分的嵌合抗原受体(CAR)。Ryan,MC等人，Mol.CancerTher.6(2007)3009-3018涉及具有配体阻断活性的抗BCMA抗体，其可以促进多发性骨髓瘤(MM)细胞系作为裸抗体或作为抗体-药物缀合物的细胞毒性。Ryan示出，SG1(抑制性BCMA抗体)在体外以剂量依赖性方式阻断核因子-κB的APRIL依赖性活化。Ryan还提及了并不显著抑制APRIL与BCMA结合的抗体SG2。最近开发了许多重组双特异性抗体形式，例如，通过例如IgG抗体形式和单链结构域的融合(参见例如KontermannRE,mAbs4:2,(2012)1-16)。在WO2009080251和WO2009080252中描述了其中可变结构域VL和VH或恒定结构域CL和CH1彼此替代的双特异性抗体。避免错配副产物问题的方法被称为“钮入孔”，其目的在于通过将突变引入CH3结构域来修饰接触界面，从而迫使两条不同的抗体重链配对。在一条链上，大体积氨基酸被具有短侧链的氨基酸替代以形成“孔”。相反，将具有大侧链的氨基酸引入另一个CH3结构域中形成“钮”。通过共表达这两条重链(和两条相同的轻链，其必须适合于两条重链)，观察到异二聚体形成(“钮-孔”)相对于同二聚体形成(“孔-孔”或“钮-钮”)的高产率(RidgwayJB,PrestaLG,CarterP.ProteinEng.9,617–621(1996)；以及WO1996027011)。通过使用噬菌体展示方法来重建两个CH3结构域的相互作用表面并引入二硫桥以稳定异二聚体，可以进一步提高异二聚体的百分比(MerchantA.M.等人，NatureBiotech16(1998)677-681；AτwellS,RidgwayJB,WellsJA,CarterP.,JMol.Biol270(1997)26-35)。用于钮入孔技术的新方法在例如EP1870459A1中有所描述。虽然该形式看起来非常有吸引力，但目前没有描述临床进展的数据可用。该策略的一个重要限制是两个亲本抗体的轻链必须相同以防止错配和形成无活性的分子。由于这些抗体的重链和/或相同的轻链必须优化，因此该技术不适于从针对第一和第二靶标的两个抗体开始，轻松地开发针对两个靶标的重组双特异性抗体。Xie,Z.等人，JImmunol.Methods286(2005)95-101涉及双特异性抗体形式，其使用scFv与用于FC部分的钮入孔技术的组合。T淋巴细胞的TCR/CD3复合物由与CD3标记的伽马(γ)、德耳塔(δ)、艾普西隆(ε)、泽塔(ζ)和埃塔(η)不变亚基一起在细胞表面共表达的TCR阿尔法(α)/贝塔(β)或TCR伽马(γ)/德耳塔(δ)异二聚体组成。根据UniProtP07766(CD3E_HUMAN)描述了人CD3ε。现有技术中描述的抗CD3ε抗体是SP34(YangSJ,TheJournalofImmunology(1986)137；1097-1100)。SP34与灵长类和人类CD3反应。SP34可获得自Pharmingen。现有技术中描述的另一种抗CD3抗体是UCHT-1(参见WO2000041474)。现有技术中描述的另一种抗CD3抗体是BC-3(FredHutchinsonCancerResearchInstitute；用于GvHD的I/II期试验，Anasetti等人，Transplantation54:844(1992))。SP34与UCHT-1和BC-3的不同之处在于SP-34识别仅存在于CD3的ε链上的表位(参见Salmeron等人，(1991)J.Immunol.147:3047)，而UCHT-1和BC-3识别由ε和γ链提供的表位。另外的抗CD3抗体在WO2008119565、WO2008119566、WO2008119567、WO2010037836、WO2010037837、WO2010037838和US8236308(WO2007042261)中有所描述。另一种抗CD3抗体的CDR、VH和VL序列显示于SEQIDNO:7和8中。针对CD3和BCMA的双特异性抗体在WO2007117600、WO2009132058、WO2012066058和WO2012143498中有所提及。针对BCMA的抗体的CAR化合物在WO2013154760、WO2013154760和WO2014140248中有所提及。细胞介导的单克隆抗体的效应子功能(如抗体依赖性细胞毒性(ADCC))可以通过工程化Asn297处的寡糖组成来增强，如P.等人，NatureBiotechnol.17(1999)176-180和US6602684所述。WO1999054342、WO2004065540、WO2007031875和WO2007039818、HristodorovD,FischerR,LindenL.,MolBiotechnol.2012年10月25日(Epub)还涉及增强Fc介导的细胞细胞毒性的抗体的糖基化工程化。铰链区和CH2结构域中的几个氨基酸残基也影响细胞介导的单克隆抗体的效应子功能(Eur.J.Immunol.,23,1098(1993),Immunology,86,319(1995),ChemicalImmunology,65,88(1997)]ChemicalImmunology,65,88(1997)]。因此本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特异性结合至人B细胞成熟抗原(BCMA)的单克隆抗体，其特征在于包含SEQ ID NO:17的CDR3H区和SEQ ID NO:20的CDR3L区以及选自由以下组成的组的CDR1H、CDR2H、CDR1L和CDR2L区组合：a)SEQ ID NO:21的CDR1H区和SEQ ID NO:22的CDR2H区、SEQ ID NO:23的CDR1L区和SEQ ID NO:24的CDR2L区，b)SEQ ID NO:21的CDR1H区和SEQ ID NO:22的CDR2H区、SEQ ID NO:25的CDR1L区和SEQ ID NO:26的CDR2L区，c)SEQ ID NO:21的CDR1H区和SEQ ID NO:22的CDR2H区、SEQ ID NO:27的CDR1L区和SEQ ID NO:28的CDR2L区，d)SEQ ID NO:29的CDR1H区和SEQ ID NO:30的CDR2H区、SEQ ID NO:31的CDR1L区和SEQ ID NO:32的CDR2L区，e)SEQ ID NO:34的CDR1H区和SEQ ID NO:35的CDR2H区、SEQ ID NO:31的CDR1L区和SEQ ID NO:32的CDR2L区，以及f)SEQ ID NO:36的CDR1H区和SEQ ID NO:37的CDR2H区、SEQ ID NO:31的CDR1L区和SEQ ID NO:32的CDR2L区。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.03 EP 15179549.91.一种特异性结合至人B细胞成熟抗原(BCMA)的单克隆抗体，其特征在于包含SEQIDNO:17的CDR3H区和SEQIDNO:20的CDR3L区以及选自由以下组成的组的CDR1H、CDR2H、CDR1L和CDR2L区组合：a)SEQIDNO:21的CDR1H区和SEQIDNO:22的CDR2H区、SEQIDNO:23的CDR1L区和SEQIDNO:24的CDR2L区，b)SEQIDNO:21的CDR1H区和SEQIDNO:22的CDR2H区、SEQIDNO:25的CDR1L区和SEQIDNO:26的CDR2L区，c)SEQIDNO:21的CDR1H区和SEQIDNO:22的CDR2H区、SEQIDNO:27的CDR1L区和SEQIDNO:28的CDR2L区，d)SEQIDNO:29的CDR1H区和SEQIDNO:30的CDR2H区、SEQIDNO:31的CDR1L区和SEQIDNO:32的CDR2L区，e)SEQIDNO:34的CDR1H区和SEQIDNO:35的CDR2H区、SEQIDNO:31的CDR1L区和SEQIDNO:32的CDR2L区，以及f)SEQIDNO:36的CDR1H区和SEQIDNO:37的CDR2H区、SEQIDNO:31的CDR1L区和SEQIDNO:32的CDR2L区。2.一种特异性结合至BCMA的单克隆抗体，其特征在于包含VH区，所述VH区包括SEQIDNO:21的CDR1H区、SEQIDNO:22的CDR2H区和SEQIDNO:17的CDR3H区，以及VL区，所述VL区包括SEQIDNO:20的CDR3L区和选自以下组的CDR1L和CDR2L区组合：a)SEQIDNO:23的CDR1L区和SEQIDNO:24的CDR2L区，b)SEQIDNO:25的CDR1L区和SEQIDNO:26的CDR2L区，或c)SEQIDNO:27的CDR1L区和SEQIDNO:28的CDR2L区。3.根据权利要求1或2所述的抗体，其特征在于包含作为VH区的SEQIDNO:10的VH区和作为VL区的选自由SEQIDNO:12、13和14的VL区组成的组的VL区。4.一种特异性结合至BCMA和人CD3ε(进一步也称为“CD3”)的双特异性抗体，其特征在于包含SEQIDNO:17的CDR3H区和SEQIDNO:20的CDR3L区以及选自以下组的CDR1H、CDR2H、CDR1L和CDR2L区组合：a)SEQIDNO:21的CDR1H区和SEQIDNO:22的CDR2H区、SEQIDNO:23的CDR1L区和SEQIDNO:24的CDR2L区，b)SEQIDNO:21的CDR1H区和SEQIDNO:22的CDR2H区、SEQIDNO:25的CDR1L区和SEQIDNO:26的CDR2L区，c)SEQIDNO:21的CDR1H区和SEQIDNO:22的CDR2H区、SEQIDNO:27的CDR1L区和SEQIDNO:28的CDR2L区，d)SEQIDNO:29的CDR1H区和SEQIDNO:30的CDR2H区、SEQIDNO:31的CDR1L区和SEQIDNO:32的CDR2L区，e)SEQIDNO:34的CDR1H区和SEQIDNO:35的CDR2H区、SEQIDNO:31的CDR1L区和SEQIDNO:32的CDR2L区，以及f)SEQIDNO:36的CDR1H区和SEQIDNO:37的CDR2H区、SEQIDNO:31的CDR1L区和SEQIDNO:32的CDR2L区。5.一种特异性结合至两个靶标的双特异性抗体，所述两个靶标是人BCMA(进一步也称为“BCMA”)和人CD3ε(进一步也称为“CD3”)的胞外结构域，所述双特异性抗体的特征在于包含VH区，所述VH区包括SEQIDNO:21的CDR1H区、SEQIDNO:22的CDR2H区和SEQIDNO:17的CDR3H区，以及VL区，所述VL区包括SEQIDNO:20的CDR3L区和选自以下组的CDR1L和CDR2L区的组合：a)SEQIDNO:23的CDR1L区和SEQIDNO:24的CDR2L区，b)SEQIDNO:25的CDR1L区和SEQIDNO:26的CDR2L区，或c)SEQIDNO:27的CDR1L区和SEQIDNO:28的CDR2L区。6.根据权利要求5所述的双特异性抗体，其特征在于包含作为BCMAVH区的SEQIDNO:10的VH区和作为VL区的SEQIDNO:12的VL区或作为BCMAVH的SEQIDNO:10的VH区和作为VL区的SEQIDNO:13的VL区或作为BCMAVH的SEQIDNO:10的VH区和作为VL区的SEQIDNO:14的VL区。7.根据权利要求4至6中任一项所述的双特异性抗体，其特征在于包含特异性结合至CD3的抗体的轻链和重链，其中所述可变结构域VL和VH或所述恒定结构域CL和CH1彼此替代。8.根据权利要求4至7中任一项所述的双特异性抗体，其特征在于所述抗CD3抗体部分的可变结构域VH(进一步称为“CD3VH”)包含SEQIDNO:1、2和3的重链CDR，分别为重链CDR1、CDR2和CDR3，并且所述抗CD3抗体部分的可变结构域VL(进一步称为“CD3VL”)包含SEQIDNO:4、5和6的轻链CDR，分别为轻链CDR1、CDR...

【专利技术属性】
技术研发人员：MD武，K施特赖因，O阿斯特，M巴卡克，C德龙，LJ迪尔纳，A弗莱默泽格伦肖贝尔，C克莱因，E默斯纳，S莫泽，P尤马纳，T魏因齐尔，
申请(专利权)人：英格玛布有限责任公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH