一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法技术

本发明专利技术公开了一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法。所述方法包括如下步骤：(1)在铂纳米颗粒表面修饰抗体；(2)在硝酸纤维素膜上划上待测抗原的包被抗体作为检测线，划上二抗作为质控线，并干燥处理；(3)铂标抗体喷涂到聚酯纤维膜上，真空干燥；(4)将吸水纸、硝酸纤维素膜、聚酯纤维膜和玻璃纤维膜顺序贴在PVC胶板上组装成试纸条；(5)将试纸条插入待测液中或者将待测液滴加到结合垫上，进行移液反应，剪下相应的含有检测线的试纸条片段，与H2O2反应产气并测量气压，所得气压差值与抗原浓度呈正相关关系。该方法具有灵敏、便携、廉价和易于操作等优点。

A method for quantitative detection of raw materials by immunoassay strip

The invention discloses a method for quantitatively detecting the original by using an immunoassay strip. The method includes the following steps: (1) modify the antibody on the surface of the platinum nanoparticles; (2) the envelope of the antigen to be measured on the nitrocellulose membrane as the detection line, the two resistance as the quality control line, and the drying process; (3) the platinum antibody is sprayed onto the polyester fiber membrane, the vacuum drying; (4) the absorbent paper and the nitrocellulose membrane The polyester fiber membrane and the glass fiber membrane are sequentially assembled on the PVC board and assembled into test paper strips; (5) the test paper strips are inserted into the liquid to be measured or the solution is added to the binding pad, and the fluid reaction is carried out, the corresponding test paper fragments containing the detection line are cut, the gas pressure is measured and the air pressure is measured and the pressure difference and the antigen concentration are obtained. There is a positive correlation. The method is sensitive, portable, cheap and easy to operate.

【技术实现步骤摘要】
一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法
本专利技术涉及一种基于铂纳米颗粒催化产气的免疫试纸条的制备，属于创新型免疫试纸条，可用于环境监测和疾病诊断等领域。
技术介绍
免疫试纸条是上世纪九十年代初建立起来的基于抗原抗体免疫反应的检测技术，多借助金纳米颗粒的颜色进行便携可视化的检测。免疫试纸条一般是由样品垫、金标垫、硝酸纤维素(Nitrocellulose,NC)膜和吸水纸这四种材料构成，其检测抗原主要是通过双抗体夹心的方式进行，即首先在NC膜上以划线的形式划上检测抗原的抗体和二抗，分别作为检测线和质控线，然后将抗原的另一抗体修饰在金颗粒表面并喷在玻璃纤维或聚酯纤维上以制成金标垫，接着组装试纸条进行检测，最后通过检测线和对照线显示的条带进行分析样品的浓度。目前，以金颗粒颜色为信号输出的免疫金试纸条的市场化已相当成熟，被广泛地应用于蛋白质、小分子、细胞、细菌等靶标的检测，在环境监测、食品安全和疾病诊断等领域占有重要地位。(Q.Zeng,X.Mao,H.Xu,S.Wang,G.Liu,Quantitativeimmunochromatographicstripbiosensorforth本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法，包括如下步骤：(1)在铂纳米颗粒上修饰检测抗体，即为铂标抗体；(2)在硝酸纤维素膜上划上抗原的包被抗体作为检测线，划上第二抗体作为质控线，并干燥处理；(3)铂标抗体喷涂在聚酯纤维素膜上作为铂标垫，并干燥处理；(4)按照吸水纸、硝酸纤维素膜、聚酯纤维膜和玻璃纤维膜的顺序贴在PVC胶板上组装成试纸条；其中玻璃纤维膜作为结合垫，聚酯纤维膜作为铂标垫，硝酸纤维素膜作为抗原抗体反应区，吸水纸作为侧向横流的驱动力；(5)将试纸条插入待测溶液中或者将待测液滴加到结合垫上反应，剪下含有检测线的试纸条片段，与H2O2反应产气并测量气压，所得气压值与抗原浓度呈正相关...

【技术特征摘要】
1.一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法，包括如下步骤：(1)在铂纳米颗粒上修饰检测抗体，即为铂标抗体；(2)在硝酸纤维素膜上划上抗原的包被抗体作为检测线，划上第二抗体作为质控线，并干燥处理；(3)铂标抗体喷涂在聚酯纤维素膜上作为铂标垫，并干燥处理；(4)按照吸水纸、硝酸纤维素膜、聚酯纤维膜和玻璃纤维膜的顺序贴在PVC胶板上组装成试纸条；其中玻璃纤维膜作为结合垫，聚酯纤维膜作为铂标垫，硝酸纤维素膜作为抗原抗体反应区，吸水纸作为侧向横流的驱动力；(5)将试纸条插入待测溶液中或者将待测液滴加到结合垫上反应，剪下含有检测线的试纸条片段，与H2O2反应产气并测量气压，所得气压值与抗原浓度呈正相关关系。2.如权利要求1所述一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法，其特征在于步骤(1)中铂纳米颗粒粒径范围为10～150nm；检测抗体浓度范围为1～8μg/mL。3.如权利要求1所述一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法，其特征在于步骤(1)中检测抗体修饰铂纳米颗粒的时间为6～12h。4.如权利要求1所述一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法，其特征在于步骤(2)中的包被抗体浓度范围为0.5～5mg/mL，二抗浓度范围为0.5～5mg/mL；硝酸纤维...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨朝勇，林冰倩，刘如迪，朱志，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建,35