提取莼菜活性物质的方法技术

本发明专利技术公开了提取莼菜活性物质的方法，包括：脱脂、提取、脱蛋白、纯化，首先将莼菜干粉以分析纯丙酮脱脂，脱脂残渣先后以乙醇溶液提取、蒸馏水提取并浓缩的浓缩液，将氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯的混合物倒入浓缩液中脱蛋白得莼菜多糖粗液，在粗液中加入乙醇溶液分离出固形物，然后以98‑99%的乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤固形物即得莼菜活性物质。有益效果为：本方法提取莼菜活性物质简单易行，莼菜活性物质中多糖的含量可达97%以上，大大提高了莼菜多糖的利用价值，莼菜活性物质同时具有调节免疫功能、抗肿癌、抗感染、降血糖血脂、延年益寿的功效。

Method of extracting active substance from water shield

The invention discloses a method for extracting active material of water shield, including: degreasing, extraction, deproteinized and purifying. First, the dry powder of water shield is degreased with pure acetone, and the defat residue is extracted and concentrated in distilled water by ethanol solution and distilled water successively. The mixture of chloroform, n-butanol, acetic acid and tartaric acid two methyl ester is reversed. In the concentrated solution, the crude liquid of water shield was deproteinized, and the solid was separated by adding ethanol solution in the crude liquid, and then the active substance of water shield was obtained with 98 ethanol, anhydrous ethanol and acetone. The beneficial effect is: this method is simple and easy to extract the active substance of water shield, and the content of polysaccharide in the active substance of water shield is more than 97%, which greatly improves the use value of the polysaccharide of water shield. The active substance of water shield has the effect of regulating immune function, anti swelling cancer, anti infection, lowering blood sugar, blood, blood, blood, blood, blood, and prolonging life.

【技术实现步骤摘要】
提取莼菜活性物质的方法
本专利技术涉及莼菜的深加工领域，尤其是涉及提取莼菜活性物质的方法。技术背景莼菜（学名：BraseniaschreberiJ.F.Gmel.）：又名蒪菜、马蹄菜、湖菜等，是多年生水生宿根草本。性喜温暖，适宜于清水池生长。由地下葡萄茎萌发须根和叶片，并发出4-6个分枝，形成丛生状水中茎，再生分枝。深绿色椭圆形叶子互生，长约6至10厘米，每节1-2片，浮生在水面或潜在水中，嫩茎和叶背有胶状透明物质。夏季抽生花茎，开暗红色小花。莼菜嫩叶可供食用，莼菜本身没有味道，胜在口感的圆融、鲜美滑嫩，为珍贵蔬菜之一。莼菜含有丰富的胶质蛋白、碳水化合物，脂肪、多种维生素和矿物质，常食莼菜具有药食两用的保健作用。主产于中国浙江、江苏两省太湖流域和湖北省，4月下旬至10月下旬采摘带有卷叶的嫩梢。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供提取莼菜活性物质的方法，莼菜活性物质的提取方法简单易行，活性物质中莼菜多糖的含量可达97%以上，大大提高了莼菜多糖的利用价值，提取方法可以降低莼菜多糖以蛋白质渠道被分离出去的概率，提高莼菜多糖的得率与含量。本专利技术针对
技术介绍
中提到的问题，采取的技术方案为：提取莼菜活性物质的方法，包括：脱脂、提取、脱蛋白、纯化，具体包括以下步骤：脱脂：在莼菜干粉中加入10-12倍分析纯丙酮，搅拌脱脂2-3小时，以3000-3500r/min离心10-12分钟，弃去上清液，沉淀中再加入莼菜干粉5-6倍的分析纯丙酮，重复以上操作，最后所得残渣在常温下挥干并回收丙酮；以分析纯级丙酮脱脂简单易控，不会破坏莼菜多糖的结构与性质，同时丙酮可以回收再利用，降低了成本；提取：按质量体积比为1g︰5-8mL将体积分数85-95%的乙醇溶液加入到莼菜残渣中，于65-70℃水浴中提取15-30分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，收集滤渣；在滤渣中加入12-15倍重量份的蒸馏水，于55-60℃水浴中提取45-60分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，合并滤液并低温浓缩得浓缩液；醇提与水提结合可以大大提高莼菜多糖的得率，不会破坏多糖的结构，同时提取溶剂容易除去，不会增加除杂工序；脱蛋白：将氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯按照体积比75-80:15-18:1:0.1-0.12的比例混合均匀得混合溶液，酒石酸二甲酯中L-酒石酸二甲酯与D-酒石酸二甲酯的比例为16.5-17.0:1；在不断搅拌下，按照体积比3-4:1的比例将混合溶液缓慢倒入浓缩液中，密封后用磁力搅拌器缓慢搅拌20-30分钟，倒入分液漏斗中，静止分层后收集上层溶液，并离心分离出变性蛋白，按上述步骤重复操作2-3次，使提取液中的蛋白质脱除完全即得莼菜多糖粗液；氯仿、正丁醇的混合溶液可以将游离蛋白转变为不溶性物质，经离心去除，可以达到去除莼菜多糖中蛋白质的目的；特定比例的L-酒石酸二甲酯与D-酒石酸二甲酯在乙酸的存在下可以对蛋白质变性胶状物起作用，可以起到隔离多糖与蛋白质变性胶状物的作用，因此可以大大降低蛋白质变性胶状物包裹的莼菜多糖的量，大大降低莼菜多糖以蛋白质渠道被分离出去的概率，提高莼菜多糖的得率与含量，降低提取成本；纯化：向莼菜多糖粗液加入8-12倍体积分数为95-98%的乙醇溶液，静置过夜后离心，分离出固形物，分别以98-99%的乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤固形物，冷冻干燥，即得莼菜活性物质；莼菜活性物质中多糖的含量可达97%以上，大大提高了莼菜多糖的利用价值，莼菜活性物质具有较好的清热解毒作用，能抑制细菌的生长，食之清胃火、泻肠热，捣烂外敷可治痈疽疔疮；莼菜活性物质同时具有调节免疫功能、抗肿癌、抗感染、降血糖血脂、延年益寿的功效。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：1）特定比例的L-酒石酸二甲酯与D-酒石酸二甲酯在乙酸的存在下可以对蛋白质变性胶状物起作用，可以起到隔离多糖与蛋白质变性胶状物的作用，因此可以大大降低蛋白质变性胶状物包裹的莼菜多糖的量，大大降低莼菜多糖以蛋白质渠道被分离出去的概率，提高莼菜多糖的得率与含量，降低提取成本；2）莼菜活性物质中多糖的含量可达97%以上，大大提高了莼菜多糖的利用价值，莼菜活性物质具有较好的清热解毒作用，能抑制细菌的生长，食之清胃火、泻肠热，捣烂外敷可治痈疽疔疮；莼菜活性物质同时具有调节免疫功能、抗肿癌、抗感染、降血糖血脂、延年益寿的功效。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术方案作进一步说明：实施例1：提取莼菜活性物质的方法，包括：脱脂、提取、脱蛋白、纯化，具体包括以下步骤：1）脱脂：在莼菜干粉中加入10倍分析纯丙酮，搅拌脱脂2小时，以3000r/min离心10分钟，弃去上清液，沉淀中再加入莼菜干粉5倍的分析纯丙酮，重复以上操作，最后所得残渣在常温下挥干并回收丙酮；以分析纯级丙酮脱脂简单易控，不会破坏莼菜多糖的结构与性质，同时丙酮可以回收再利用，降低了成本；2）提取：按质量体积比为1g︰5mL将体积分数85%的乙醇溶液加入到莼菜残渣中，于65℃水浴中提取15分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2次，收集滤渣；在滤渣中加入12倍重量份的蒸馏水，于55℃水浴中提取45分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2次，合并滤液并低温浓缩得浓缩液；醇提与水提结合可以大大提高莼菜多糖的得率，不会破坏多糖的结构，同时提取溶剂容易除去，不会增加除杂工序；3）脱蛋白：将氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯按照体积比75:15:1:0.1的比例混合均匀得混合溶液，酒石酸二甲酯中L-酒石酸二甲酯与D-酒石酸二甲酯的比例为16.5:1；在不断搅拌下，按照体积比3:1的比例将混合溶液缓慢倒入浓缩液中，密封后用磁力搅拌器缓慢搅拌20分钟，倒入分液漏斗中，静止分层后收集上层溶液，并离心分离出变性蛋白，按上述步骤重复操作2次，使提取液中的蛋白质脱除完全即得莼菜多糖粗液；氯仿、正丁醇的混合溶液可以将游离蛋白转变为不溶性物质，经离心去除，可以达到去除莼菜多糖中蛋白质的目的；特定比例的L-酒石酸二甲酯与D-酒石酸二甲酯在乙酸的存在下可以对蛋白质变性胶状物起作用，可以起到隔离多糖与蛋白质变性胶状物的作用，因此可以大大降低蛋白质变性胶状物包裹的莼菜多糖的量，大大降低莼菜多糖以蛋白质渠道被分离出去的概率，提高莼菜多糖的得率与含量，降低提取成本；4）纯化：向莼菜多糖粗液加入8倍体积分数为95%的乙醇溶液，静置过夜后离心，分离出固形物，分别以98%的乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤固形物，冷冻干燥，即得莼菜活性物质；莼菜活性物质中多糖的含量可达97%以上，大大提高了莼菜多糖的利用价值，莼菜活性物质具有较好的清热解毒作用，能抑制细菌的生长，食之清胃火、泻肠热，捣烂外敷可治痈疽疔疮；莼菜活性物质同时具有调节免疫功能、抗肿癌、抗感染、降血糖血脂、延年益寿的功效。实施例2：提取莼菜活性物质的方法，包括以下步骤：1）在莼菜干粉中加入12倍分析纯丙酮，搅拌脱脂3小时，以3500r/min离心12分钟，弃去上清液，沉淀中再加入莼菜干粉6倍的分析纯丙酮，重复以上操作，最后所得残渣在常温下挥干并回收丙酮；2）按质量体积比为1g︰8mL将体积分数95%的乙醇溶液加入到莼菜残渣中，于70℃水浴中提取30分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取3次，收集滤渣；在滤渣中加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.提取莼菜活性物质的方法，其特征在于：所述提取莼菜活性物质的方法包括：脱脂：在莼菜干粉中加入10‑12倍分析纯丙酮，搅拌脱脂2‑3小时，离心后弃去上清液，沉淀中再加入莼菜干粉5‑6倍的分析纯丙酮，重复以上操作，最后所得残渣在常温下挥干并回收丙酮；提取：莼菜残渣中加入乙醇溶液并提取，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2‑3次，收集滤渣；在滤渣中加入蒸馏水提取，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2‑3次，合并滤液并低温浓缩得浓缩液；脱蛋白：将氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯混合均匀得混合溶液，在不断搅拌下，按照体积比3‑4:1的比例将混合溶液缓慢倒入浓缩液中，密封并搅拌后倒入分液漏斗中，静止分层后收集上层溶液，并离心分离出变性蛋白，按上述步骤重复操作2‑3次，使提取液中的蛋白质脱除完全即得莼菜多糖粗液；纯化：向莼菜多糖粗液加入8‑12倍体积分数为95‑98%的乙醇溶液，静置过夜后离心，分离出固形物，洗涤固形物并冷冻干燥，即得莼菜活性物质。

【技术特征摘要】
1.提取莼菜活性物质的方法，其特征在于：所述提取莼菜活性物质的方法包括：脱脂：在莼菜干粉中加入10-12倍分析纯丙酮，搅拌脱脂2-3小时，离心后弃去上清液，沉淀中再加入莼菜干粉5-6倍的分析纯丙酮，重复以上操作，最后所得残渣在常温下挥干并回收丙酮；提取：莼菜残渣中加入乙醇溶液并提取，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，收集滤渣；在滤渣中加入蒸馏水提取，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，合并滤液并低温浓缩得浓缩液；脱蛋白：将氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯混合均匀得混合溶液，在不断搅拌下，按照体积比3-4:1的比例将混合溶液缓慢倒入浓缩液中，密封并搅拌后倒入分液漏斗中，静止分层后收集上层溶液，并离心分离出变性蛋白，按上述步骤重复操作2-3次，使提取液中的蛋白质脱除完全即得莼菜多糖粗液；纯化：向莼菜多糖粗液加入8-12倍体积分数为95-98%的乙醇溶液，静置过夜后离心，分离出固形物，洗涤固形物并冷冻干燥，即得莼菜活性物质。2.根据权利要求1所述的提取莼菜活性物质的方法，其特征在于：所述脱脂步骤中，离心转速为3000-3500r/m...

【专利技术属性】
技术研发人员：董珊珊，
申请(专利权)人：海盐县凌特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33