一种具有降血脂功能的木耳多糖及其制备方法和用途技术

本发明专利技术属于真菌利用领域，具体涉及利用辐照技术处理得到的一种具有降血脂功能的木耳多糖及其制备方法和用途。本发明专利技术所解决的技术问题是提供一种具有降血脂功能的木耳多糖，尤其是降低血清胆固醇和低密度脂蛋白的作用。本发明专利技术利用辐照制备木耳多糖的制备方法为：(1)粉碎得木耳粉体；(2)木耳粉体与水混合，搅拌；(3)采用热压法，在密闭容器中浸提得木耳提取液；(4)离心木耳提取液，取上清液采用Sevage法除蛋白后，得木耳多糖溶液；(5)木耳多糖溶液加乙醇沉淀等步骤制备多糖粉末；(6)将多糖粉末加水，用Co60‑γ射线辐照处理，干燥即得木耳多糖。具有黏度降低，溶解性增加的特点，而且意外的发现具有降血脂的功能。

Auricularia auricular polysaccharide with lipid-lowering function and preparation method and application thereof

The invention belongs to the field of fungus utilization, in particular to a kind of Auricularia polysaccharide, which has the function of reducing blood fat, and its preparation method and use. The technical problem solved by the invention is to provide a kind of Auricularia polysaccharide, which has the function of lowering blood lipid, especially lowering the serum cholesterol and low density lipoprotein. The preparation method of the invention of Auricularia polysaccharide by irradiation is: (1) pulverization of Auricularia auricula powder; (2) mixing Auricularia auricula with water and stirring; (3) using hot pressing method to extract the extract of Auricularia auricula in closed container; (4) centrifuge extract of Auricularia auricula and extract the polysaccharide solution of the supernatant by Sevage method; (5) multiple Auricularia auricula The polysaccharide powder was prepared by sugar solution and ethanol precipitation. (6) the polysaccharide powder was added to water and irradiated by Co60 - ray, then dried Auricularia auricula polysaccharide. It has the characteristics of reduced viscosity and increased solubility, and unexpected findings have the function of lowering blood lipids.

【技术实现步骤摘要】
一种具有降血脂功能的木耳多糖及其制备方法和用途
本专利技术属于真菌利用领域，具体涉及一种利用辐照技术处理得到的具有降血脂功能的木耳多糖及其制备方法和用途。
技术介绍
辐照技术是利用x,α，β，γ等射线照射物质，产生物理化学反应，在工业、农业、医疗等方面有广泛应用，如食品保鲜贮存、农作物育种和花卉变异、医疗用品灭菌消毒、高分子材料改性、废物处理等。多糖是所有生命有机体的重要组成部分，因其特殊的物理化学特性，在食品、医药、清洁用品、造纸、印刷等领域有广泛应用。多糖一般分子量较大，而多年的研究表明多糖分子量大小对其功能特性和生物活性有重要影响。分子量和分子体积较大，往往造成黏度高、溶解度低，不利于多糖跨越多重细胞运输进入生物体发挥生物活性作用。利用Co60-γ射线辐照技术处理多糖，通过产生有效的物理化学效应，可使多糖的糖链断裂，从而得到低分子量的产物。李世超等采用60Coγ-射线对无花果多糖进行降解处理时，辐照后无花果多糖的羰基吸收峰增强，且在清除超氧阴离子、清除羟基自由基和还原能力方面比处理前有显著提高。但是尚未见利用辐照技术处理的木耳多糖具有降血脂的作用。
技术实现思路
本专利技术所解决的技术问题是提供一种具有降血脂作用的木耳多糖，尤其是降低血清胆固醇和低密度脂蛋白的作用。本专利技术具有降血脂作用的木耳多糖是采用如下方法制备，步骤如下：(1)粉碎干燥木耳至粒径＜100目，得木耳粉体；(2)取步骤(1)所得木耳粉体与水按质量比1∶20-60混合，搅拌均匀；(3)采用热压法，在密闭容器中于至少120℃、至少0.12MPa的条件下浸提至少40分钟，得木耳提取液；(4)离心木耳提取液，取上清液采用Sevage法除蛋白后，得木耳多糖溶液；(5)木耳多糖溶液加乙醇沉淀多糖，静置，离心，取沉淀、干燥，得多糖粉末；(6)将多糖粉末加水配制成多糖溶液，用Co60-γ射线辐照处理多糖溶液，干燥即得木耳多糖；其中，步骤(6)的辐照条件为：辐照剂量为10-1000kGy/500ml，剂量率为5-7kGy/min。以下为本专利技术技术方案的优选技术参数：上述技术方案中，优选步骤(1)粉碎干燥木耳至粒径为100目。上述技术方案中，优选步骤(2)木耳粉体与水按质量比1∶40混合。上述技术方案中，优选步骤(3)采用热压法，在密闭容器中于至少120℃、至少0.12MPa的条件下浸提80分钟。上述技术方案中，优选步骤(3)密闭容器为高压蒸汽灭菌锅。上述技术方案中，步骤(3)浸提次数为一次。上述技术方案中，步骤(4)Sevage法除蛋白是按氯仿∶正丁醇4∶1比例配制Sevage试剂，木耳提取液与Sevage试剂4∶1混合，充分震荡摇匀除蛋白。上述技术方案中，步骤(5)所述乙醇为90-100％乙醇，优选95％乙醇。上述技术方案中，步骤(5)所述乙醇与木耳多糖溶液的体积比为1∶15-25，优选体积比为1∶20。上述技术方案中，步骤(5)所述静置宜静置超过8小时，一般操作为静置过夜，以便沉淀尽可能多的析出。上述技术方案中，优选步骤(6)多糖溶液浓度为1-5mg/ml，优选浓度为5mg/ml。上述技术方案中，优选步骤(6)的辐照条件为：辐照剂量为1000kGy/500ml，剂量率为7kGy/min。通过上述方法制备得到的木耳多糖较步骤(5)得到的多糖粉末的黏度降低，溶解性增加，而且发现其具有了降血脂的功能，尤其是可以降低胆固醇和低密度脂蛋白，尤其是降低血清中的胆固醇和低密度脂蛋白。采用本专利技术制备方法得到的木耳多糖将其应用于制备降血脂产品。而且通过辐照处理还可以实现最终的灭菌作用。附图说明图1为辐照剂量对溶解时间变化的影响。具体实施方式以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明，说明但不限制本专利技术。实施例1多糖粉末的制备(1)将木耳子实体粉碎，过100目筛网，得木耳粉体；(2)取步骤(1)所得木耳粉体与水按质量比1∶40混合，搅拌均匀；(3)采用热压法，在密闭容器中于120℃、0.12MPa的条件下浸提80分钟，得提取液；(4)离心，取上层木耳提取液，Sevage法除蛋白，得木耳多糖溶液；(5)95％乙醇按1∶20体积比沉淀多糖，静置过夜，离心，取沉淀烘干，得多糖粉末。实施例2辐照木耳多糖的制备及辐照条件的考察将实施例1的多糖粉末用蒸馏水配置成5g/ml的多糖溶液；分别用10kGy、100kGy、1000kGy的Co60-γ射线辐照，剂量率均为7kGy/min，辐照后的木耳多糖溶液经干燥后使用。将辐照后的木耳多糖粉末加水配置成终浓度为2mg/ml的木耳多糖溶液，50℃转速170rpm/min搅拌，测定其完全溶解的时间和黏度。辐照剂量对溶解时间变化的影响见图1。实验结果表明，经1000kGy的剂量辐照可显著降低木耳多糖溶解时间和黏度。溶解性能和黏度与物质结构性质相关，物质经高剂量辐照后糖苷键断裂，将大分子物质打断成成较小分子物质，小分子物质有利于机体吸收和利用。实施例3高血脂动物模型建立50只4周龄C57雄性小鼠，适应性喂养7天后，按体重随机分两组：第一组10只，为正常组，给予基础饲料；第二组40只为高脂组，给予高脂饲料(D12451，北京华阜康生物科技股份有限公司)造高血脂动物模型。小鼠自由采食，饮水。12周后小鼠眦静脉采血，测定血清总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白。试验数据采用SPSS19.0统计软件的独立样本t检验做统计处理。结果表明(见表1)，高血脂组血清总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白含量均显著高于正常组(P＜0.05)，高脂组血清高密度脂蛋白与正常组相比差异不显著(P＞0.05)。说明高血脂动物模型建立成功。表1正常组和对照组血脂含量变化情况注：数据结果以平均数±标准差表示(n＝10)，经单因素方差分析，其中▲表示实验组与模型对照组相比有显著差异(P＜0.05)。试验例1降血脂试验从实施例1的高脂组中选取30只高脂小鼠，随机分3组，分别是高脂组、多糖粉末组(按实施例制得的未经辐照处理的多糖粉末)和辐照处理组(按上述实施例2经1000kGy辐照处理所得的木耳多糖)，每组10只。实验组按25g/kg.d/只的剂量灌胃给予受试物，对照组给予相同剂量蒸馏水，3周后眼球摘除取血，全自动生化分析仪(日立7180)测定血清胆固醇(CHO)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。试验数据采用SPSS19.0统计软件的独立样本t检验做统计处理，结果见表2。表2辐照处理木耳多糖对血脂的影响注：数据结果以平均数±标准差表示(n＝10)，经单因素方差分析，其中*表示实验组与模型对照组相比有显著差异(P＜0.05).结果表明，未经辐照处理的多糖粉末组与高脂组血脂变化差异不显著，而经辐照处理所得的木耳多糖血清总胆固醇和血清低密度脂蛋白显著低与高脂组(P＜0.05)，这说明木耳本没有降血脂效果的多糖粉末经辐照处理后所得的木耳多糖能够降低血清总胆固醇和低密度脂蛋白的含量。试验例2实验动物肝功能检测为了测定辐照木耳多糖对肝功能是否存在伤害，专利技术人还测定了其对肝功能的影响。将试验分为对照组、多糖粉末组和辐照处理组，多糖粉末组和辐照处理组分别给予100g/kg.d/只的剂量的受试物，对照组给予相同剂量蒸馏本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.木耳多糖的制备方法，其特征在于：步骤如下：(1)粉碎干燥木耳至粒径＜100目，得木耳粉体；(2)取步骤(1)所得木耳粉体与水按质量比1∶20‑60混合，搅拌均匀；(3)采用热压法，在密闭容器中于至少120℃、至少0.12MPa的条件下浸提至少40分钟，得木耳提取液；(4)离心木耳提取液，取上清液采用Sevage法除蛋白后，得木耳多糖溶液；(5)木耳多糖溶液加乙醇沉淀多糖，静置，离心，取沉淀、干燥，得多糖粉末；(6)将多糖粉末加水配制成多糖溶液，用Co60‑γ射线辐照处理多糖溶液，干燥即得木耳多糖；其中，步骤(6)的辐照条件为：辐照剂量为10‑1000kGy/500ml，剂量率为5‑7kGy/min。

【技术特征摘要】
2017.01.04 CN 20171000414481.木耳多糖的制备方法，其特征在于：步骤如下：(1)粉碎干燥木耳至粒径＜100目，得木耳粉体；(2)取步骤(1)所得木耳粉体与水按质量比1∶20-60混合，搅拌均匀；(3)采用热压法，在密闭容器中于至少120℃、至少0.12MPa的条件下浸提至少40分钟，得木耳提取液；(4)离心木耳提取液，取上清液采用Sevage法除蛋白后，得木耳多糖溶液；(5)木耳多糖溶液加乙醇沉淀多糖，静置，离心，取沉淀、干燥，得多糖粉末；(6)将多糖粉末加水配制成多糖溶液，用Co60-γ射线辐照处理多糖溶液，干燥即得木耳多糖；其中，步骤(6)的辐照条件为：辐照剂量为10-1000kGy/500ml，剂量率为5-7kGy/min。2.根据权利要求1所述的木耳多糖的制备方法，其特征在于：步骤(6)的辐照条件为：辐照剂量为1000kGy/500ml，剂量率为7kGy/min。3.根据权利要求1所述的木耳多糖的制备方法，其特征在于：步骤(6)多糖溶液浓度为1-5mg/ml，优选浓度为5mg/ml。4.根据权利要求1所述的木耳多糖的制备方法，其特征在于：步骤(1)粉碎干燥木耳至粒径为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈祖琴，黄文丽，熊川，
申请(专利权)人：四川省农业科学院生物技术核技术研究所，
类型：发明
国别省市：四川,51