一种新型的肝癌生物治疗方法技术

本发明专利技术提供了一种治疗受试者中肝癌的方法，所述方法包括对受试者施用棕色脂肪细胞或其组合物，所述棕色脂肪细胞的给药途径包括通过瘤内、动脉内、静脉内、胸膜内、囊内、腔内或腹腔注射或者口服给药来进行，所述棕色脂肪细胞的给药途径为向受试者注射棕色脂肪细胞悬液。本发明专利技术还提供了构建小鼠肝癌模型的方法，包括减少或切除小鼠体内棕色脂肪组织或减少降低小鼠体内棕色脂肪细胞；优选地，所述方法包括手术切除或部分切除小鼠体内棕色脂肪组织；本发明专利技术还提供了抑制体内或体外肝癌细胞增殖或转移的方法，包括通过体内或体外肝癌细胞接触或与棕色脂肪细胞相混合，来实现肝癌细胞的抑制或减少肝癌细胞的转移。

A new biotherapy method for liver cancer

The present invention provides a method for the treatment of liver cancer in a subject, including the use of brown adipocytes or compositions of brown adipocytes, including through intratumoral, intravascular, intravascular, intravascular, intracapsular, intracavitary, or intraperitoneal injection or oral administration. The route of administration of colored adipocytes is to inject brown fat cell suspension into subjects. The invention also provides a method for constructing a mouse liver cancer model, including reducing or removing brown adipose tissue in mice or reducing brown adipocytes in mice; preferably, the method includes surgical removal or partial removal of brown adipose tissue in mice; the invention also provides the inhibition of liver cancer in vivo or in vitro. The method of cell proliferation or metastasis, including exposure to hepatoma cells in vivo or in vitro or mixed with brown adipocytes, can inhibit or reduce the metastasis of hepatoma cells.

【技术实现步骤摘要】
一种新型的肝癌生物治疗方法
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种新型的肝癌生物治疗方法。
技术介绍
肝癌是常见的恶性肿瘤，目前肝癌的治疗方法分为化疗，放疗，手术治疗和生物治疗。肝脏是人体重要的代谢器官，当肝细胞发生癌变后，人体的代谢机能则失去了平衡，这种不平衡反馈则会加速肝癌生长。现有的手术治疗局限性大，而化疗和放疗都有较强的毒副作用，降低了患者的生活质量。生物治疗虽然显示出了良好的前景，但目前仍存在诸多困难和问题。有时虽然应用多种生物反应调节剂，几种免疫指标也可望恢复正常，但仍不能阻止肿瘤的发生，收效甚微。
技术实现思路
虽然棕色脂肪组织是近些年的研究热点，但是目前有关棕色脂肪组织的研究主要聚焦于肥胖和糖尿病领域。从未有报道棕色脂肪组织与癌症的发生，发展和转移存在直接的关系。而本专利技术首先提出一种新的肝癌生物治疗方法即棕色脂肪细胞或组织可以阻止肝癌的发展，从而提供了一种肝癌的预防或者治疗方法。本专利技术的第一目的在于提供一种治疗受试者中肝癌的方法，其中，所述方法包括对受试者施用棕色脂肪细胞或其组合物。优选地，本专利技术所述的治疗受试者中肝癌的方法中，所述棕色脂肪细胞包括哺乳动物棕色脂肪细胞。优选地，本专利技术所述的治疗受试者中肝癌的方法中，所述棕色脂肪细胞包括哺乳动物棕色脂肪细胞包括人或小鼠。优选地，本专利技术所述的治疗受试者中肝癌的方法中，所述受试者包括哺乳动物。优选地，本专利技术所述的治疗受试者中肝癌的方法中，所述受试者包括人或小鼠。优选地，本专利技术所述的治疗受试者中肝癌的方法中，所述棕色脂肪细胞的给药途径包括通过瘤内、动脉内、静脉内、胸膜内、囊内、腔内或腹腔注射或者口服给药来进行。优选地，本专利技术所述的治疗受试者中肝癌的方法中，所述棕色脂肪细胞的给药途径为向受试者注射棕色脂肪细胞悬液。优选地，本专利技术所述的治疗受试者中肝癌的方法中，所述棕色脂肪细胞悬液的浓度为3.5～7×107细胞/公斤体重。本专利技术的另一方面为提供了构建小鼠肝癌模型的方法，所述方法为包括减少或切除小鼠体内棕色脂肪组织或减少降低小鼠体内棕色脂肪细胞；优选地，所述方法包括手术切除或部分切除小鼠体内棕色脂肪组织。本专利技术的另一方面为提供了抑制体内或体外肝癌细胞增殖或转移的方法，包括通过体内或体外肝癌细胞接触或与棕色脂肪细胞相混合，来实现肝癌细胞的抑制或减少肝癌细胞的转移。本专利技术与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：棕色脂肪组织是近些年的研究热点，但大多聚集于肥胖和糖尿病领域。而且肝脏是重要的代谢调节器官。一般认为，棕色脂肪组织和肝脏在空间上是疏离的，作为两种重要的代谢器官和组织，很少有研究关注二者之间的关系。而本专利技术首次证实棕色脂肪组织与肝癌的发展存在某种关系，即棕色脂肪组织的存在能够抑制肝癌的发展，并提供确切的模型与给药方法，证明可以减少或抑制肝癌细胞的发生、增殖或转移，为肝癌疾病的治疗提供了有效的工具和方法。附图说明图1为本专利技术中一个实施例中的肿瘤组小鼠比健康生长组小鼠肝脏表达谱分析上调的KEGG通路图；图2为本专利技术中一个实施例中的肿瘤组小鼠比健康生长组小鼠肝脏表达谱分析下调的KEGG通路图；图3为本专利技术中一个实施例中的健康生长组(C)和肿瘤组(T)小鼠的棕色脂肪组织和肝脏的病理切片(200×)；图4为本专利技术中一个实施例中的假手术组(S)，假手术肿瘤组(ST)，手术组(O)以及手术肿瘤组(OT)的小鼠的棕色脂肪组织和肝脏的病理切片(200×)；图5为本专利技术中一个实施例中的原代棕色脂肪细胞对H22细胞生长的抑制作用示意图；图6为本专利技术中一个实施例中的手术肿瘤组小鼠比肿瘤组小鼠肝脏表达谱分析上调的KEGG通路图；图7为本专利技术中一个实施例中的手术肿瘤组小鼠比肿瘤组小鼠肝脏表达谱分析下调的KEGG通路图。具体实施方式下面将结合本专利技术中的实施例，对本专利技术中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1H22小鼠肝癌动物模型的构建H22腹水瘤是本实验室冻存，我们将液氮冻存的H22腹水瘤接种在昆明小鼠的腹腔，2周后昆明小鼠的腹腔中长满H22的腹水。将H22的腹水瘤接种至昆明小鼠的腋下，2周后可以长成H22肝癌的实体移植瘤。取H22腹水瘤液，对腹水中的细胞进行计数，并稀释至7.5×106个/ml并在10只雌性20-22g昆明小鼠的腋下接种0.2ml稀释液，另有10只健康生长的小鼠作为对照。十天后，将两组小鼠摘除眼球取血，并进行解剖，记录肿瘤组织，肝脏，肩胛部的棕色脂肪组织(BrownAdiposeTissue,下简称BAT)和腹股沟处的白色脂肪组织(WhiteAdiposeTissue,下简称WAT)的重量，结果如表1；同时取肝脏组织冻存在液氮中。实验结束，将收集的血液离心，吸取上清至干净的EP管，即为血清，冻存在-80℃冰箱。从表1中，我们发现，H22小鼠的肝脏发生了肿大，其重量和对照组比较具有显著性差异(P<0.01)；而棕色脂肪组织和白色脂肪组织的质量均发生一定程度的减少，但没有统计学差异(P>0.05)。在图3中，肝脏和棕色脂肪组织的病理切片分析结果表明，肿瘤接种前后未发现明显的病理变化。我们将两组小鼠的血清进行生化指标的分析，测定胆固醇(CHO)，高密度脂蛋白(HDL)，低密度脂蛋白(LDL)，三酰甘油(TG)和葡萄糖(GLU)在血清中的含量。我们发现，H22小鼠血清中TG的含量显著上升，和对照组比较存在明显的统计学差别(P<0.01)。因此，我们认为H22移植瘤引起了体内脂肪代谢的变化。我们对两组小鼠的肝脏进行基因表达谱的分析，图1表明肿瘤组小鼠肝脏中细胞周期和DNA复制相关信号通路上调，而图2中多种与代谢相关的信号通路下调。表1H22小鼠和健康小鼠的体重以及肿瘤，肝脏，BAT和WAT的重量注：数值表达形式为平均值±SD值。用t检验法进行分析。肿瘤组与健康生长组相比，**表示差异极显著(P<0.01)，*表示差异显著(P<0.05)，不标者则为差异不显著(P>0.05)。表2H22小鼠和健康小鼠血清的生化指标分析注：数值表达形式为平均值±SD值。用t检验法进行分析。肿瘤组与健康生长组相比，**表示差异极显著(P<0.01)，*表示差异显著(P<0.05)，不标者则为差异不显著(P>0.05)。实施例2棕色脂肪组织的切除模型取40只体重20-22g的雌性昆明小鼠，按照50mg/kg注射戊巴比妥钠溶液进行麻醉，其中20只将肩胛部的棕色脂肪组织切除，并立即将伤口缝合；另外20只进行假手术的处理，即在肩胛部切开伤口后直接缝合。三天后，取10只切除棕色脂肪组织的小鼠和10只假手术的小鼠，在腋下接种H22瘤液。十天后，将所有40只小鼠摘除眼球取血，并进行解剖，记录肿瘤，肝脏，肩胛部棕色脂肪组织和腹股沟白色脂肪组织的重量，结果如表3。实验结束，将收集的血液离心，吸取上清至干净的EP管，此即为血清，冻存在-80℃冰箱。我们发现，手术肿瘤组的肿瘤比假手术肿瘤组的肿瘤重量更大并具本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗受试者中肝癌的方法，其中，所述方法包括对受试者施用棕色脂肪细胞或其组合物。

【技术特征摘要】
1.一种治疗受试者中肝癌的方法，其中，所述方法包括对受试者施用棕色脂肪细胞或其组合物。2.根据权利要求1所述的治疗受试者中肝癌的方法，其特征在于，所述棕色脂肪细胞包括哺乳动物棕色脂肪细胞。3.根据权利要求1所述的治疗受试者中肝癌的方法，其特征在于，所述棕色脂肪细胞包括人或小鼠。4.根据权利要求1所述的治疗受试者中肝癌的方法，其特征在于，所述受试者包括哺乳动物。5.根据权利要求1所述的治疗受试者中肝癌的方法，其特征在于，所述受试者包括人或小鼠。6.根据权利要求1所述的治疗受试者中肝癌的方法，其特征在于，所述棕色脂肪细胞的给药途径包括通过瘤内、动脉...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈淑珍，刘栋，李毅，商悦，王文蝶，
申请(专利权)人：中国医学科学院医药生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11