一种快速繁殖白芨的方法技术

本发明专利技术涉及一种快速繁殖白芨的方法，包括以下步骤：1.选择成熟未开裂的蒴果无菌处理后，剥开取出种子，迅速接种在萌发培养基上；2.壮苗生根培养：选取长至1cm左右的植株，接种在培养基上，培养60～70天；3.试管苗驯化移栽：将长至10cm以上生根的试管苗，常温下炼苗3‑4天，洗净琼脂，用50％多菌灵浸泡，移栽基质中。本发明专利技术的快速繁殖白芨的方法，所用步骤少，能一次性成苗，对于建立工业化繁殖白芨体系有重大意义，不仅简化生产程序，提高效率，降低了成本，而且降低接种过程中所产生的污染率，相对提高生产效率。

A method for rapid propagation of Bletilla striata

The present invention relates to a method for rapid propagation of Bletilla striata, which includes the following steps: 1. after selecting the sterile treatment of a mature and not cracking capsule, the seeds are stripped out and quickly inoculated on the medium of germination; 2. seedlings are cultivated on the roots of about 1cm, inoculated on the medium for 60~70 days, and 3. of the tube seedlings domesticated and moved. Planting: test tube plantlets longer than 10cm and rooting at room temperature for 3 days and 4 days. Wash the agar and soak it with 50% carbendazim to transplant the substrate. The method of rapid propagation of Bletilla striata in the present invention has few steps and can become a seedling in one time. It is of great significance to the establishment of a system of industrial reproduction of Bletilla striata. It not only simplifies the production procedure, improves the efficiency and reduces the cost, but also reduces the pollution rate in the inoculation process, and improves the production efficiency relatively.

【技术实现步骤摘要】
一种快速繁殖白芨的方法
本专利技术属于药用植物栽培
，涉及一种快速繁殖白芨的方法。
技术介绍
白芨(Bletillastriata)为兰科白芨属多年生草本植物，白芨不仅具有较高观赏价值，也是我国常用的中药材之一(中国植物志，1999)。以干燥块茎入药，具有收敛止血、消肿生肌等功效(中国药典,2015)，此外，白芨茎中还含有较高的白芨胶，具有特殊的黏度特性，可作为增稠剂、混悬剂、保湿剂和助乳化剂等应用于化妆品中，具有良好的效果(刘光斌等，2005；马世宏等，2009)，使用范围广，需求量呈现不断上升态势。野生白芨因需求被过度采挖，导致其野生自然资源急剧减少，濒临灭绝，被国家列为重点保护的野生药用植物之一，传统的人工栽培繁殖方式通常以分株法繁殖，繁殖系数低(黄泰康和孔令义,2002)。为保护白芨野生资源，人工繁育和栽培白芨成了研发人员大力研究方向，如白芨的无菌萌发与组织培养，但其分为使用了三种培养基培养各个阶段，且萌发和生根效率都有待于进一步提高。为得到更高的萌发率及更快速繁殖白芨，本专利技术从培养基的优化及一次性成苗的方法研究中，利用植物组织培养技术探讨快速繁殖白芨种苗的有效方法。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种快速繁殖白芨的方法。为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：1、一种快速繁殖白芨的方法，包括以下步骤：(1)种子无菌萌发：将未开裂成熟白芨蒴果无菌处理，从蒴果中部剥开，取出种子，迅速接种在萌发培养基上；培养条件：培养温度24～26℃,光照强度1500～2000Lx，光照时间10h·d-1；萌发培养基为：MS+6-BA1～1.5mg/L+NAA0.5～0.8mg/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8；(2)壮苗生根培养：将步骤(1)中长至1cm左右的植株，接种在MS+NAA1.5mg/L+IBA0～0.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8的培养基上；培养条件：培养温度24～26℃，光照强度1500～2000Lx，光照时间10h·d-1；(3)试管苗驯化移栽：将长至10cm以上生根的试管苗，常温下炼苗3-4天，洗净琼脂，用50％多菌灵浸泡，移栽基质中，保持遮光率为80％，土壤水分60～70％。进一步，所述萌发培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5～0.8mg/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8。进一步，所述萌发培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.8mg/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.3g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8。进一步，步骤(2)中培养基为：MS+NAA1.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8。进一步，步骤(2)中培养基为：MS+NAA1.5mg/L+香蕉泥100g/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8。以上任一项所述的快速繁殖白芨的方法，所述无菌处理为用洗洁精水清洗蒴果表面，水冲洗干净，无菌环境下，75％酒精的浸泡30～60S，无菌水冲洗3-4遍，用0.1％升汞灭菌8min，再用无菌水冲洗7-8遍，用无菌纸吸干蒴果表面水分。本专利技术的有益效果在于：1.本专利技术的快速繁殖白芨的方法，所用步骤少，能一次性成苗，即用2种培养基便完成种子萌发、诱导、壮苗、生根的培养；这对于建立工业化繁殖白芨体系有重大意义，一次性成苗不仅简化生产程序，提高效率，尽量避免萌发、诱导、壮苗、生根4个培养过程中使用不同的培养基，降低了成本，而且降低接种过程中所产生的污染率，相对提高生产效率。2.通过对萌发培养基的优化调整，加速无菌萌发的时间，10d就开始种子就开始萌发，到20天统计时基本都萌发到1cm以上，且萌发率高达96.9％。3.进一步优化条件壮苗生根的培养基，使得所培养的试管苗植株的生根率较好、植株高度叫高、假鳞茎直径较大、单株须根较多。最好的生根率能达到97.9％，且诱导出来的根长势较好，植株的健壮度也很好，对下一步的移栽打下坚实的基础。附图说明为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图进行说明：图1为实施例2中使用5号萌发培养基接种后10天种子萌发状态；图2为实施例2中使用5号萌发培养基接种后20天种子萌发状态；图3为实施例3中使用7号培养基繁殖的白芨苗；图4为实施例3中使用7号培养基繁殖的白芨苗植株高度测量图。具体实施方式下面将结合附图，对本专利技术的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。实验材料：白芨种子，取自贵州黔康生态科技农业发展有限公司白芨种植基地。实施例1快速繁殖白芨的方法：(1)种子无菌萌发：挑选未开裂成熟的白芨蒴果，用洗洁精水清洗蒴果表面，自来水冲洗干净，在超净工作台上，75％酒精的浸泡30S，无菌水冲洗3-4遍，用0.1％升汞灭菌8min，再用无菌水冲洗7-8遍，用无菌纸吸干蒴果表面水分，从蒴果中部剥开，取出种子，迅速接种在萌发培养基上，每个处理接种10瓶，每瓶接种4个团块，定期观察记录，20d后分析统计结果；培养条件：培养温度(25±1)℃,光照强度2000Lx，光照时间10h·d-1；萌发培养基为：MS+6-BA1mg/L+NAA0.8mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.8。(2)壮苗生根培养：将步骤(1)中长至1cm左右的植株，接种在MS+NAA1.5mg/L+香蕉泥60g/L+AC0.3g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.8的培养基上；每个处理接种10瓶，每瓶接种20苗，定期观察记录，70d后分析统计试验结果。培养条件：培养温度25±1℃,光照强度2000Lx，光照时间10h·d-1；(3)试管苗驯化移栽：将长至10cm以上生根的试管苗，置于常温条件下的室内，炼苗3-4天，打开瓶盖，将苗拿出洗净琼脂，用50％多菌灵可湿性粉剂500倍液浸泡30min，移栽于配制好的基质中，起小拱棚，搭上遮光率为80％的遮阳网，保持土壤水分60％。由此实施例得到试验结果统计计算萌发率为48.2％。实施例2快速繁殖白芨的方法：(1)种子无菌萌发：挑选未开裂成熟的白芨蒴果，用洗洁精水清洗蒴果表面，自来水冲洗干净，在超净工作台上，75％酒精的浸泡30S，无菌水冲洗3-4遍，用0.1％升汞灭菌8min，再用无菌水冲洗7-8遍，用无菌纸吸干蒴果表面水分，从蒴果中部剥开，取出种子，迅速接种在萌发培养基上，每个处理接种10瓶，每瓶接种4个团块，定期观察记录，20d后分析统计结果；培养条件：培养温度(25±1)℃,光照强度1800Lx，光照时间10h·d-1；萌发培养基为：MS+6-BA1mg/L+NAA0.8mg/L+AC0.3g/L+脯氨酸0g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.8。(2)壮苗生根培养：将步骤(1)中长至1cm左右的植株，接种在M本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速繁殖白芨的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)种子无菌萌发：将未开裂成熟白芨蒴果无菌处理，从蒴果中部剥开，取出种子，迅速接种在萌发培养基上；培养条件：培养温度24～26℃,光照强度1500～2000Lx，光照时间10h·d‑1；萌发培养基为：MS+6‑BA1～1.5mg/L+NAA0.5～0.8mg/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8；(2)壮苗生根培养：将步骤(1)中长至1cm左右的植株，接种在MS+NAA1.5mg/L+IBA 0～0.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8的培养基上；培养条件：培养温度24～26℃，光照强度1500～2000Lx，光照时间10h·d‑1；(3)试管苗驯化移栽：将长至10cm以上生根的试管苗，常温下炼苗3‑4天，洗净琼脂，用50％多菌灵浸泡，移栽基质中，保持遮光率为80％，土壤水分60～70％。

【技术特征摘要】
1.一种快速繁殖白芨的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)种子无菌萌发：将未开裂成熟白芨蒴果无菌处理，从蒴果中部剥开，取出种子，迅速接种在萌发培养基上；培养条件：培养温度24～26℃,光照强度1500～2000Lx，光照时间10h·d-1；萌发培养基为：MS+6-BA1～1.5mg/L+NAA0.5～0.8mg/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8；(2)壮苗生根培养：将步骤(1)中长至1cm左右的植株，接种在MS+NAA1.5mg/L+IBA0～0.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8的培养基上；培养条件：培养温度24～26℃，光照强度1500～2000Lx，光照时间10h·d-1；(3)试管苗驯化移栽：将长至10cm以上生根的试管苗，常温下炼苗3-4天，洗净琼脂，用50％多菌灵浸泡，移栽基质中，保持遮光率为80％，土壤水分60～70％。2.根据权利要求1所述的快速繁殖白芨的方法，其特征在于，所述萌发培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄刚，周黎，付燕，万新屏，郑晓峰，何宪江，李杰，
申请(专利权)人：黔东南民族职业技术学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52