一类生物活性肽在护肤和皮肤美白中的应用制造技术

本发明专利技术提供一类具有抑制黑色素合成活性的生物活性肽在皮肤美白中的应用，该类生物活性肽的氨基酸序列如式I，X1 ‑(Gly‑L‑Cys)n‑X2‑ X3（I），式中，X1是无或L‑Phe，X2是无或Gly，X3是无或L‑Phe，X1和X3不能同时为无，n≤8。属于生物医药、化妆品技术领域。该类肽可穿过皮肤表皮进入真皮层，穿过细胞膜，进入细胞，在细胞内水解酶的作用下水解生成相应的甘氨酸和半胱氨酸，从而发挥抑制酪氨酸酶活性的作用，抑制黑色素的合成，能够有效美白，以及制备用于预防和治疗黑色素过多导致的人体色素沉着性疾病、黑色素瘤以及其他需要抑制酪氨酸酶活性的病症药物的各种制剂。

Application of a class of bioactive peptides in skin care and skin whitening

The present invention provides a class of bioactive peptides that have the inhibition of melanin synthesis activity in skin whitening. The amino acid sequences of the bioactive peptides such as I, X1 L Cys n X2 X3 (I), X1 are no or L Phe. . It belongs to the field of biomedicine and cosmetic technology. The peptide can pass through the skin skin into the dermis, pass through the cell membrane, enter the cell, hydrolyze into the corresponding glycine and cysteine under the action of the intracellular hydrolase, thus play a role in inhibiting the activity of tyrosinase, inhibit the synthesis of melanin, effectively whiten the white, and prepare for the prevention and treatment of black. Hyperpigmentation caused by hyperpigmentation, melanoma and other preparations that need to inhibit tyrosinase activity.

【技术实现步骤摘要】
一类生物活性肽在护肤和皮肤美白中的应用
本专利技术属于生物医药、化妆品
，涉及一类生物活性肽在护肤和皮肤美白中的应用。
技术介绍
爱美之心，人皆有之。对于女性来说，美白是一个永恒的话题，具有美白功效的化妆品一直备受东方女性青睐。近年来，市场上为了迎合女性对美白的需求，出现了遮瑕膏、粉底、定妆粉等一系列粉饰美白的化妆品，有即时美白的效果，但对于肤质根本的改善是没有作用的。其实，只有把内在肤质调理好，根治影响美白的罪魁祸首——黑色素，肌肤才能展现真正的亮白光彩。黑色素其实是一种氨基酸衍生物，在每个人的体内都有。黑色素在表皮基底部的黑色素细胞中形成，然后转移至基底细胞中，随着表皮细胞的移行被带到表皮全层，形成色斑和肤色不均等皮肤问题。黑色素形成的生物学过程非常复杂，其中酪氨酸酶是黑色素形成过程中主要的限速酶，酪氨酸酶活性程度对色素的沉积起主要作用，阻断黑色素的合成和转移是评价美白化妆品功效的主要途径。甘氨酸，是化学结构最简单的氨基酸，是蛋白质重要的组成成分，能调控哺乳动物的生理功能。研究表明，甘氨酸通过下调酪氨酸酶的表达，抑制黑色素细胞合成黑色素。L-半胱氨酸是一种含有巯基的天然氨基酸，近年来，L-Cys作为抗氧化剂，广泛用于果蔬保鲜领域。研究表明，L-半胱氨酸的巯基对抑制酪氨酸酶活性起重要作用，因此，L-半胱氨酸及其衍生物也可作为美白化妆品的添加剂，减少黑色素合成。尽管甘氨酸和半胱氨酸都能明显减少黑色素合成，起美白护肤作用，但是甘氨酸和半胱氨酸难以透过细胞膜，不能从皮肤表皮进入真皮，限制了它们在护肤品领域的应用。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术存在的问题，提供了一类具有抑制黑色素合成活性的生物活性肽在护肤和皮肤美白中的应用，该类生物活性肽的氨基酸序列如式I，X1-(Gly-L-Cys)n-X2-X3(I)，式中，X1是无或L-PheX2是无或GlyX3是无或L-PheX1和X3不能同时为无，n≤8蛋白水解酶切割后产生游离Gly和Cys作为药物或药理活性基团，Phe作为穿透细胞膜的载体。优选地，所述生物活性肽选自下组任意一种：a、NH2-Gly-Cys-Phe-COOH；b、NH2-(Gly-Cys)4-Phe-COOH；c、NH2-(Gly-Cys)8-Phe-COOH、d、NH2-Gly-Cys-Gly-Phe-COOH；e、NH2-Phe-Gly-Cys-COOH；f、NH2-Phe-Gly-Cys-Gly-COOH；g、NH2-Phe-Gly-Cys-Phe-COOH；h、NH2-Phe-(Gly-Cys)4-Phe-COOH；i、NH2-Phe-(Gly-Cys)7-Phe-COOH；j、NH2-Phe-Gly-Cys-Gly-Phe-COOH。本专利技术涉及式I所示的生物活性肽中的一种或它们的混合物，通过不加或加入化妆品、护肤品辅料在护肤和皮肤美白中的应用。本专利技术涉及式I所示的生物活性肽中的一种或它们的混合物作为化妆品或护肤品添加剂的用途。本专利技术涉及式I所示的生物活性肽中的一种或它们的混合物，通过不加或加入药物制剂辅料在制备用于预防和治疗黑色素过多导致的人体色素沉着性疾病药物中的应用。本专利技术涉及式I所示的生物活性肽中的一种或它们的混合物，通过不加或加入药物制剂辅料在制备用于预防和治疗黑色素瘤的药物中的应用。本专利技术涉及式I所示的生物活性肽中的一种或它们的混合物，通过不加或加入药物制剂辅料在制备用于预防和治疗其他需要抑制酪氨酸酶活性的病症的药物中的应用。本专利技术的原理在于：式I的生物活性肽中存在两个蛋白水解酶切割位点，一个是Gly与Cys连接,另一个是肽两端Phe与任意氨基酸连接，Phe作为穿透细胞膜的载体，可携带多肽分子穿过皮肤表皮，进入真皮层，生物活性肽可以穿过细胞膜，进入细胞，在细胞内水解酶的作用下水解生成相应的甘氨酸和半胱氨酸，抑制黑色素的合成，从根本上达到美白效果。为了更好地理解本专利技术的实质，本专利技术的一个实施例证实式I所示的生物活性肽可透过表皮进入真皮层。一个非常适合的应用实例是式I所示的生物活性肽对于UVB引起的人真皮成纤维细胞氧化损伤，具有保护作用。本专利技术的实施例还证实式I所示的生物活性肽抑制小鼠B16黑色素瘤细胞中酪氨酸酶活性。本专利技术的有益之处在于：(1)本专利技术对式I所示的生物活性肽发掘了新的美容和医疗用途，开拓了一个新的应用领域。(2)本专利技术的式I所示的生物活性肽是由天然的氨基酸组成，进入人体后不存在排斥反应，因此副作用小，预示着很好的美容及药用前景。(3)本专利技术发现了式I所示的生物活性肽具有抑制酪氨酸酶活性的作用，抑制黑色素的合成，从根本上达到美白效果。(4)本专利技术式I所示的生物活性肽在细胞模型上能明显抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素合成，因此对由黑色素引起的晒斑、黄褐斑、妊娠斑等皮肤问题具有一定的效果。附图说明图1为本专利生物活性肽的HPLC图谱以及质谱图，这些多肽均由本实验室自主合成。图2为生物活性肽透过大鼠表皮进入真皮层的示意图。图3为生物活性肽对正常人真皮成纤维细胞活性无影响的示意图。图4为生物活性肽对UVB辐射人真皮成纤维细胞活性的影响示意图。图5为生物活性肽对小鼠B16黑色素瘤细胞生长无影响的示意图。图6为生物活性肽影响小鼠B16黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性的示意图。具体实施方式通过以下详细说明结合附图可以进一步理解本专利技术的特点和优点。所提供的实施例仅是对本专利技术方法的说明，而不以任何方式限制本专利技术揭示的其余内容。【实施例1】本专利以甘氨酸-L-半胱氨酸-L-苯丙氨酸三肽(GCF)为例说明固相合成肽的制备过程如下：一、复合物IFmoc-L-Phe-树脂的合成：本专利三肽用固相合成的方法，称取取代度为0.4mmol/g的2-氯三苯甲基氯树脂(2-ChlorotritylChlorideResin)10.7g，将树脂放入多肽反应管中，加入二氯甲烷(DCM)160.5ml,震荡30分钟；通过沙芯抽滤掉DCM溶剂，加入12mmol的Fmoc-L-Phe-OH氨基酸，再加入40mmol的N,N-二异丙基乙胺(DIEA)，最后加入少量二甲基甲酰胺(DMF)溶解，振荡1h。用DMF和DCM交替清洗6遍。加160.5ml20％哌啶(哌啶溶解在DMF溶液中)，5分钟后抽掉哌啶，再次加入160.5ml20％哌啶，等15分钟后抽掉哌啶溶液，从管中取反应后的树脂十几粒，用乙醇洗三次，加入茚三酮，氰化钾溶液，苯酚溶液各一滴，105℃－110℃加热5min,变深蓝色为阳性反应，说明Fmoc-L-Phe-OH与树脂联接成功，形成复合物IFmoc-L-Phe-树脂。二、复合物IIFmoc-Cys(Trt)-L-Phe-树脂的合成：多肽反应管分别用160.5mlDMF洗两次，160.5ml甲醇洗两次，160.5mlDMF再洗两次；后在Fmoc-L-Phe-树脂复合物上联接第二个氨基酸，在反应管中加入少量用DMF溶解的12mmolFmoc-Cys(Trt)-OH和12mmol苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)，后立即加入N-甲基吗啉(NMM)40mmol,反应30min，反应管分别用160.5mlDMF洗一次，160.5ml甲醇洗两次，160.5mlDMF再洗两次。加160.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一类具有抑制黑色素合成活性的生物活性肽在皮肤美白中的应用，其特征在于，所述的生物活性肽的氨基酸序列如式I，X1 ‑(Gly‑L‑Cys)n‑X2‑ X3（I），式中，X1是无或L‑PheX2是无或GlyX3是无或L‑PheX1和X3不能同时为无，n≤8蛋白水解酶切割后产生游离Gly和Cys作为药物或药理活性基团，Phe作为穿透细胞膜的载体。

【技术特征摘要】
1.一类具有抑制黑色素合成活性的生物活性肽在皮肤美白中的应用，其特征在于，所述的生物活性肽的氨基酸序列如式I，X1-(Gly-L-Cys)n-X2-X3（I），式中，X1是无或L-PheX2是无或GlyX3是无或L-PheX1和X3不能同时为无，n≤8蛋白水解酶切割后产生游离Gly和Cys作为药物或药理活性基团，Phe作为穿透细胞膜的载体。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的式I选自下组任意一种：a、NH2-Gly-Cys-Phe-COOH；b、NH2-(Gly-Cys)4-Phe-COOH；c、NH2-(Gly-Cys)8-Phe-COOH、d、NH2-Gly-Cys-Gly-Phe-COOH；e、NH2-Phe-Gly-Cys-COOH；f、NH2-Phe-Gly-Cys-Gly-COOH；g、NH2-Phe-Gly-Cys-Phe-COOH；h、NH2-Phe-(Gly-...

【专利技术属性】
技术研发人员：万芪，陈娟，庄杨，张娅，廖华宝，万沙，
申请(专利权)人：武汉弘跃医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42