一种酸枣仁-远志提取物及其制备方法与在改善睡眠中的应用技术

本发明专利技术公开了一种酸枣仁‑远志提取物及其制备方法与在改善睡眠中的应用。所述酸枣仁‑远志提取物的制备方法包括如下步骤：将酸枣仁和远志粉碎后混合，经脱脂后利用乙醇水溶液进行提取，经过滤得到提取液；提取液经分离纯化即得。本发明专利技术提供的酸枣仁‑远志提取物能够改善睡眠水平，具体表现为：提高脑组织中5‑HT在总蛋白中的含量、降低脑组织中NE在总蛋白中的含量、降低脑组织中GABA在总蛋白中的含量、降低脑组织中DA在总蛋白中的含量。本发明专利技术得到了镇静安神最佳有效部位，其药理活性明显提高，为酸枣仁‑远志镇静安神新型保健品的开发提供有效的部位，减少了药物的服用量，得到的有效部位的镇静安神作用效果明显，组织学检查对肝、肾无影响。 1

Semen Zizyphi jujuba and Polygala tenuifolia extract and its preparation method and application in improving sleep

The invention discloses an extract of sour jujube kernel and Polygala tenuifolia, and its preparation method and application in improving sleep. The preparation method of the extraction method includes the following steps: mixing the sour Zizyphus Zizyphi with the Polygala and mixing the extract after degreasing and extracting the extract by the ethanol water solution and filtrating the extract, and the extraction solution is obtained. The extract provided by this invention can improve the level of sleep, which is characterized by increasing the content of 5 HT in the total protein in brain tissue, reducing the content of NE in the total protein in brain tissue, reducing the content of GABA in the total protein in brain tissue, and reducing the content of DA in the total protein in brain tissue. The invention has obtained the best effective part of the town Jingan God, and its pharmacological activity is obviously improved. It provides effective parts for the development of new health products of Jingan God in Yuan Zhi Yuan Zhen Yuan Zhen, reducing the dosage of drugs, the effective part of the effective part of the town of Jingan is obvious, and the histological examination has no effect on the liver and kidney. One

【技术实现步骤摘要】
一种酸枣仁-远志提取物及其制备方法与在改善睡眠中的应用
本专利技术涉及一种酸枣仁-远志提取物及其制备方法与在改善睡眠中的应用，属于中药制剂

技术介绍
酸枣仁为鼠李科植物酸枣ZiziphusjujubaMill.var.spinosa(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥成熟种子。酸枣仁中主要成分为黄酮类、皂苷类、多糖类、挥发油类等物质。黄酮类化合物主要有斯皮诺素、6″′-阿魏酰斯皮诺素、6″′-对香豆酰斯皮诺素、6″′-对羟基苯甲酰斯皮诺素等。皂苷类化合物主要有酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B等。现代药理研究表明酸枣仁具有镇静安神、抗焦虑、抗抑郁、增强记忆等作用。远志为远志科植物远志PolygalatenuifoliaWilld.或卵叶远志PolygalasibiricaL.的干燥根。远志具有安神益智、祛痰消肿功效。常用于心肾不交引起的失眠，健忘等症。远志中主要成分为皂苷类、寡糖酯类、挥发油类、有机酸类等物质。皂苷类化合物主要有远志酸、远志皂苷A、远志皂苷B、细叶远志素等。现代药理研究表明，远志具有镇静安神、增强记忆、抗痴呆、抗衰老等作用。研究表明，酸枣仁发挥镇静安神作用的化学物质是黄酮类、皂苷类、脂肪油类、生物碱类。斯皮诺素、酸枣仁皂苷A是酸枣仁发挥镇静安神的主要单体化合物。远志发挥镇静安神作用的化学物质是皂苷类。细叶远志皂苷是远志发挥镇静安神的主要单体化合物。目前对远志在镇静安神方面的研究，尤其是作用机制方面的研究还不足。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种酸枣仁-远志提取物，含有较高的总黄酮及总皂苷，能够用于改善睡眠问题。本专利技术所提供的酸枣仁-远志提取物的制备方法，包括如下步骤：将酸枣仁和远志粉碎后混合，经脱脂后利用乙醇水溶液进行提取，经过滤得到提取液；所述提取液经分离纯化即得所述酸枣仁-远志提取物。上述的制备方法中，所述酸枣仁与所述远志的质量比可为1～2：1～2，具体可为1：1、2：1或1：2；所述提取的条件如下：所述乙醇水溶液的体积浓度为65％；温度为70℃；时间为60min；液固比为10mL/g；本专利技术是根据所述总黄酮、总皂苷含量测定方法中总黄酮、总皂苷的含量，得到上述最优参数的，其中总皂苷指的是提取液中酸枣仁皂苷与远志皂苷质量之和。上述的制备方法中，采用大孔吸附树脂分离纯化所述提取液，如D101大孔吸附树脂；所述分离纯化的条件如下：依次采用蒸馏水、体积浓度为30％的乙醇水溶液、体积浓度为50％的乙醇水溶液和体积浓度为70％的乙醇水溶液进行洗脱，洗脱体积分别为8BV、8BV、8BV和4BV；体积浓度为30％的乙醇水溶液的洗脱液中黄酮纯度为37.8％，体积浓度为70％的乙醇水溶液中皂苷纯度为45.0％。在上述条件下对所述提取液进行分离纯化，经3次试验，得到的酸枣仁-远志提取物中，黄酮平均纯度约37.5％，皂苷平均纯度约45.0％。按照如下方式装柱：将所述大孔吸附树脂用95％乙醇水溶液浸泡24h，采用湿法装柱。用95％乙醇水溶液洗脱至流出液1份加5份水不出现浑浊，然后用大量蒸馏水洗至无醇味。上述方法制备得到的酸枣仁-远志提取物也是本专利技术的保护范围。本专利技术提供的酸枣仁-远志提取物能够改善睡眠水平，具体表现为：提高脑组织中5-HT在总蛋白中的含量、降低脑组织中NE在总蛋白中的含量、降低脑组织中GABA在总蛋白中的含量、降低脑组织中DA在总蛋白中的含量。本专利技术具有如下优点：(1)得到了提取药对总黄酮、总皂苷的最佳提取分离纯化工艺，实现了有效成分的富集，提取条件温和，得率高；(2)得到了镇静安神最佳有效部位，其药理活性明显提高，为酸枣仁-远志镇静安神新型保健品的开发提供有效的部位，减少了药物的服用量；(3)得到的有效部位的镇静安神作用效果明显，组织学检查对肝、肾无影响。附图说明图1为乙醇浓度对提取液中总黄酮、总皂苷得率的影响。图2为液固比对提取液中总黄酮、总皂苷得率的影响。图3为提取时间对提取液中总黄酮、总皂苷得率的影响。图4为提取温度对提取液中总黄酮、总皂苷得率的影响。图5为乙醇浓度、温度的等高线图和响应曲面图。图6为液固比、温度的等高线图和响应曲面图。图7为总黄酮、总皂苷的泄露曲线。图8为总黄酮、总皂苷的洗脱曲线，其中，1～4号表示蒸馏水洗脱液；5～8号表示30％乙醇洗脱液；9～12号表示50％乙醇洗脱液；13～16号表示70％乙醇洗脱液；17～20号表示90％乙醇洗脱液。图9为斯皮诺素(a1)、30％洗脱样品(a2)和70％洗脱样品(a3)的色谱图。图10为远志皂苷元(b1)、30％洗脱样品(b2)和70％选择题样品(b3)的色谱图。图11为斯皮诺素的标准曲线。图12为远志皂苷元的标准曲线。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1、酸枣仁-远志提取液的制备1、总黄酮、总皂苷含量测定方法的建立1.1供试品的制备粉碎药材→混匀(酸枣仁、远志质量比为2:1)→石油醚脱脂→脱脂药材粉末→热回流提取法→过滤→测定总黄酮、总皂苷得率。注：总皂苷为提取液中酸枣仁皂苷与远志皂苷质量之和。1.2线性关系考察总黄酮标准曲线：以斯皮诺素为标准品，甲醇为溶剂，斯皮诺素浓度C(mg/mL)与吸光度A的回归方程A＝44.533C+0.0081，r＝0.9998，在5～17μg/mL线性关系良好。总皂苷标准曲线：以酸枣仁皂苷A、远志皂苷元为标准品，采用香草醛-高氯酸显色法，酸枣仁皂苷A质量C1(mg)与吸光度A1回归方程为A1＝1.9C1+0.0357，r＝0.9983，在0.1～0.4mg线性关系良好；远志皂苷元质量C2(mg)与吸光度A2回归方程为A2＝14.04C2-0.1397，r＝0.9962，在0.0200～0.0702mg线性关系良好。1.3精密度、重复性和稳定性试验取酸枣仁皂苷A对照品溶液，连续测定6次，计算RSD为0.0632％，仪器精密度良好。对于同一批药材，按照1.1项下供试品溶液的制备方法平行制备6份，分别测定总黄酮、酸枣仁皂苷和远志皂苷的含量，RSD分别为0.0240％、0.607％和0.0895％，重复性良好。精密取供试品，分别在0、2、4、6、8、12h下测得总黄酮、酸枣仁皂苷和远志皂苷的浓度或质量，RSD分别为0、0.319％和0.0850％，稳定性良好。1.4加样回收试验称取药材6份，精密加入适量的对照品斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和远志皂苷元，热回流提取，计算RSD。结果如表1、表2和表3所示。表1总黄酮加样回收试验表2酸枣仁皂苷加样回收试验表3远志皂苷加样回收试验2、单因素试验设计与结果分析2.1乙醇浓度对总黄酮和总皂苷得率影响在提取温度80℃，时间60min，液固比10mL/g时，研究乙醇浓度(体积)：50％、60％、70％、80％、90％对总黄酮和总皂苷得率影响。结果如图1可知随着乙醇浓度升高总皂苷得率增加，70％时达到最大值。而乙醇浓度60％与70％时，黄酮得率基本相同，其他趋势与总皂苷相同。确定适宜乙醇浓度为70％。2.2液固比对总黄酮和总皂苷得率影响在乙醇浓度70％，提取时间60min，提取温度80℃时，研究液固比：6mL/g、8mL/g、10mL/g、12mL/g本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酸枣仁‑远志提取物的制备方法，包括如下步骤：

【技术特征摘要】
1.一种酸枣仁-远志提取物的制备方法，包括如下步骤：将酸枣仁和远志粉碎后混合，经脱脂后利用乙醇水溶液进行提取，经过滤得到提取液；所述提取液经分离纯化即得所述酸枣仁-远志粗提取物。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述酸枣仁与所述远志的质量比为1～2：1～2；所述提取的条件如下：所述乙醇水溶液的体积浓度为65％；温度为70℃；时间为60min；液固比为10mL/g。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于：采用大孔吸附树脂分离纯化所述提取液；所述分离纯化的条件如下：依次采用蒸馏水、体积浓度为30％的乙醇水溶液、体积浓度为50％的乙醇水溶液和体积浓度为70％的乙醇水溶液进行洗脱，洗脱体积分别为...

【专利技术属性】
技术研发人员：王颖莉，孙胜杰，毋桂花，王艳，
申请(专利权)人：山西中医药大学，
类型：发明
国别省市：山西,14