一种在水产养殖中改善水质的益生菌制剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种在水产养殖中改善水质的益生菌制剂及其制备方法，属于属于水产养殖改善水质同时给水产动物提供益生菌技术领域。具体是将谷物固体原料与水混合，作为发酵原料；采用植物乳杆菌TK9、动物双歧杆菌937、副干酪乳杆菌TK1501、青春双歧杆菌TK99、凝结芽孢杆菌TQ33和枯草芽孢杆菌TK‑1进行混菌分段液态发酵或固态发酵后制备得到。所述益生菌制剂不仅可以显著改善水质，而且该益生菌可合成养殖业中水生动物所需的多种维生素，有助于增加机体营养吸收，增强机体消化吸收饲料的能力，可满足农业、养殖业对于水质的多功能需求。

Probiotic preparation for improving water quality in aquaculture and preparation method thereof

The invention provides a probiotic preparation and a preparation method for improving water quality in aquaculture, belonging to the field of improving the water quality of aquaculture and providing a probiotic technology for aquatic animals. The solid raw material was mixed with water as a fermentation material, and was prepared by liquid fermentation or solid state fermentation by Lactobacillus plantarum TK9, Bifidobacterium 937, Lactobacillus subtilis TK1501, Bifidobacterium TK99, Bacillus coagulant TQ33 and Bacillus subtilis TK 1. The probiotics not only can significantly improve the water quality, but the probiotics can synthesize various vitamins needed by aquatic animals in the breeding industry, which can help to increase the body's nutrient absorption, enhance the body's ability to digest and absorb feed, and can meet the multi-functional requirements of the agriculture and the aquaculture industry.

【技术实现步骤摘要】
一种在水产养殖中改善水质的益生菌制剂及其制备方法
本专利技术属于水产养殖改善水质同时给水产动物提供益生菌
，特别涉及一种在水产养殖中改善水质的益生菌制剂及其制备方法。背景研究随着人们生活水平的提高，饮食的丰富性越来越受到人们的重视。水产品的供应量较以往也有了大幅度的提高。水产养殖，已经受到越来越多的关注，在养殖过程中，pH值、硝酸盐的含量、多余的饵料以及粪便等在池底淤积，藻类增多，溶解氧减少，其分解造成水体N、P等含量的增加等等一系列的问题，将会使水体严重恶化，破坏了池塘生态系统，造成水产养殖中水质稳定性较差，对水产养殖产业具有重要的影响。日本的Kozasa首次将东阳芽孢杆菌应用于水产养殖以来，其在改善水质，生态防治技术，抑制致病菌，增强养殖动物机体自身抵抗力等方面得到了充分的研究开发。益生菌混合发酵制成的益生菌制剂在降解水体有机物、将低pH、减少亚硝酸盐含量等方面的优势显著。对水产中的弧菌、大肠杆菌等有害微生物有很强的抑制作用，并能分解池中残饵、粪便、有机物等，能够改善蓝藻泛溢造成的水质浑浊问题，水质由浑变清，具有很强的净化水质作用。利用益生菌生产各类产品已成为当今研究的热点，广为人民喜爱和接受，益生菌正是健康养殖的重要技术支柱。目前公开的专利内容，主要为以下这些：申请号为201310374472.9的专利技术专利公开了“一种用于改进池塘水质的复合微生态制剂”，其特征在于：将冷冻保藏管中的沼泽红假单胞菌、硝化菌、乳酸杆菌、及酿酒酵母分别在斜面中活化，之后纯化得各斜面菌种，备用；利用各斜面菌种制备相应的原菌液；将各原菌液按2：2：1：1的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养，得复合微生态菌剂的一级种子；将一级种子按5％的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ中培养得复合微生态菌剂的二级种子；最后将二级种子按5％的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ培养以获得复合微生态菌剂的成品。采用本专利技术复合微生态制剂既能够提高水体中的溶氧量，又能降低水体中的COD，从而起到改善、优化池塘水质的作用。申请号为201710673708.7的专利技术专利公开了“一种用于养殖池塘水质改良的复合藻类菌剂及其制备方法”，其原料由以下重量份数的组分组成：蛋白核小球藻藻液15-25份、羊角月牙藻藻液30-50份、四尾栅藻藻液15-25份、光合细菌发酵菌液5-15份、浮游球衣菌发酵菌液10-20份、脱氮硫杆菌发酵菌液10-20份、纳豆芽孢杆菌发酵菌液5-15份、酵母菌发酵菌液5-15份、腐殖酸钠1-2份。此外，本专利技术还提供了一种用于养殖池塘水质改良的复合藻类菌剂的制备方法。本专利技术的复合藻类菌剂施入水体后，利用微生物的新陈代谢活动，对水中有机污染物进行转移、转化及降解，降低水中污染物浓度，且能协同增效，分解水中氨氮、亚硝酸、硫化氢等有害物质，改善养殖池塘水体环境。申请号为201710770495.X的专利技术专利公开了“一种水质调节剂”，其特征在于原料按重量份包括：微生物菌剂20-25份，荷叶粉10-15份，吸附剂40-50份，磷酸二氢钠10-15份，过碳酸钠6-8份；其中，吸附剂的原料包括：沸石粉、改性蒙脱土、电气石陶粒。本专利技术通过各物质相互配合，从吸附絮凝、增加水体含氧量、分解毒性物质、改善水体微生物群落、调节水体pH多个方面作用共同调节水质，且不会产生二次毒性物质和二次污染，娃娃鱼生长提供合适的水质环境。针对上述专利技术，其公开的
技术实现思路
仅仅是对于水体中污染物的降解和转化，其功能性较为单一，不能同时提供对水产动物有益的活性益生菌，鲜有其他功能性的公开。无法满足农业生产用水、特别是对于养殖业用水更多功能性的需求。
技术实现思路
本专利技术属于水产养殖改善水质
，目的在于利用益生菌混菌分段发酵工艺对麸皮粉、豆粕粉、玉米粉、米糠进行发酵获得一种改善水质、可满足农业、养殖业对于水质多功能需求的益生菌制剂。通过益生菌发酵等生产改善水质的益生菌制剂，不仅能够有效的降低水产养殖水中的pH、减少亚硝酸盐含量、降解水体有机物作用；而且此益生菌进入水体动物肠道后，在肠道上能迅速复活并分泌活性很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶，能够参与水生动物机体的新陈代谢。益生菌可合成水生动物所需的多种维生素，有助于增加营养吸收，增强消化吸收饲料的能力。为了实现上述目的，本专利技术提供一种改善水质的益生菌制剂，是将谷物副产物固体原料与水混合，作为发酵培养基；采用植物乳杆菌、动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、青春双歧杆菌、凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌多种菌株进行混菌分段液态或固态发酵后制备而得；进一步地，所述液态发酵培养基组成为环每1000ml水中加入100g谷物副产物固体原料，所述谷物副产物固体原料的重量份数组成为：豆粕粉25-70份、玉米粉5-15份、麸皮粉5-65份、米糠5-35份，pH自然；进一步地，所述固态发酵培养基的组成为：谷物副产物固体原料与水的重量比为1：0.5-1.0，所述谷物副产物固体原料的重量份数组成为：豆粕粉25-70份、玉米粉5-15份、麸皮粉5-65份、米糠5-35份。优选地，所述谷物副产物固体原料的重量份数组成为：豆粕粉65-70份、玉米粉5-15份、麸皮粉5-10份、米糠5-15份；本专利技术提供一种改善水质的益生菌制剂的液态发酵的制备方法，具体步骤如下：(1)配制活化培养基：按照重量份数加入麸皮粉1-5份、豆粕粉1-4份、玉米粉0.5-1.5份，按照固体料与水重量比1-3：40-60，混合，灭菌；(2)配制液态发酵培养基：按照上述液态发酵培养基的原料组成份数配置；(3)菌种活化：将凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌、动物双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、青春双歧杆菌、副干酪乳杆菌分别接种于活化培养基，培养19-20h后，再次转接入活化培养基进行二次活化，活化时间22-24h后得二级种子液；(4)益生菌发酵：将凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌二级种子液接入液态发酵罐中，通气有氧发酵20-26h；然后将植物乳杆菌、动物双歧杆菌、青春双歧杆菌、副干酪乳杆菌接入液态发酵罐中，接入后混菌厌氧发酵24-48h；(5)将所得的发酵液直接进行包装，或经过浓缩、喷雾干燥为粉剂。优选的，所述液态发酵步骤(3)中，凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌液态发酵时间为24h，接入植物乳杆菌、动物双歧杆菌、青春双歧杆菌、副干酪乳杆菌混菌厌氧液态发酵时间为48h；进一步地，一种改善水质的益生菌制剂的液态发酵的制备方法，具体步骤如下：(1)配制活化培养基：将麸皮粉、玉米粉、豆粕粉、米糠作为固体料分别磨粉过100目筛；按照重量份数加入麸皮粉3份、豆粕粉2份、玉米粉1份，按照固体料与水重量比3：50，混合，121℃，20min灭菌；(2)配制液态发酵培养基：每1000mL水中添加100g按比例混合均匀的麸皮粉，玉米粉，豆粕粉、米糠，pH自然；(3)菌种活化：将凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌从甘油管出发，按接种量1％(体积百分比)分别接入活化培养基进行活化，活化培养基装液量为20％(体积百分比)，pH自然，培养温度为36-38℃，220r/min，培养19-20h后，按10％(体积百分比)的接种量再次转接入活化培养基进行二次活化，活化时间22-24h后得二级种子液；将植物乳杆菌、动物双歧杆菌、青春双歧杆菌、副干酪乳杆菌从甘油管出发，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种改善水质的益生菌制剂，所述益生菌制剂是以谷物副产物固体原料和水为液态发酵培养基或固态发酵培养基，采用植物乳杆菌、动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、青春双歧杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌经液态或固态混菌发酵后制备而得；其特征在于，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)TK9，保藏编号为CGMCC No.11891；所述动物双歧杆菌为动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)937，保藏编号为CGMCC No.11892，所述副干酪乳杆菌为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)TK1501，保藏编号为CGMCC No.13130，青春双歧杆菌为青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)TK99，保藏编号为CGMCC No.12784，凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)TQ33，保藏编号为CGMCC No.5233，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TK‑1，保藏编号为CGMCC No.4731。

【技术特征摘要】
1.一种改善水质的益生菌制剂，所述益生菌制剂是以谷物副产物固体原料和水为液态发酵培养基或固态发酵培养基，采用植物乳杆菌、动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、青春双歧杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌经液态或固态混菌发酵后制备而得；其特征在于，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)TK9，保藏编号为CGMCCNo.11891；所述动物双歧杆菌为动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)937，保藏编号为CGMCCNo.11892，所述副干酪乳杆菌为副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)TK1501，保藏编号为CGMCCNo.13130，青春双歧杆菌为青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)TK99，保藏编号为CGMCCNo.12784，凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)TQ33，保藏编号为CGMCCNo.5233，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)TK-1，保藏编号为CGMCCNo.4731。2.如权利要求1所述的一种改善水质的益生菌制剂，其特征在于：所述液态发酵培养基组成为每1000ml水中加入100g谷物副产物固体原料，所述谷物副产物固体原料的重量份数组成为：豆粕粉25-70份、玉米粉5-15份、麸皮粉5-65份、米糠5-35份，pH自然。3.如权利要求1所述的一种改善水质的益生菌制剂，其特征在于：所述固态发酵培养基的组成为：谷物副产物固体原料与水的重量比为1：0.5-1.0，所述谷物副产物固体原料的重量份数组成为：豆粕粉25-70份、玉米粉5-15份、麸皮粉5-65份、米糠5-35份。4.如权利要求1、2或3所述的一种改善水质的益生菌制剂，其特征在于：所述谷物副产物的固体原料的重量份数组成为：豆粕粉65-70份、玉米粉5-15份、麸皮粉5-10份、米糠5-15份。5.如权利要求1或2所述的一种改善水质的益生菌制剂，其特征在于：所述益生菌制剂的液态发酵的制备方法，具体步骤如下：(1)配制活化培养基：按照重量份数加入麸皮粉1-5份、豆粕粉1-4份、玉米粉0.5-1.5份，按照固体料与水重量比1-3：40-60，混合，灭菌；(2)配制液态发酵培养基：按照上述液态发酵培养基的原料组成份数配置；(3)菌种活化：将凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌、动物双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、青春双歧杆菌、副干酪乳杆菌分别接种于活化培养基，培养19-20h后，再次转接入活化培养基进行二次活化，活化时间22-24h后得二级种子液；(4)益生菌发酵：将凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌二级种子液接入液态发酵罐中，通气有氧发酵20-26h；然后将植物乳杆菌、动物双歧杆菌、青春双歧杆菌、副干酪乳杆菌接入液态发酵罐中，接入后混菌厌氧发酵24-48h；(5)将所得的发酵液直接进行包装，或经过浓缩、喷雾干燥为粉剂。6.如权利要求1或2所述的一种改善水质的益生菌制剂，其特征在于：所述益生菌制剂的液态发酵的制备方法，具体步骤如下：(1)配制活化培养基：将麸皮粉、玉米粉、豆粕粉、米糠作为固体料分别磨粉过100目筛；按照重量份数加入麸皮粉3份、豆粕粉2份、玉米粉1份，按照固体料与水重量比3：50，混合，121℃，20min灭菌；(2)配制液态发酵培养基：每1000mL水中添加100g按比例混合均匀的麸皮粉，玉米粉，豆粕粉、米糠，pH自然；(3)菌种活化：将凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌从甘油管出发，按接种量1％分别接入活化培养基进行活化，活化培养基装液量为20％，pH自然，培养温度为36-38℃，220r/min，培养19-20h后，按10％的接种量再次转接入活化培养基进行二次活化，活化时间22-24h后得二级种子液；将植物乳杆菌、动物双歧杆菌、青春双歧杆菌、副干酪乳杆菌从甘油管出发，按接种量1％分别接入活化培养基进行厌氧活化，活化培养基装液量为20％，pH自然，培养温度为36-38℃，培养19-20h后，按10％的接种量再次转接入活化培养基进...

【专利技术属性】
技术研发人员：王海宽，兰天璐，王伟，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津,12