一种提高蛋白表达效率的启动子制造技术

本发明专利技术公开了一种提高蛋白表达效率的启动子，属于启动子工程领域。本发明专利技术所述方法中涉及的启动子PBH4是在启动子PsrfA的基础上对其核心区进行突变改造而形成的。在新启动子PBH4控制转录下，表达绿色荧光蛋白(GFP)时，使用PBH4的表达量是使用PsrfA的3.5倍，表达葡糖醛酸酶A(GusA)时，使用PBH4使酶活从0.6U/ml提高至8.9±0.1U/ml。

A promoter to improve protein expression efficiency

The invention discloses a promoter for improving protein expression efficiency, which belongs to the field of promoter engineering. The promoter PBH4 involved in the method is formed by mutation and transformation of the core area on the basis of the promoter PsrfA. When the new promoter PBH4 was transcribed, the expression of green fluorescent protein (GFP) was expressed by PBH4 3.5 times as much as PsrfA, and when the glucuronoate A (GusA) was expressed, the enzyme activity was increased from 0.6U/ml to 8.9 + 0.1U/ml by using PBH4.

【技术实现步骤摘要】
一种提高蛋白表达效率的启动子
本专利技术涉及一种提高蛋白表达效率的启动子，属于启动子工程领域。
技术介绍
枯草芽孢杆菌表达系统被认为是GRAS级的有机体，可将功能性蛋白分泌到培养基中，分离纯化工艺简单，目前被广泛用作异源蛋白表达的宿主菌。枯草芽孢杆菌应用的最为广泛的宿主菌是枯草168菌株以及枯草168系列的突变株(如WB600，WB700，WB800等)，本专利技术中选择使用的宿主菌是Bacillussubtilis168。基因表达体系是一个复杂的过程，目前枯草表达系统还不是很成熟。近年来，科研工作者在枯草芽孢杆菌分泌表达外源蛋白方面取得很大的进展，已建立一个有效的外源蛋白枯草表达系统。而在载体系统的改造过程中，启动子调控元件起着重中之重的作用，选用强启动子可以使克隆基因高水平表达。因此，从启动子出发，设计强启动子元件，构建成熟高效的枯草表达系统，无论是在理论研究还是实际生产中都有十分重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种突变型枯草芽孢杆菌启动子以及利用该启动子在枯草芽孢杆菌168中高效表达外源蛋白的方法。鉴于启动子是基因工程表达载体的重要元件，对外源基因表达水平有较大的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种启动子，其特征在于，含有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种启动子，其特征在于，含有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。2.含有权利要求1所述启动子的载体。3.一种基因工程菌，其特征在于，权利要求2所述的载体表达蛋白。4.根据权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，所述蛋白包括酶。5.权利要求3所述基因工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)以权利要求1所述的启动子与载体连接或替换载体本身具有的启动子，得到含有新启动子的质粒新启动子；(2)将质粒新启动子与外源基因连接，得到含有新启动子的质粒新启动子-外源基因；(3)将质粒新启动子-外源基因转化到细菌或真菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：周哲敏，韩来闯，崔文璟，周丽，刘中美，郭军玲，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32