The invention discloses a method for detecting drug effects on cell proliferation, the measured cell and cell specific antibody beads mixed fluorescent dye labeled by CFSE, with or without drugs to be tested respectively, can obtain the control cells and treated cells, according to the total number of proliferating cells in each division generation count and cell specific antibody beads count ratio, adding cell specific antibody beads, calculate the proliferation of cells in each division in primary cells. The method of using cell specific antibody beads can be detected cell proliferation stimulating agents can also play a role, flow cytometry counts reference beads; can affect the detection of chemical drugs or drug treated cells for cell proliferation; not only can reflect the change of increasing percentage of proliferating cells, but also can change the proliferation of cells in each generation reflects the division of cell number, which can be more fully and accurately reflect the effects of drugs to treat the measured cell proliferation.
【技术实现步骤摘要】
检测药物对细胞增殖影响的方法
本专利技术涉及细胞增殖检测领域,尤其是涉及一种检测药物对细胞增殖影响的方法。
技术介绍
细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物以细胞分裂的方式产生新的细胞,以用来补充体内衰老和死亡的细胞。在很多药物研发过程中都需要评估其对细胞增殖的影响。因此,细胞增殖检测技术广泛应用于分子生物学、遗传学、肿瘤生物学、免疫学、药理和药代动力学等研究领域。如鉴于T淋巴细胞在免疫系统中的重要作用,免疫疾病相关医药研发过程中通常都需要检测药物对T淋巴细胞增殖功能的影响,常用的试验方法包括:分离PBMC细胞,使用刺激剂刺激细胞增殖,加入待测药物培养三到五天后,采用荧光标记、胸腺嘧啶核苷渗入或参比磁珠等方法检测细胞增殖状况。然而,传统的研究药物等对细胞增殖影响的方法难以全面反映增殖细胞百分比的变化以及具体数量,因而无法准确地反映出物质对细胞增殖的影响。
技术实现思路
基于此,有必要提供一种检测药物对细胞增殖影响的方法,以全面反映物质对细胞增殖情况的影响。一种检测药物对细胞增殖影响的方法,包括如下步 ...
【技术保护点】
一种检测药物对细胞增殖影响的方法,其特征在于,包括如下步骤:对照组:将第一待测细胞使用CFSE荧光染料标记之后,按照预设的细胞数量在培养容器中与预设数量的细胞特异性抗体磁珠混合,经过培养后,检测分析得到其CFSE荧光信号降低的增殖细胞各分裂代次计数和细胞特异性抗体磁珠计数,根据该增殖细胞各分裂代次计数和细胞特异性抗体磁珠计数的比例以及加入的细胞特异性抗体磁珠的总数,计算得出对照组的所述第一待测细胞的各分裂代次的绝对数量;加药组:将与所述第一待测细胞来源相同的第二待测细胞使用CFSE荧光染料标记之后,按照预设的细胞数量在培养容器中与预设数量的细胞特异性抗体磁珠以及预设含量的待 ...
【技术特征摘要】
1.一种检测药物对细胞增殖影响的方法,其特征在于,包括如下步骤:对照组:将第一待测细胞使用CFSE荧光染料标记之后,按照预设的细胞数量在培养容器中与预设数量的细胞特异性抗体磁珠混合,经过培养后,检测分析得到其CFSE荧光信号降低的增殖细胞各分裂代次计数和细胞特异性抗体磁珠计数,根据该增殖细胞各分裂代次计数和细胞特异性抗体磁珠计数的比例以及加入的细胞特异性抗体磁珠的总数,计算得出对照组的所述第一待测细胞的各分裂代次的绝对数量;加药组:将与所述第一待测细胞来源相同的第二待测细胞使用CFSE荧光染料标记之后,按照预设的细胞数量在培养容器中与预设数量的细胞特异性抗体磁珠以及预设含量的待测药物混合,经过培养后,检测分析得到其CFSE荧光信号降低的增殖细胞各分裂代次计数和细胞特异性抗体磁珠计数,根据该增殖细胞各分裂代次计数和细胞特异性抗体磁珠计数的比例以及加入的细胞特异性抗体磁珠的总数,计算得出加药组的所述第二待测细胞的各分裂代次的绝对数量;比较所述对照组的所述第一待测细胞与所述加药组的所述第二待测细胞的各分裂代次的绝对数量,分析所述待测药物对待测细胞增殖的影响。2.如权利要求1所述的检测药物对细胞增殖影响的方法,其特征在于,所述第一待测细胞及所述第二待测细胞均为外周血单个核细胞。3.如权利要求2所述的检测药物对细胞增殖影响的方法,其特征在于,所述第一待测细胞及所述第二待测细胞均为T淋巴细胞,所述细胞特异性抗体磁珠是CD3/CD28抗体磁珠。4.如权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:施念,吴海涛,沈政,吴灵,聂惠蓉,
申请(专利权)人:北昊干细胞与再生医学研究院有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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