一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母及其应用制造技术

一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母及其应用，所述命名为罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)RS‑B的菌株已于2016年11月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏，保藏编号为：CGMCC NO.13336。所述罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)RS‑B用于促进植物发芽、防治白粉病和霜霉病。本发明专利技术的罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)RS‑B的菌落成乳白色，表面光滑。在常温下及常规培养基上生长良好。其既可促进植物生长，又可用于烟草白粉病致病菌和蔷薇霜霉病致病菌的防治。

A strain of both plant growth and disease resistance of c.laurentii and its application

【技术实现步骤摘要】
一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母及其应用
本专利技术涉及微生物
，特别是既可促进植物发芽生长又可提高植物抗病能力的罗伦隐球酵母及其应用

技术介绍
高产、优质、高效是农业发展的方向，这一进程中，化肥、农药等农业生产资料的大量使用不可避免。但化肥和农药的大量使用会造成环境污染和食品安全问题。然而，生物肥料和生物农药因具有效果显著，环境友好等优点；不仅是目前科学研究工作的重点和热点之一，更为农业的持续发展的提供方法。生物肥料和生物农药通常选用植物促生菌及其代谢产物作为素材。这些有益于植物生长和抗病的微生物及其代谢产物具有多重作用机制，如分泌植物促生长的物质，生态位竞争，激发宿主植物自身防御系统等。这些作用机制能促进植物对营养元素的吸收利用，提高植物抗病虫害能力，减少化肥和农药的使用量；且对人畜相对安全，环境兼容性好，不易产生抗药性。此外，一些植物促生菌还能改善土壤结构，净化土壤中残留的农药、污染物、重金属。这为植物促生菌在农业中的应用奠定良好的理论基础，并且生物肥料和生物农药在农资市场中呈现出蓬勃发展的景象。例如将根瘤菌接种于豆科植物的技术措施，对世界范围内农作物产量产生了重大影响。有文献报道，玉米、小麦施用含有固氮螺菌(Azospiril-lum)的生物肥料，较单施化学肥料的处理产量提高了5％-30％。此外，生防菌在植物病虫害防治方面也取得了巨大的商业成功。农用枯草芽孢杆菌，对水稻稻瘟病，黄瓜、草莓、番茄等多种作物的白粉病、灰霉病，马铃薯晚疫病；大豆、油菜菌核病，及谷物、三七根腐病等多种真菌性病害具有优良防效。在虫害防治方面，苏云金杆菌是世界上用量最大的微生物杀虫剂，它产生内毒素和外毒素，对防治鳞翅目、直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目害虫效果显著，广泛应用于十字花科蔬菜、茄果类蔬菜、瓜类蔬菜、烟草、水稻、高粱、茶树等多种作物的虫害防治。综上所述，采用植物根际促生菌及其代谢产物促进植物生长，防治病虫害是一种可促进农业持续发展的方法。罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)属于植物根际促生菌,具有遗传稳定，抑菌普广，效价高，安全性高等优点。是目前国内外广泛研究的生物防治酵母菌株，主要用于防治采后果蔬由指状青霉(Penicilliumdigitatum)、扩展青霉(Penicilliumexpansum)、核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)、炭疽菌(Colletotrichumacutatum)、交链孢霉(Alernariaalternata)、胶孢刺盘孢(Colletotrichumgloeosporioides)等浸染的病害。但是对于罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)促进植物生长及防治植物白粉病、霜霉病未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是筛选一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母并进行实际应用，为植物提供一种绿色种植和防病方法。本专利技术的目的通过如下技术方案实现：一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母，所述命名为罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B的菌株已于2016年11月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏，保藏编号为：CGMCCNO.13336，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本专利技术所述罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B用于促进植物发芽。所述植物为茄科植物或石竹科植物或蔷薇科植物。本专利技术所述罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B用于防治白粉病和霜霉病。所述白粉病为浸染烟草的二孢白粉菌(ErysiphecichoracearumDC)，所述霜霉病为浸染蔷薇科植物的蔷薇霜霉菌(PeronosporasparsaBerk.)。本专利技术的罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B的菌落成乳白色，表面光滑。在常温下及常规培养基上生长良好。其既可促进植物生长，又可用于烟草白粉病致病菌和蔷薇霜霉病致病菌的防治。附图说明图1为本专利技术所述的罗伦隐球酵母RS-B在MEA培养基上的菌落特征；图2为本专利技术所述的罗伦隐球酵母RS-B的电镜扫描照片；图3为罗伦隐球酵母RS-B16SrDNA序列；图4为罗伦隐球酵母RS-B烟草白粉病病级-时间变化图；图5为本专利技术所述的罗伦隐球酵母RS-B对月季霜霉病病级-时间变化图；图6为本专利技术所述的罗伦隐球酵母RS-B促进月季发芽增长率变化柱形图。具体实施方式本专利技术采用分离自云南省昆明市石林县植烟区土壤的一株罗伦隐球酵母作为发酵菌株，进行烟草白粉病防效测定，月季霜霉病致病菌防效测定，月季促发芽试验。通过液体发酵，实验室盆栽方式评价罗伦隐球酵母RS-B对烟草白粉病，月季霜霉病的防效，及促进月季发芽的效果。本专利技术的命名为罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B已经保藏，保藏单位是中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期是2016年11月24日，保藏号是：CGMCCNo.13336。1、罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B的菌学特征：罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B在MEA培养基培养7天，菌落平伏，白色奶油状，质地粘稠，表面反光。电镜下，细胞近球形或椭圆形，细胞大小20μm。如图1所示。2、罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B的制备：将保存于斜面上的罗伦隐球酵母RS-B于无菌条件下接种于高压灭菌(121℃，130kPa,20min)的固体培养基上(1L的培养基配方为：蛋白胨10g，牛肉粉3g，氯化钠5g，七水合硫酸镁0.5g，磷酸二氢钾1g。固体培养基需加入18g琼脂)，于培养箱中30℃活化培养2～3天。将活化好的菌种于无菌条件下接种于50mL高压灭菌的上述液体培养基中。30℃下，摇床培养2～3天。摇床转速200rpm。取1mL种子液于无菌条件下接种于200mL高压灭菌的上述液体培养基中，摇床培养24～36h，转速200rpm，至对数生长期(OD660：0.88)，将菌悬液在室温下，4000rpm离心10min，分离上清液和菌体。罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B的电镜扫描照片如图2所示。将上清液和重悬于等体积无菌水中的菌体用于烟草白粉病生测实验。3、罗伦隐球酵母RS-B对烟草白粉的生测实验：称取1Kg土壤置于内径15cm，高10cm的盆钵中，移栽大棚中生长55～60天的K326烟苗，同时表施烟草专用复合肥(N-P-K:12-10-24)4g/盆，置于人工气候箱内。培养条件为：光照时间12h，强度8000lux，温度：白天28±2℃，夜晚22±2℃。移栽7天后用采自大田的白粉病病叶接种盆栽烟苗。在成功接种白粉病的实验烟上分别叶施等量清水(CK)、0.04％化学诱导剂3-丙酮基-3-羟基吲哚的水分散粒剂水溶液(AS)(具有较强的白粉菌的抑制作用)、RS-B发酵上清液(BF)，重悬于无菌水中的RS-B菌体(BS)，在4天，8天，12天和20天后调查白粉病的发病情况，统计烟株病级(调查及计算方法参见GBT232本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母，其特征在于，所述命名为罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)RS‑B的菌株已于2016年11月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏，保藏编号为：CGMCC NO.13336。

【技术特征摘要】
1.一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母，其特征在于，所述命名为罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B的菌株已于2016年11月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏，保藏编号为：CGMCCNO.13336。2.权利要求1所述的一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母的应用，其特征在于，所述罗伦隐球酵母(Cryptococcuslaurentii)RS-B用于促进植物发芽。3.如权利要求2所述的一株兼具植物促生长和抗病性的罗伦隐球酵母...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕春华，林鑫，谢冰，王岚，吴景强，刘维涓，邵兵，
申请(专利权)人：云南天禾地生物科技股份有限公司，云南瑞升烟草技术集团有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53