检测或定量测定线粒体DNA3243变异的方法及其试剂盒技术

一种使用定量测定ＰＣＲ检测具有线粒体ＤＮＡ３２４３变异的ＤＮＡ的方法，所述ＰＣＲ使用具有与从ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１碱基序列中第２４３位碱基开始并且长１２到３０个碱基的碱基序列互补的碱基序列的引物。此外，提供了一种检测具有线粒体ＤＮＡ　　３２４３变异的ＤＮＡ的方法，其中使用末端用荧光染料标记的核酸探针，其中杂交后荧光染料的荧光减少，所述核酸探针具有与从ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２碱基序列中第２３０位碱基开始并且长１４到４０个碱基的碱基序列互补的碱基序列，且所述核酸探针的３’端用荧光染料标记。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及检测和定量线粒体DNA 3243突变的方法及其试剂盒。
技术介绍
线粒体DNA第3243位上A→G突变(mt3243)是一种在1％日本糖尿病患者中存在的突变，并且在由单基因异常引起的糖尿病状况中发生频率最高。线粒体基因异常地特征之一是正常和异常线粒体DNAs以各种比例共存，这种状态称作异胞质基因。mt3243突变异胞质基因的比率据说与病理学状况的进展程度有关，并且认为其可用于测定病理学状况的进展程度或治疗效果。如果存在mt3243突变，那么在突变的位置上出现限制性内切酶的识别位点。因此，可由通过PCR扩增DNA以便扩增包括突变位置的部分、用限制性内切酶消化扩增产物以及通过电泳测定DNA是否已经被消化的方法(PCR-RFLP)检测突变(例如，参考The JapaneseJournal of Clinical Pathology，vol.44，8，pp.778-782，1996)。由于PCR将几个分子的模板扩增几十亿次，因此甚至痕量的污染物都可能导致假阳性或假阴性结果。在PCR-RFLP中，需要收集扩增产物并将其在PCR后用限制性内切酶进行处理，因而扩增产物可能污染随后的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测具有线粒体ＤＮＡ３２４３突变的ＤＮＡ的方法，其包括使用从样品中获得的ＤＮＡ作为模板进行ＰＣＲ以及检测扩增产物，其中用于ＰＣＲ的引物包括具有与从ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１核苷酸序列中第２４３位核苷酸开始并且长１２到３０个核苷酸的核苷酸序列互补的核苷酸序列的引物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：平井光春，
申请(专利权)人：爱科来株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]