一种大叶蒟提取物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种大叶蒟提取物及其制备方法与应用，大叶蒟提取物包括芝麻素、(2E,6E)‑N‑异丁基‑7‑（3，4‑次甲二氧苯基）七碳二烯酰胺、(2E,4E)‑N‑异丁基十二碳‑2，4‑二烯酰胺、(2E,4E)‑N‑异丁基‑15‑苯基‑2，4‑二烯酰胺、(2E,4E,14Z) ‑N‑异丁基二十烷‑2,4,14‑三烯酰胺、(2E,4E)‑N‑异丁基‑13‑苯基‑2，4‑二烯酰胺中的任意一种或一种以上的组合。本发明专利技术通过对制备方法的改进得到大叶蒟提取物，并对该提取物的化学成分进行分离和鉴定，明确了提取物中包含的化合物，另外本发明专利技术的制备方法所得到的大叶蒟提取物的抗抑郁效果明显且安全性好。

A piper laetispicum extract and preparation method and application thereof

【技术实现步骤摘要】
一种大叶蒟提取物及其制备方法与应用
本专利技术属于医疗领域，特别是涉及一种大叶蒟提取物及其制备方法与应用。
技术介绍
大叶蒟PiperlaetispicumC.DC，为胡椒科胡椒属植物，主要分布在我国广东、广西、云南及海南省。民间用于活血、消肿、止痛，主治跌打损伤、淤血肿痛。抑郁症目前已成为妨碍人类健康的最主要疾病之一，全世界大概12％～25％的人在一生中会面临抑郁问题。作为一种全球常见病，目前估计有约3.5亿名患者在忍受抑郁症的痛苦，年龄层分布也从覆盖所有年龄段进入低龄化趋势。申请人经过多年系统研究，动物实验及临床实验发现大叶蒟有关提取物具有显著的抗抑郁活性，以及一定的抗焦虑、镇痛、镇静等生物活性，并且已经申请了两项与大叶蒟相关的中国专利技术专利及多项国际专利。目前对大叶蒟的研究主要有如下专利：ZL03115911.7大叶蒟有效部位的制备及其在医疗、保健领域的应用，ZL200410084791.7制备大叶蒟提取物的方法、提取物及其应用,ZL201010556017.7大叶蒟有效组分的制备方法,ZL201010169679.95’-甲氧基-3’，4’-次甲二氧基桂皮酸异丁基酰胺在制备抗抑郁药物中的应用，201010296974.0大叶蒟提取物的制备方法、提取物及其应用，ZL201110123076.X一种酰胺类化合物及其制备方法和应用。本领域技术人员都明白，对于天然药物有效部位提取物的制备工艺，使用的药材部位、制备工艺参数不同，所得到的提取物物质基础就不相同。例如：(一)、ZL201010169679.9通过如下制备方法制得的是5’-甲氧基-3’，4’-次甲二氧基桂皮酸异丁基酰胺，其公开的制备方法为：步骤一：取药材胡椒属植物大叶蒟或华南胡椒的地上部分，粗粉碎，置于提取罐中，加入10～15倍重量的70％～95％的乙醇，回流提取2小时，滤过，10～15倍重量的70％～95％的乙醇，回流提取2小时，滤过，合并两次滤液，65℃减压浓缩成RD1.3-1.35的浸膏；步骤二：浸膏用30％～60％的乙醇溶解，加入D101大孔吸附树脂的色谱柱中，用30％～60％的乙醇洗脱，洗脱液弃去，换用70％～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，得到提取物；步骤三：提取物经拌样，加入填装有硅胶的色谱柱中，分别用体积比为5：1和3：1石油醚-乙酸乙酯洗脱2次，薄层法检测，合并3：1体系下样品量最大的单点成分，回收溶剂，浓缩至无液体，析出黄色颗粒，黄色颗粒经石油醚洗涤成白色颗粒，再经乙醇-水体系重结晶，得到5’-甲氧基-3’，4’-次甲二氧基桂皮酸异丁基酰胺白色结晶。(二)、ZL201110123076.X通过如下制备方法制得的是1-【(2E,4E,7E)-9-(3,4-次甲二氧基苯)九碳二烯酰】四氢吡咯和1-【(2E,7E)-N-7-(3,4-次甲二氧基苯)九碳二烯酰】四氢吡咯，其公开的制备方法为：步骤(1)、大叶蒟的上部分切成饮片，加入4～10倍药材量体积的70％～95％乙醇回流提取，煎煮1.5～3.5小时，滤过，药渣继续用3～8倍量乙醇煎煮1～3小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，60℃时浓缩至相对密度为1.30～1.38的浸膏；步骤(2)、浸膏用醇水溶液溶解后，过AB-8大孔吸附树脂柱，原药材与大孔树脂重量比为5：1～1:1，先用3～8倍量柱床体积的50％乙醇冲洗，然后用2～8倍量的70％～95％乙醇洗脱，洗脱液浓缩得浸膏，然后经硅胶柱分离，硅胶柱分离所用流动相为石油醚-乙酸乙酯6：1～1：2，得到混合物；步骤(3)、混合物经高效制备液相分离得到1-【(2E,4E,7E)-9-(3,4-次甲二氧基苯)九碳二烯酰】四氢吡咯和1-【(2E,7E)-N-7-(3,4-次甲二氧基苯)九碳二烯酰】四氢吡咯。(三)、ZL03115911.7通过如下制备方法制得的提取物中包括5’-甲氧基-3’，4’-亚甲二氧基桂皮酸异丁基酰胺、3’，4’-亚甲二氧基桂皮酸异丁基酰胺、N-异丁基-9(3’,4’-亚甲基二氧苯基)-2E,8E-壬二烯酰胺、1-【(2E,4E)-2，4-癸二烯酰】四氢吡咯、N-异丁基癸-反-2-反-4-二烯酰胺、1-【(2E)-5-(3，4-亚甲基二氧苯基)】四氢吡咯、5’-甲氧基-3’，4’-亚甲基二氧桂皮酸四氢吡咯，其制备方法为：取大叶蒟的干燥地下部分打成粗粉，加60％乙醇溶液浸渍，水浴回流两次，每次约1小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至原滤液体积的14％，并加30％乙醇得澄清不透明乙醇稀溶液。随后以大孔吸附树脂柱色谱法分离、精制，先后以40％、55％和80％乙醇溶液洗脱，收集80％乙醇洗脱液，浓缩干燥后得有效部位提取物，经HPLC检测，该提取物中酰胺类生物碱含量为68％。(四)、ZL200410084791.7通过如下制备方法制得的提取物中包括N-异丁基癸-反-2-反-4-二烯酰胺、1-【(2E,4E)-2，4-癸二烯酰基】吡咯烷、3’，4’-亚甲二氧基桂皮酸-异丁基酰胺、5’-甲氧基-3’，4’-亚甲二氧基桂皮酸异丁基酰胺、胡椒酰胺C5：1(2E)、5’-甲氧基-3’，4’-亚甲基二氧桂皮酸-四氢吡咯、4，5-二氢荜拨明宁碱、胡椒酰胺等，其制备方法为：取大叶蒟的干燥根和根茎1kg切成段状，加入约90％乙醇常温下浸渍约48小时，然后加入同浓度乙醇至20L，进行渗漉得粗提物，渗漉液加入温水15L搅拌混匀，然后将稀释后的渗漉液上D101大孔吸附树脂柱，流穿后依次以40％、90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱的液体，经不超过70℃浓缩干燥得到精制的提取物。(五)、ZL201010556017.7通过如下制备方法制得的提取物中包括【(2E,4E)-N-异丁基-9-(3，4-次甲二氧基苯)七碳二烯酰胺、【(2E,4E,7E)-N-异丁基-9-(3，4-次甲二氧基苯)九碳二烯酰胺、(2E,4E)-N-异丁基-9-苯基九碳二烯酰胺、大叶蒟素，其制备方法为：取大叶蒟地上部分，粗粉碎，加6倍量95％乙醇溶液，回流提取2小时，滤过，药渣用5倍量95％乙醇回流提取2小时，滤过，合并提取液，60℃减压浓缩至浓浸膏，即得大叶蒟总提物。取大叶蒟总提物用50％乙醇溶解至1倍生药量体积(先用1/295％溶解，不溶物再用1/2热水溶解，合并溶液即得)，上D101大孔树脂柱，用70％乙醇溶液洗脱，流速1BV/h，收集洗脱液4BV，弃去。继续用95％乙醇洗脱，流速1BV/h，收集洗脱液4BV，浓缩至浓浸膏，得大叶蒟有效组分。而201010296974.0公开了取大叶蒟的根和藤茎打粗粉，加入约10倍药材的量的70％乙醇，常温下渗漉得粗提物溶液，然后将粗提物溶液于真空条件下浓缩至原体积的约25％，浓缩后的粗提取物溶液搅拌均匀后上非极性型大型吸附树脂柱进行分离纯化，依次以30％、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱的液体，经浓缩干燥得到精制的提取物。但是，其并未公开提取物中含有哪些成分，也没有对提取物中的具体活性成分进行分离和鉴定，更没有测定活性成分的含量，实际上得到的是一些活性成分并不明确的提取物。而目前制备方法所获得的提取物的抗抑郁效果仍有待提高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种活性成分明确且药效好、安全性高的大叶蒟提取物及其制备方法与应用。为解本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大叶蒟提取物，其特征在于：其包括芝麻素、(2E,6E)‑N‑异丁基‑7‑（3，4‑次甲二氧苯基）七碳二烯酰胺、(2E,4E)‑N‑异丁基十二碳‑2，4‑二烯酰胺、 (2E,4E)‑N‑异丁基‑15‑苯基‑2，4‑二烯酰胺、(2E, 4E, 14Z) ‑N‑异丁基二十烷‑2,4,14‑三烯酰胺、(2E,4E)‑N‑异丁基‑13‑苯基‑2，4‑二烯酰胺中的任意一种或一种以上的组合。

【技术特征摘要】
1.一种大叶蒟提取物，其特征在于：其包括芝麻素、(2E,6E)-N-异丁基-7-（3，4-次甲二氧苯基）七碳二烯酰胺、(2E,4E)-N-异丁基十二碳-2，4-二烯酰胺、(2E,4E)-N-异丁基-15-苯基-2，4-二烯酰胺、(2E,4E,14Z)-N-异丁基二十烷-2,4,14-三烯酰胺、(2E,4E)-N-异丁基-13-苯基-2，4-二烯酰胺中的任意一种或一种以上的组合。2.根据权利要求1所述的大叶蒟提取物，其特征在于：所述的大叶蒟提取物还包括3’,4’-亚甲基二氧基桂皮酸异丁基酰胺、5’-甲氧基-3’,4’-亚甲基二氧基桂皮酸异丁基酰胺、N-异丁基癸-反-2-反-4-二烯酰胺中的任意一种或一种以上的组合。3.根据权利要求1所述的大叶蒟提取物，其特征在于：所述的大叶蒟提取物中酰胺类生物碱的总质量含量为40%~85%。4.根据权利要求3所述的大叶蒟提取物，其特征在于：所述的大叶蒟提取物中酰胺类生物碱的总质量含量为50%~80%。5.根据权利要求2所述的大叶蒟提取物，其特征在于：所述的大叶蒟提取物中所述的N-异丁基癸-反-2-反-4-二烯酰胺的总质量含量为5%~30%。6.一种如权利要求1至5中任一项所述的大叶蒟提取物的制备方法，其特征在于：其包括如下步骤：步骤（1）、将大叶蒟药材进行前处理后，加入10~30倍大叶蒟药材重量的体积浓度为80%~95%的乙醇进行浸渍或渗漉得粗提液；步骤（2）、将步骤（1）得到的粗提液浓缩至含醇量为35%~45%，并控制浓缩温度不超过70℃；步骤（3）、将经步骤（2）浓缩后的粗提液上非极性或中极性大孔吸附树脂柱，依次用2~6倍大叶蒟药材重量的体积浓度为30%~50%的乙醇溶液、50%~70%的乙醇溶液进行洗脱，弃去洗脱液；...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁秀娟，陈武，朱莹莹，季佳炜，蒋毅，
申请(专利权)人：苏州颐华生物医药技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32