一种检测饲料中糖含量的方法技术

本发明专利技术属于糖含量检测方法技术领域，具体涉及一种检测饲料中糖含量的方法，包括取饲料样品研磨成粉末状，用乙醚淋洗，40‑45℃水浴，加水研磨成浆，40‑45℃水浴，冷却至室温，过滤，收集滤液并定容至100mL，稀释，得到预处理样品；将葡萄糖、半乳糖、戊糖混合后溶于水中，配制葡萄糖‑半乳糖‑戊糖标准溶液，绘制标准曲线，最后进行样品中总糖的测定和计算。本发明专利技术的糖含量测定方法稳定性良好，样品测试回收率在92‑103.8％，且随着样品中总糖浓度的增加，误差越小，且灵敏度可达5μg/100mL，可以提高饲料中总糖和还原糖测定的准确度，降低检测限，且不需要昂贵的色谱仪，前处理工作简单，成本低。

A method for the determination of sugar content in feed

The invention belongs to the technical field of sugar content detection method, in particular relates to a method for detecting the sugar content of feed, including feed samples were ground into powder, washing with ether, 40 45 C water bath water, grinding into pulp, 40 45 DEG C water bath and cooled to room temperature, filtering, collecting the filtrate and set the volume at 100mL, get diluted sample pretreatment; glucose and galactose, the pentose mixture is dissolved in water, preparation of glucose galactose pentose standard solution, standard curve, the measurement and calculation of the total sugar in the sample. The invention of the sugar content determination method has good stability, sample recovery rate is 92 103.8%, and with the increasing concentration of total sugar in the sample, the error is small, and the sensitivity is up to 5 g/100mL, can increase the total sugar and reducing sugar in feed determination accuracy, lower detection limit, and does not need expensive instrument before the treatment, the work is simple, low cost.

【技术实现步骤摘要】
一种检测饲料中糖含量的方法
本专利技术属于糖含量检测方法
，具体涉及一种检测饲料中糖含量的方法。
技术介绍
糖含量的测定是饲料行业的重要生产监控指标，对饲料品质监控具有重要意义。一般情况下糖含量检测包括总糖检测和还原糖检测。其中，还原糖的测定主要采用的是斐林试剂法。总糖的测定包括转化滴定法、蒽酮比色法和色谱法，其中，转化滴定法主要测的是饲料中的还原糖和蔗糖的总量，总糖的测定以还原糖的测定法为基础，将饲料中的二糖经酸水解还原成单糖，再按照还原糖测定法进行测定，测出的糖含量也以转化糖的含量计。但是，该方法测量出的总糖主要指的是蔗糖和还原性糖含量的总和。而饲料一般是多种物质的混合物，其中含有甘油淀粉、糖类、脂肪等多种物质，糖类组分也不局限于蔗糖和还原性糖，所以上述总糖的转化滴定法检测手段难以准确表征饲料中的总糖含量。色谱法则是借助液相色谱仪或者气相色谱仪，成本高，前处理工作繁杂，耗时长，且一次性只能分析单糖组分，不利于普及和推广使用。蒽酮比色法的检测限在30μg左右，采样量较少，但由于不同的糖类与蒽酮试剂的显色深浅程度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，五碳糖显色更浅，现有方法均是采用葡萄糖制作标准曲线，故测定糖的混合物时，会因为不同糖类的比例不同造成误差。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供的一种检测饲料中糖含量的方法，采用改进的糖含量提取方法和检测方法，可以提高饲料中总糖和还原糖测定的准确度，降低检测限，且不需要昂贵的色谱仪，前处理工作简单，成本低。本专利技术目的是提供一种检测饲料中糖含量的方法，包括以下步骤：S1，样品前处理：取1-2g饲料样品研磨成粉末状，用乙醚淋洗2-3次，40-45℃水浴5-10min，加50mL水，研磨成浆，40-45℃水浴20-30min，冷却至室温，过滤，收集滤液并定容至100mL，稀释，得到预处理样品，备用；S2，标准曲线的绘制：将葡萄糖、半乳糖、戊糖混合后溶于水中，配制葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液；将葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液稀释成不同浓度的稀释液，分别取上述不同浓度的稀释液1mL置于不同的具塞试管中，每个具塞试管中均依次加入0.5mL蒽酮试剂和5.0mL浓硫酸，混匀，打开试管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷却至室温，在620nm波长下测量OD值，以葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液稀释液中的糖含量为横坐标，以OD值为纵坐标，绘制葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液标准曲线L；S3，样品中总糖的测定和计算：分别取S1中所得的预处理样品和蒸馏水各1mL，放入不同的具塞试管中，每个具塞试管依次加入蒽酮试剂0.5mL，浓硫酸5mL，混匀，打开试管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷却至室温，在620nm波长下测量OD值，将所测的OD值带入标准曲线L中，计算出预处理样品中总糖含量C，按照公式(1)计算原始的饲料样品中总糖含量；W＝C×N×100/M(1)公式(1)中，W表示饲料样品中总糖含量；C表示预处理样品中总糖含量；N表示稀释倍数；M表示饲料样品质量。优选的，上述的检测饲料中糖含量的方法，S1中，水浴温度为40℃。优选的，上述的检测饲料中糖含量的方法，S2中，所述戊糖为木糖或者阿拉伯糖。优选的，上述的检测饲料中糖含量的方法，S2中，葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液中葡萄糖、半乳糖和戊糖的质量比例为4:1:1，葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液中糖含量的总浓度为200μg/mL。优选的，上述的检测饲料中糖含量的方法，还包括还原糖测定步骤：将S1得到的预处理样品采用斐林试剂法测定并计算原始饲料样品中的还原糖含量。与现有技术相比，本专利技术提供的一种检测饲料中糖含量的方法，具有以下有益效果：1、当总糖浓度≥100μg/100mL时，各个方法均能较好的反应溶液中真实总糖含量，误差在2％以内。但是，当总糖浓度50μg/100mL时，沸水浴预处理样品方法的误差达到20％；常规蒽酮-硫酸法在5μg/100mL浓度溶液的测量上存在较大误差，沸水浴预处理样品方法无法检测出5μg/100mL浓度，说明这两种方法的灵敏度不如本专利技术的方法。沸水浴预处理样品方法的与真实溶液浓度误差最大，是因为该方法在预处理过程中，采用的水浴温度是100℃，淀粉糊化成胶状，导致蒽酮试剂无法与糖类成分充分反应，因此低浓度糖含量测量时误差较大。2、10次测量结果表明本专利技术的糖含量测定方法稳定性良好，RSD值在3.7％，准确度较高，且灵敏度可达5μg/100mL，可以提高饲料中总糖和还原糖的测定准确度，降低检测限，且不需要昂贵的色谱仪，前处理工作简单，耗时短，成本低。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不应理解为本专利技术的限制。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中涉及到数据范围的，在该数据范围内包括两个端点的任何数值均可实现，由于效果和步骤相同，故不赘述。一般情况下，麸皮中纤维素含量为30-50％，淀粉含量为10-15％、多戊糖10-30％左右；小麦淀粉含量60-75％左右，豆粕中水苏糖、阿拉伯木聚糖、半乳糖含量别占16％18％、22％，淀粉和纤维素含量很少；玉米种淀粉含量在50％左右。由于麸皮、豆粕和玉米是饲料的主要原料，由上述营养成分可知，阿拉伯木聚糖、半乳糖、多戊糖在饲料中占据不小的比例，所以在测定饲料中糖含量时，我们应当充分考虑阿拉伯木聚糖、半乳糖、多戊糖带来的影响。因此本专利技术提供了一种改进的饲料中糖含量的检测方法，具体参照下述实施例。下述实施例中，蒽酮试剂的配制方法如下：取2.0g蒽酮溶于l000mL体积分数为80％的硫酸中，现配现用。实施例1一种检测饲料中糖含量的方法，包括以下步骤：S1，样品前处理：取2.0g饲料样品研磨成粉末状，用乙醚淋洗2次，40℃水浴5min，以除去乙醚，加50mL水，研磨成浆，40℃水浴30min，冷却至室温，过滤，收集滤液并定容至100mL，稀释100倍，得到预处理样品，备用；S2，标准曲线的绘制：将葡萄糖、半乳糖、戊糖混合后溶于水中，配制葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液；葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液中葡萄糖、半乳糖和戊糖的质量比例为4:1:1，葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液中糖含量的总浓度为200μg/mL。绘制标准曲线：将葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液稀释成不同浓度0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL的稀释液(以糖含量的总浓度计)，分别取上述不同浓度的稀释液1.0mL置于编号为0、1、2、3、4、5、6、7的具塞试管中，每个具塞试管中均依次加入0.5mL蒽酮试剂和5.0mL浓硫酸，混匀，打开试管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷却至室温，在620nm波长下测量OD值，以葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液稀释液中的糖含量(浓度单位为μg/mL)为横坐标，以OD值为纵坐标，绘制葡萄糖-半乳糖-戊糖标准曲线L，L的方程为y＝0.0063x+0.0012，R2＝0.995，线性范围是0μg/mL≤x≤200μg/mL；不同标准曲线的绘制过程中各物质的添加量如表1所示。上述标准曲线绘制过程中，以蒸馏水作为对照调分光光度计的零点本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测饲料中糖含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，样品前处理：取1‑2g饲料样品研磨成粉末状，用乙醚淋洗2‑3次，40‑45℃水浴5‑10min，加50mL水，研磨成浆，40‑45℃水浴20‑30min，冷却至室温，过滤，收集滤液并定容至100mL，稀释，得到预处理样品，备用；S2，标准曲线的绘制：将葡萄糖、半乳糖、戊糖混合后溶于水中，配制葡萄糖‑半乳糖‑戊糖标准溶液；将葡萄糖‑半乳糖‑戊糖标准溶液稀释成不同浓度的稀释液，分别取上述不同浓度的稀释液1.0mL置于不同的具塞试管中，每个具塞试管中均依次加入0.5mL蒽酮试剂和5.0mL浓硫酸，混匀，打开试管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷却至室温，在620nm波长下测量OD值，以葡萄糖‑半乳糖‑戊糖标准溶液稀释液中的糖含量为横坐标，以OD值为纵坐标，绘制葡萄糖‑半乳糖‑戊糖标准曲线L；S3，样品中总糖的测定和计算：分别取S1中所得的预处理样品和蒸馏水各1.0mL，放入不同的具塞试管中，每个具塞试管依次加入蒽酮试剂0.5mL，浓硫酸5.0mL，混匀，打开试管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷却至室温，在620nm波长下测量OD值，将所测的OD值带入葡萄糖‑半乳糖‑戊糖标准曲线L中，计算出预处理样品中总糖含量C，按照公式(1)计算原始的饲料样品中总糖含量；W＝C×N×100/M   (1)公式(1)中，W表示饲料样品中总糖含量；C表示预处理样品中总糖含量；N表示稀释倍数；M表示饲料样品质量。...

【技术特征摘要】
1.一种检测饲料中糖含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，样品前处理：取1-2g饲料样品研磨成粉末状，用乙醚淋洗2-3次，40-45℃水浴5-10min，加50mL水，研磨成浆，40-45℃水浴20-30min，冷却至室温，过滤，收集滤液并定容至100mL，稀释，得到预处理样品，备用；S2，标准曲线的绘制：将葡萄糖、半乳糖、戊糖混合后溶于水中，配制葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液；将葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液稀释成不同浓度的稀释液，分别取上述不同浓度的稀释液1.0mL置于不同的具塞试管中，每个具塞试管中均依次加入0.5mL蒽酮试剂和5.0mL浓硫酸，混匀，打开试管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷却至室温，在620nm波长下测量OD值，以葡萄糖-半乳糖-戊糖标准溶液稀释液中的糖含量为横坐标，以OD值为纵坐标，绘制葡萄糖-半乳糖-戊糖标准曲线L；S3，样品中总糖的测定和计算：分别取S1中所得的预处理样品和蒸馏水各1.0mL，放入不同的具塞试管中，每个具塞试管依次加入蒽酮试剂0.5mL，浓硫...

【专利技术属性】
技术研发人员：张萍，
申请(专利权)人：咸阳师范学院，
类型：发明
国别省市：陕西,61