医药用结晶葡萄糖的制法制造技术

本发明专利技术涉及医药用结晶葡萄糖的新制法．本发明专利技术的方法是使脱支酶和葡萄糖淀粉酶与淀粉水解物作用，得到含葡萄糖９７．０％（重）以上高纯度糖液，再将糖液精制、浓缩，就可制得结晶葡萄糖，而不需再结晶．采用本发明专利技术的方法，可低成本地制得不含发热原的高纯度结晶葡萄糖．（*该技术在2006年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于医药用结晶葡萄糖、特别是作为注射用原料的结晶葡萄糖的制造方法，这种方法工艺过程简单、节能和成本低。关于葡萄糖注射液的规格，在日本有作为药品质量标准的日本药典加以规定，其它各国也均有规定，但在商业交易时，要求在作为原料的结晶葡萄糖这一步就应符合药物质量标准，这是商业交易时的必要条件。为了达到这一标准，特别重要之点是第一为葡萄糖的纯度，即比旋光度〔α〕20D应符合标准;第二不得含发热源等杂质。关于比旋光度的标准各国均有规定，日本药典第十次修订版中为〔α〕20D+52.2°～53.2°，1985年美国药典中为+52.6°～53.2°，英国1980年药典规定为52.5°～53.0°，中国药典(广东暂行)为+52.5°～53.0°等。但是为了符合这些规定，对已获得的结晶葡萄糖，需要再次将其用水溶解，进一步再结晶，这种方法称为再结晶法。再结晶法以往采用使用α-淀粉酶及葡糖淀粉酶的淀粉水解工艺，在工业生产方面，只能达到DE97、葡萄糖含量为95%(重量)(对固态物而言)，由精制、浓缩液得到的结晶葡萄糖的〔α〕20D仅为+53.2°～53.5°，所以就必须将已获得的结晶葡萄糖再次溶解，制成高纯度原液后，进行再结晶。其结果，使过程变得很复杂，消耗大量能源，产品收率降至50%以下，致使成本升高，在经济上是不利的。所谓发热原是注射时有在人体引起发烧或发冷危险的物质，其代表物为微生物产生的内毒素。这种内毒素有来自原料淀粉者，有在糖化，精制工序中因微生物污染而造成者等等;但特别是在利用离子交换树脂处理工序中，因微生物污染而引起者很多。利用离子交换树脂的处理工序是由以下几步组成的通常首先用阳离子交换树脂，再用阴离子交换树脂分别进行处理(双床工序)之后，进一步用两种树脂的混合体床层(混合床层)进行处理。如果使离子交换处理在高温下进行，有产生淀粉糖异构化反应和分解反应的危险，所以，历来离子交换处理通常在40℃以下进行。在这种温度下进行的结果，在离子交换树脂塔内容易产生微生物，即使将树脂再生，这种微生物也难以灭掉，经循环后，逐渐积累，不仅成为发热原产生的缘由，而且由于被处理的糖液发酵，使塔内压力上升，导致液体无法流通，再者，也有使洗涤排水增加等问题。为了除去这种发热原，以往在葡萄糖液的精制工序中，采用大量的活性炭、或超滤膜和精密滤膜等，因此，不可避免使成本上升。本专利技术的目的，是提供一种制造医药用、特别是注射用葡萄糖的方法，该葡萄糖符合日本及各国药典规定的标准。即提供了一种在淀粉水解工序中制得高纯度糖化液，这种高纯度糖化液在精制、浓缩后，可省去再结晶工序，同时可制得不含发热原等杂质的结晶葡萄糖，并且成本低、节能的工业生产方法。专利技术者发现，在淀粉水解工序中同时采用脱支酶和葡糖淀粉酶，利用这种方法可得到含葡萄糖97.0%(重)(对固态物而言)以上的糖液〔低聚糖含量3%(重)以下〕，将此糖液在双床层阳离子交换树脂塔中在55℃以上、80℃以下处理精制，利用一次结晶操作就具有符合日本和各国药典规定的比旋光度，可以很经济地制出高纯度的注射用原料结晶葡萄糖。在本专利技术中，首先将淀粉在DE6～15、最好在8～12，液化后，用盐酸或草酸调整pH为4～5，在90℃以上保持10分钟以上，使液化酶失活。再冷却至60℃，使脱支酶和葡糖淀粉酶作用，进行糖化。脱支酶是可以断开淀粉的α-1，6键的一种酶，具有这种作用的任何一种酶均可，例如丹麦诺沃(ノボ)公司生产的普罗摩扎姆(グルコァミラゼ)200L脱支酶等均很合适。再者，作为葡糖淀粉酶，用同一公司生产的AMG300L等就很合适，但并不限于这些酶制剂。关于这些酶的用量，如上述之普罗摩扎姆200L，对于每克固态物，最好在0.5PUN以上;AMG 300L，对于每克固态物，最好在0.3AGU以下。关于糖化条件，当浓度为30%(重)以下时，糖化时间最好在45小时以上，这样就可制得高DE值、高葡萄糖含量的糖化液，其中DE可达98.0以上，葡萄糖含量可达97.0%。再者，脱支酶普罗摩扎姆每1PUN表示一种酶单位，它表示这种酶在0.2%的淀粉聚合物中，于40℃、pH为5.0的条件下作用后，在一分钟内可产生具有相当于1umol葡萄糖还原能力的还原糖。再者，关于葡糖淀粉酶AMG的1AGU所表示的酶单位，是以0.1M醋酸缓冲液每升10g麦芽糖为基质，在其中，于25℃pH为4.3的条件下作用时，在一分钟内，可分解1umol麦芽糖。这样制得的糖化液，采用传统方法过滤，用活性炭脱色等措施后，进行离子交换精制。离子交换精制，是由以下几步组成首先用阳离子交换树脂处理、其次用阴离子交换树脂处理的双床工序，然后再用两种树脂的混合物处理的混合床处理。但是在本专利技术的上述双床层工序中，在55℃以上，80℃以下使糖化液通过阳离子树脂塔，这样就可防止因微生物污染而产生发热原，而且提高液体的澄清度，当通过阳离子交换树脂糖液的温度不足55℃时，就不能完全防止发热原的生成。再者，如果超过80℃，会引起糖质分解及其它副反应，这是不希望的。在双床工序的阴离子交换树脂处理之后，最好使液体在40℃下流通。采用本专利技术提供的方法，所用的离子交换树脂，在双床工序中所用者，可采用三菱化成工业株式会社制备的ダィャィオンSKIB作为阳离子树脂，阴离子树脂采用同一公司制备的ダィャィオンWA30；混合床工序所用的阳离子树脂可用该公司生产的ダィャィオンPK218，所用阴离子树脂可采用该公司生产的ダィャィオンPA408；但并不限于上述树脂，只要与上述树脂性能相同的任何树脂均可。经离子交换树脂精制之后，将糖化液浓缩，作为结晶葡萄糖原液。关于结晶化，可采用间歇熬糖法的传统方法，在60℃～70℃、过饱和度1.03～1.04的条件下熬煮。在此过程中所使用的熬糖用水希望不含发热原。熬煮以后，将熬煮后的糖化醪装在离心分离机上，使蜜和结晶分离。离心分离机的洗涤用水，也希望不含发热原。分离出来的结晶，经干燥机、冷却器等，过筛后即为成品。实施例用草酸将淀粉液化液(ED 11.0)的pH值调整到4.5，在95±3℃保持20分钟，使液化酶失活。然后快速冷却至60℃，将浓度调至25％(重)，pH调到4.5。将糖化酶(丹麦诺沃 公司生产的 AMG300L)按固体组分每克添加0.15AGU、脱支酶(同一公司生产的普罗摩扎姆200L)按固体组分每克添加0.6PUN，分别加到淀粉液化液中，在60℃进行糖化后(间歇式，500l)。其结果如第1表所示，经48小时的糖化，反应液对固态物而言的葡萄糖含有率(DX)为97.8%，经60小时的糖化，DX为98.1%。表1糖化时间 糖组成和DE(时) DX G2 G3 G4以上 DE24 96.8 1.6 0.6 1.0 98.048 97.8 1.4 0.4 0.4 98.860 98.1 1.3 0.4 0.2 99.0注G2、G3、G3分别表示2糖类、3糖类、4糖类。然后，使此糖化液脱色、过滤、进行离子交换树脂精制。关于离子精制，在双床工序中，首先利用热交换器使糖化液温度温度升到60℃，并通过阳离子树脂塔(本文档来自技高网...

【技术保护点】
不用再结晶法制造医药用结晶葡萄糖的方法，其特征在于，使脱支酶和葡糖淀粉酶作用于淀粉水解液，制得含葡萄糖９７．０％（重）以上（对固态物而言）的高纯度糖液，将此糖液加以精制、浓缩，即可制得结晶葡萄糖。

【技术特征摘要】
JP 1985-10-4 220227/85;JP 1985-10-4 220228/851.不用再结晶法制造医药用结晶葡萄糖的方法，其特征在于，使脱支酶和葡糖淀粉酶作用...

【专利技术属性】
技术研发人员：安田荣八郎，高久肇，田中章三，川端达夫，
申请(专利权)人：昭和产业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]