一种荸荠植株抗微生物提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种荸荠植株抗微生物提取物及其制备方法和应用，制备方法包括以下步骤：(1)将干燥后的荸荠植株粉碎，置于亚临界萃取釜中，以甲醇溶液为萃取溶剂进行亚临界萃取；(2)将步骤(1)所得的渣液进行离心，收集上清液；(3)将步骤(2)所得的上清液置于分子蒸馏仪的反应釜中，进行分子蒸馏，收集馏分，得到荸荠植株抗微生物提取物。该方法制备工艺简单、提取率高，所得的荸荠植株抗微生物提取物抗微生物活性好，为荸荠在抗微生物药物研究中的应用奠定了一定的基础。

An anti microbial extract from Chinese water chestnut plant and its preparation and Application

The invention discloses a water chestnut plant anti microbial extract and preparation method and application thereof. The preparation method comprises the following steps: (1) the plant water chestnut after dry grinding, a subcritical extraction kettle, with methanol as extraction solvent for subcritical extraction; (2) the step (1) of the liquid slag by centrifugation, the supernatant was collected; (3) the step (2) reactor in the supernatant of the molecular distillation device, molecular distillation, collecting fractions, water chestnut plant anti microbial extract. The method is simple, and the extraction rate is high. The extract from the extract of the water chestnut has good antimicrobial activity, which has laid a foundation for the application of water chestnut in the research of antimicrobial agents.

【技术实现步骤摘要】
一种荸荠植株抗微生物提取物及其制备方法和应用
本专利技术涉及属于医药
，具体涉及一种荸荠植株抗微生物提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
荸荠(Eleochairistoberosa)，又名马蹄(Waterchestnut)，是莎草科荸荠属多年水生草本植物荸荠的地下球茎，我国长江流域以南各省均有栽培。马蹄不仅汁多味甜，营养丰富，而且有良好的药用价值，自古有“地下雪梨”和“江南人参”的美誉。祖国传统医学认为，马蹄性寒味甘，有清热、化痰、消积等功效，能治疗黄疽、热淋、痞积、目赤、咽喉肿痛等症，乃药中佳品。《中药大辞典》记载，马蹄的活性组分富集于马蹄的果皮与果肉之间的部位。但是，迄今为止，从未报道过荸荠的抗微生物作用相关研究。微生物耐药性已成为全球关注的严峻问题，由多重耐药菌和许多新的病原微生物引起的感染对人类健康造成极大威胁。随着抗微生物药物的广泛应用，医院感染性微生物耐药性问题日趋严重，真菌感染在临床上也有逐年上升趋势。微生物的耐药性产生速度，远远大于抗生素研制速度。因此，防止微生物耐药性产生和寻找特效抗菌药物是当务之急。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种制备工艺简单、提取率高的荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，所得的荸荠植株抗微生物提取物抗微生物活性好，为荸荠在抗微生物药物研究中的应用奠定了一定的基础。为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)将干燥后的荸荠植株粉碎，置于亚临界萃取釜中，以甲醇溶液为萃取溶剂进行萃取；(2)将步骤(1)所得的渣液进行离心，收集上清液；(3)将步骤(2)所得的上清液置于分子蒸馏仪的反应釜中，进行分子蒸馏，收集馏分，得到荸荠植株抗微生物提取物。优选的，所述步骤(1)中，萃取压力为25MPa～50MPa，萃取温度为120℃～150℃。优选的，所述步骤(1)中，所述亚临界萃取时的搅拌转速为150rpm～200rpm，萃取时间为5min～10min；所述亚临界萃取过程是在密闭容器中、氮气保护下进行。优选的，所述步骤(1)中，所述甲醇溶液的质量百分含量为55％～95％，所述甲醇溶液与荸荠植株的用量比为10mL～12mL∶1g。优选的，所述步骤(2)中，所述离心是在常温下进行，所述离心的速度为4000×g～6000×g，所述离心的时间为10min～15min。优选的，所述步骤(3)中，所述分子蒸馏温度为80℃～90℃，蒸馏压力为200Pa～250Pa，进料速度为2.0mL/min～3.0mL/min，转速为250r/min～350r/min。作为一个总的专利技术构思，本专利技术还提供一种荸荠植株抗微生物提取物，所述荸荠植株抗微生物提取物由上述的制备方法所制得。作为一个总的专利技术构思，本专利技术还提供一种上述的制备方法所制得的荸荠植株抗微生物提取物在制备抗微生物剂中的应用。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：1、本专利技术人在寻找中草药抗微生物活性的过程中，发现荸荠植株提取物具有良好的抗微生物活性。这为后期这种植物提取物的抗微生物或辅助治疗作用研究奠定了一定的基础。2、本专利技术的提取方法简单实用，亚临界水提取以水为提取溶剂，该方法能使荸荠植株细胞中抗微生物有效成分高效溶出，再以分子蒸馏技术将抗微生物有效成分提取出来，在提高生产效率的同时大大节约成本，并且极大降低了对环境的污染，具有良好的应用前景和经济效益。3、本专利技术制得的荸荠植株提取物对微生物有较好的抑制作用；实验结果显示：95％甲醇荸荠亚临界提取物对微生物的抑制活性最好，且对微生物的抑制率均呈剂量依赖性。具体实施方式以下结合具体优选的实施例对本专利技术作进一步描述，但并不因此而限制本专利技术的保护范围。实施例1：一种本专利技术的荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)将干燥后的荸荠植株(根茎和枝叶部分)粉碎，置于亚临界萃取釜中，再加入质量百分含量为95％的甲醇溶液为萃取溶剂，其中，甲醇溶液与荸荠植株的用量比为10mL∶1g，在压力为25MPa、温度为150℃、搅拌转速为200rpm、氮气保护下进行亚临界萃取10min；(2)将步骤(1)所得的渣液进行在常温、转速为4000×g下离心15min，收集上清液；(3)将步骤(2)所得的上清液置于分子蒸馏仪的反应釜中，在温度为80℃，蒸馏压力为250Pa，进料速度为2.0mL/min，转速为250r/min下进行分子蒸馏，收集馏分，得到荸荠植株抗微生物提取物。实施例2：一种本专利技术的荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)将干燥后的荸荠植株(根茎和枝叶部分)粉碎，置于亚临界萃取釜中，再加入质量百分含量为75％的甲醇溶液为萃取溶剂，其中，甲醇溶液与荸荠植株的用量比为11mL∶1g，在压力为40MPa、温度为130℃、搅拌转速为200rpm、氮气保护下进行亚临界萃取8min；(2)将步骤(1)所得的渣液进行在常温、转速为5000×g下离心12min，收集上清液；(3)将步骤(2)所得的上清液置于分子蒸馏仪的反应釜中，在温度为85℃，蒸馏压力为220Pa，进料速度为2.5mL/min，转速为300r/min下进行分子蒸馏，收集馏分，得到荸荠植株抗微生物提取物。实施例3：一种本专利技术的荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)将干燥后的荸荠植株(根茎和枝叶部分)粉碎，置于亚临界萃取釜中，再加入质量百分含量为55％的甲醇溶液为萃取溶剂，其中，甲醇溶液与荸荠植株的用量比为12mL∶1g，在压力为50MPa、温度为120℃、搅拌转速为150rpm、氮气保护下进行亚临界萃取8min；(2)将步骤(1)所得的渣液进行在常温、转速为6000×g下离心10min，收集上清液；(3)将步骤(2)所得的上清液置于分子蒸馏仪的反应釜中，在温度为90℃，蒸馏压力为200Pa，进料速度为3.0mL/min，转速为350r/min下进行分子蒸馏，收集馏分，得到荸荠植株抗微生物提取物。实施例4：荸荠提取物对微生物的抑制活性1.试剂：氟康唑(Fluconazole)和氯霉素(Chloroamphenicol)：上海三维制药有限公司，批号分别为20151109和20160717；细菌菌株：Staphylococcusaureus(ATCC25923，Sa)、Bacillussublitis(ATCC6633，Bs)和Escherichiacoli(ATCC25922，Ec)从中国药品生物制品检定所购买；真菌菌株：Candidaalbicans(ATCC64550，Ca)、C.krusei(ATCC62588，Ck)及C.parapsilosis(ATCC22019，Cp)从中国药品生物制品检定所购买。2.测试方法：抗菌活性测试采用文献描述的肉汤稀释法进行测试，选择甲醇提取物为待测样品。母液采用二甲亚砜进行配制，配制成2.0mg/mL的浓度，母液采用二倍法梯度稀释成6个浓度梯度。具体操作如下：0.5mL的稀释液加入到含4.4mL含稀肉汤的试管中，接着加入0.1mL的菌种悬浮液混合均匀，整个培养液的体积为5.0mL。测试的样品浓度范围为6.25到200μg/mL，阳性对照药物氯霉素和氟康唑的测试浓度范围分别为2.0-265μg/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)将干燥后的荸荠植株粉碎，置于亚临界萃取釜中，以甲醇溶液为萃取溶剂进行亚临界萃取；(2)将步骤(1)所得的渣液进行离心，收集上清液；(3)将步骤(2)所得的上清液置于分子蒸馏仪的反应釜中，进行分子蒸馏，收集馏分，得到荸荠植株抗微生物提取物。

【技术特征摘要】
1.一种荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)将干燥后的荸荠植株粉碎，置于亚临界萃取釜中，以甲醇溶液为萃取溶剂进行亚临界萃取；(2)将步骤(1)所得的渣液进行离心，收集上清液；(3)将步骤(2)所得的上清液置于分子蒸馏仪的反应釜中，进行分子蒸馏，收集馏分，得到荸荠植株抗微生物提取物。2.根据权利要求1所述的荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，萃取压力为25MPa～50MPa，萃取温度为120℃～150℃。3.根据权利要求2所述的荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述亚临界萃取时的搅拌转速为150rpm～200rpm，萃取时间为5min～10min；所述亚临界萃取过程是在密闭容器中、氮气保护下进行。4.根据权利要求3所述的荸荠植株抗微生物提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨金凤，段振华，
申请(专利权)人：贺州学院，
类型：发明
国别省市：广西,45