新型化合物制造技术

本发明专利技术公开了表Ｉ中所列基因的多肽和多核苷酸，以及用重组技术制备所述多肽的方法。本发明专利技术还公开了所列基因的多肽和多核苷酸用于诊断试验的方法。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及新鉴定的化合物及编码该多肽的多核苷酸，本专利技术还涉及它们在诊断中的应用，以及它们在鉴定有潜在治疗作用的激动剂和拮抗剂的化合物中的用途，本专利技术还涉及所述多肽和多核苷酸的制备。本专利技术所述的多核苷酸及多肽还涉及具有信号序列的蛋白，该信号序列可使所述蛋白分泌于胞外或者与膜相连(下文往往统称为分泌蛋白或分泌多肽)。
技术介绍
由于“功能基因组”，即以基因组或基因为基础的高通量生物学的出现，使得药物开发方法现正经历一场重大变革。以鉴定基因或基因产物作治疗靶标为手段的方法迅速取代了原来以“定位克隆”为基础的方法。一种表型，即一种生物功能或一种疾病被鉴定出来后，接着就根据其遗传图谱位置回溯到负责基因(responsible gene)。功能基因组在很大程度上依赖于高通量DNA测序技术和各种生物信息学工具，从现有的多种分子生物学数据库中鉴定出有潜在价值的基因序列。需要不断对其他基因及其蛋白/多肽进行鉴定和定性以作为药物开发的靶标。那些天然分泌到血液、淋巴或其他体液中，或者分泌到细胞膜上的蛋白及多肽是研发药物的首要目标。原因在于该目标可以相对容易地将治疗蛋白靶向其作用位置(体液或细胞膜)。真核细胞和原核细胞将蛋白质分泌入胞外区间的天然通道分别为内质网和内膜(Palade，1975，Science，189，347；Milstein，Brownlee，Harrison，and Mathews，1972，Nature New Biol.，239，117；Blobel，and Dobberstein，1975，J.Cell.Biol.，67，835).反之，现在还没有发现一条将蛋白质由细胞外输入细胞内的天然通道(除了胞吐作用，即蛇毒液中的毒素侵入细胞的机制外)。因此，将蛋白治疗物靶入细胞就面临着巨大困难。分泌型及膜关联型蛋白包括但不仅限于所有肽激素及其受体(包括但不限于胰岛素、生长激素、趋化因子、细胞因子、神经肽、整联蛋白、激肽释放酶、核纤层蛋白、黑色素、利尿钠激素、neuropsin，神经营养蛋白，垂体激素、多效蛋白(pleiotropins)，前列腺素、分泌粒蛋白、选择蛋白、血小板球蛋白、胸腺素)，乳腺癌及肠癌基因产物、苗条蛋白(leptin)、肥胖基因蛋白及其受体、血清白蛋白、过氧化物歧化酶、剪接体蛋白、7TM(跨膜蛋白)蛋白也称为G-蛋白偶联受体、免疫球蛋白、几个家族的丝氨酸蛋白酶(包括但不限于血液凝固级联反应蛋白、消化酶)、脱氧核糖核酸酶I、等。FDA或外国机构承认治疗作用的分泌型或膜-关联型蛋白包括但不限于所有肽类激素及其受体(包括但不限于胰岛素、胰高血糖素、生长激素、绒毛膜促性腺素、促卵泡激素、促黄体素释放激素(luteinizing hormone)、降钙素、促肾上腺皮质激素(ACTH)、血管升压素、白细胞介素、干扰素、免疫球蛋白、乳铁传递蛋白、(有多家公司销售的不同产品)、组织型纤溶酶原激活物(Alteplase by Genentech)、hyaulorindase(Wydase by Wyeth-Ayerst)，α链球菌脱氧核糖核酸酶(Pulmozyme\by Genentech)，Chymodiactin(chymopapain by Knoll)，糖脑苷酶(Ceredase by Genzyme)，链激酶(Kabikinase by Pharmacia)(Streptase by Astra)等。这表明分泌型及膜-关联型蛋白质作为治疗靶标已有确证的历史。显然，需要对其他能够预防、减缓或纠正功能紊乱或疾病的分泌型及膜关联型蛋白质进行鉴定及定性，所述功能紊乱或疾病包括但不限于糖尿病、乳腺癌、前列腺癌、结肠癌及其他恶性肿瘤、高血压及低血压、肥胖症、过食症、厌食症、生长畸形、哮喘、燥狂抑郁病、痴呆、精神狂乱、智力低下、亨廷顿氏病、图雷特氏(Tourette)综合征、精神分裂症、生长发育、精神发育或性发育障碍、以及血液级联反应系统功能紊乱(包括导致卒中(stroke)的那些功能紊乱)。本专利技术中含前导序列的蛋白还可以用来进一步阐明目前还未完全理解的蛋白输送机制，因而可以用作研究工具。专利技术概述本专利技术涉及表I中列出的基因的特定多肽及多核苷酸，包括制备其的重组材料和方法。这类多肽和多核苷酸与治疗特定疾病的方法相关，所述疾病包括但不限于表III和V所列疾病，下文称作“本专利技术所述疾病”。另一方面，本专利技术涉及用本专利技术提供材料鉴别激动剂和拮抗剂(例如，抑制剂)的方法，以及用鉴别出的化合物治疗与表I所列基因的多肽和/或多核苷酸失衡相关的病症的方法。另一方面，本专利技术还涉及用来检测与表I所列基因活性或水平异常有关的疾病的诊断试验。本专利技术另一方面涉及多肽以及多核苷酸，所述多核苷酸包括序列表中所列的任何核苷酸序列，所述多肽包括上述多核苷酸编码的多肽。另一方面，本专利技术还涉及包括序列表所列任一多肽序列的多肽及其制备所用的重组材料和方法。本专利技术另一方面还涉及使用所述多肽和多核苷酸的方法。所述使用包括治疗因本专利技术所述基因的表达、产量、功能或代谢异常而引发的疾病、异常及紊乱(这些情况下文统称疾病)，本领域技术人员能够很容易地从与每个所附序列公开的其它蛋白的同源性方面理解这些疾病。另一方面，本专利技术涉及用本专利技术提供的材料鉴定激动剂和拮抗剂的方法，以及治疗与鉴定出的化合物失衡相关的疾病的方法。本专利技术另一方面还涉及检测与本专利技术所述分泌型蛋白的活性或水平异常有关的疾病的诊断试验。专利技术描述第一方面，本专利技术涉及表I中所列基因的多肽。所述多肽包括(a)由包括序列表中所列序列的多核苷酸编码的分离多肽，本专利技术中提到序列表中所列多核苷酸或多肽时，要参考序列表部分的序列列表；(b)一种分离多肽，该多肽包括与序列表中多肽序列具有至少95％，96％，97％，98％，或99％同一性的多肽序列；(c)一种分离多肽，该多肽包括序列表中所列的多肽序列；(d)一种分离多肽，该多肽与序列表中列出的多肽序列之间具有至少95％，96％，97％，98％，或99％的同一性；(e)序列表中列出的多肽序列；以及(f)一种分离多肽，该多肽具有或包括与序列表所列多肽序列之间的同一性指数为0.95，0.96，0.97，0.98，或0.99的多肽序列；(g)(a)～(f)中所述多肽的片段及变体。本专利技术所述多肽是表II中基因家族的成员。因此根据表III和V中的理由，它们具有治疗和诊断的价值。表I中基因的多肽及多核苷酸的生物学特性在本专利技术中称为表I中基因的多肽及多核苷酸的“生物学活性”。优选地，本专利技术所述多肽具有表I中基因的至少一种生物学活性。本专利技术所述多肽还包括上述多肽的变体，其中包括所有的等位形式及剪接变体。所述多肽可以是从标准多肽通过添加、缺失及取代变化而来，这些变化可以是保守或非保守的，或其任何组合。具体优选变体为这样的多肽，其中，例如，以任一组合插入、取代或缺失50～30、30～20、20～10、10～5、5～3、3～2、2～1个氨基酸。本专利技术所述多肽的优选片段包括这样的分离多肽，该分离多肽包括其中含有来自序列表所列氨基酸序列的至少30、50或100个连续氨基酸的氨基酸序列，或者这样的分离多肽，该分离多肽包括其中含有将序列表所列氨基酸序列截短或缺失至少30、50或100个连本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽，该多肽选自：（ａ）由包括表Ⅰ中序列的多核苷酸编码的分离多肽；（ｂ）包括表Ⅰ中多肽序列的分离多肽；和（ｃ）表Ⅰ中基因的多肽序列。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：潘卡杰阿加沃尔，保罗R默多克，萨菲亚K里兹维，兰德尔F史密斯，向朝英，卡伦S卡布尼克，赖英塔，谢青，
申请(专利权)人：史密丝克莱恩比彻姆公司，史密斯克莱比奇曼公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]