重组人IA-2抗原的制备方法技术

技术编号:1744044 阅读:404 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
重组人IA-2抗原的制备方法,包括步骤1:IA-2表达型重组质粒的构建;步骤2:IA-2重组蛋白的诱导表达;步骤3:IA-2重组蛋白的分离、亲和层析和透析纯化;其特征在于:    所述的步骤1是从胎脑中克隆人IA-2胞内结构域(包括氨基酸606~979)的编码基因;以嵌套式PCR扩增该编码基因,实现Pinpoint  Xa-IA-2表达型重组质粒的构建;    所述的步骤2是将含重组质粒的JM109菌经IPTG诱导培养,得到IA-2重组蛋白;    所述的步骤3是将IA-2重组蛋白经分离、亲和层析和透析纯化,获得生物素酰化IA-2融合蛋白。(*该技术在2023年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及重组人IA-2抗原的制备方法,属于生物医学和基因工程

技术介绍
1型糖尿病是由于胰岛β细胞破坏引起胰岛素分泌严重不足而出现的一组代谢障碍综合征,是儿童和青少年人群中最常见的慢性终身性疾病之一,绝大多数患者在20岁之前发病,但是近年来成年人中的发病人数也在不断增加。1型糖尿病可引起肾功能衰竭、心脑血管病变、失明及肢体坏疽等严重的慢性并发症,不仅严重影响了病人的健康和生活质量,并且给家庭及社会带来沉重的经济负担。因此,广泛开展1型糖尿病的基础和临床研究具有重要的理论和现实意义。从糖尿病的新分型标准中可以看出,起病年龄、血糖控制和胰岛素依赖与否已不再作为1型与2型糖尿病分型的主要依据。两者最主要的鉴别点在于1型糖尿病患者存在着自身免疫紊乱,而2型糖尿病无此现象。因此,针对多种胰岛细胞相关分子的自身抗体是目前糖尿病正确分型最直接可靠的临床指标。自1974年胰岛细胞抗体(ICAs)被发现以来,随着科研的深入,越来越多的胰岛自身抗体被人们所认识,其中研究较多的有IA-2、IA-2β、GAD65及胰岛素自身抗体等。对这些自身抗体的检测将有助于1型、2型糖尿病的鉴别诊断,本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:罗敏
申请(专利权)人:上海市内分泌代谢病研究所
类型:发明
国别省市:

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