The invention belongs to the technical field of Chinese medicine and traditional Chinese medicine identification, in particular to a PCR method and specific primers that can specifically identify the dragon. This method is used to identify the authenticity of the dragon, only through simple DNA extraction, PCR specific amplification and electrophoresis detection can be used to identify the authenticity of the samples. Mainly used for Dilong, aqueous extract of earthworm, earthworm extract, limit (high temperature and high pressure, long time), traditional Chinese medicine preparation conditions of earthworm extract (a variety of similar animal medicine), mixed water extract, alcohol extract and mixed limit (high temperature and high pressure, long time) Chinese medicine preparation, mixing water treatment conditions rapid identification of mixed extract and alcohol extract.
【技术实现步骤摘要】
一种鉴定地龙的PCR方法
本专利技术涉及中药及中药材、中药提取物鉴定
,特别是一种能够特异性鉴定金钱白花的PCR方法及其特异引物。主要用于地龙药材、地龙提取物、极限条件提取物,含有地龙的制剂以及极限条件处理的地龙制剂快速鉴定。
技术介绍
地龙为药用蚯蚓,具有,主要有降压、抗血栓、抗心律失常、抗癌、增强免疫、抗淸痕、解热镇痛、镇静、平喘、抗菌等作用。此外,从广地龙中还发现了多种具有药理活性的成分如蚯蚓纤溶酶、蚓激酶、蚯蚓素、蚯蚓解热碱、蚯蚓毒素、碱性氨基酸、次黄嘿呤、黄嘿呤、琥拍酸和脂肪酸以及钙调素蛋白即蚯蚓新钙结合蛋白等,这些成分在调节细胞多种生理功能中起着重要调节作用。广地龙在行业内被公认为品质最优的道地药材,不仅是国内销售中的抢手货,而且还是出口创汇的指定品种,不论其作为药品、还是营养保健品开发利用,在经济、社会和生态方面都有巨大的效益潜力。PCR方法:PCR是聚合酶链式反应的简称,是一种酶促化学反应,可以在试管里将待测的目的基因在很短的时间内扩增物十万倍乃至上百万倍,大大提高了基因诊断的灵敏度,降低了分析的难度。PCR法是目前基因诊断中使用最多的方法。 ...
【技术保护点】
建立一种鉴定地龙的方法:提取地龙样品的DNA,通过PCR扩增、电泳检测等过程,鉴定地龙及其提取物、极限条件提取物和制剂的真伪。
【技术特征摘要】
1.建立一种鉴定地龙的方法:提取地龙样品的DNA,通过PCR扩增、电泳检测等过程,鉴定地龙及其提取物、极限条件提取物和制剂的真伪。2.权利1的特征在于可以鉴定混合制剂中地龙的真伪,过程包括下列步骤:1)制备样品:地龙粉末,地龙水提物和醇提物、极限(高温、高压、长时间)条件提取的地龙水提物和醇提物,地龙与其他蛇类药材的混合制剂和极限(高温、高压、长时间)条件处理的地龙与其他动物类药材的混合制剂。2)样品DNA提取:从样品中提取DNA。3)PCR反应:采用PCR方法得到PCR产物,93~95℃5min,30~40个循环(95℃30~45s,55~65℃30~45s,72℃30~45s),72℃5min,得到扩增产物。4)电泳鉴定:根据扩增产物大小,鉴定地龙真伪。3.权利2中样品:地龙粉末,地龙水提物和醇提物,极限条件提取的地龙水提物和醇提物,地龙混合制剂,极限条件处理的地龙制剂:1)地龙粉碎,得地龙细粉。2)采用加热冷凝回流法提取,温度为100℃,料水比为1∶10,时间为2h,提取三次得地龙水提物和醇提...
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