一种鉴定蜈蚣的PCR方法技术
A PCR method for identification of Centipede
The invention belongs to the technical field of Chinese medicine and traditional Chinese medicine identification, in particular to a PCR method and specific primers which can specifically identify the centipede. This method is used to identify the authenticity of centipede, only through simple DNA extraction, PCR specific amplification and electrophoresis detection can be used to identify the authenticity of the samples. Mainly used for medicine, centipede, centipede water extracts and ethanol extracts of centipede, limit (high temperature and high pressure, long time), traditional Chinese medicine preparation conditions of centipede extract (a variety of similar animal medicine), mixed water extract, alcohol extract and mixed limit (high temperature and high pressure, long time) Chinese medicine preparation, mixing water treatment conditions rapid identification of mixed extract and alcohol extract.
【技术实现步骤摘要】
一种鉴定蜈蚣的PCR方法
本专利技术涉及中药及中药材、中药提取物鉴定
，特别是一种能够特异性鉴定金钱白花的PCR方法及其特异引物。主要用于蜈蚣药材、蜈蚣提取物、极限条件提取物，含有蜈蚣的制剂以及极限条件处理的蜈蚣制剂快速鉴定。
技术介绍
蜈蚣是我国传统名贵中药材，具有熄风镇痉、通络止痛、攻毒散结的功效，用于肝风内动、痉挛抽搐、小儿惊风、中风口、半身不遂、破伤风、风湿顽痹、偏正头痛、疮疡、瘰疬、蛇虫咬伤等。据《中国药典》2010年版一部记载其来源为蜈蚣科动物少棘巨蜈蚣(ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch)的干燥体，主产于我国湖南、湖北、广西以及云南等地。PCR方法：PCR是聚合酶链式反应的简称，是一种酶促化学反应，可以在试管里将待测的目的基因在很短的时间内扩增物十万倍乃至上百万倍，大大提高了基因诊断的灵敏度，降低了分析的难度。PCR法是目前基因诊断中使用最多的方法。国内虽已有PCR方法鉴定蜈蚣药材的报道，但鉴定极限条件处理后的药物制剂中蜈蚣的PCR方法至今未见报道。由于在制剂的生产过程中，存在粉碎、混合等环节，水煎煮提取、...
【技术保护点】
建立一种鉴定蜈蚣的方法：提取蜈蚣样品的DNA，通过PCR扩增、电泳检测等过程，鉴定蜈蚣及其提取物、极限条件提取物和制剂的真伪。
【技术特征摘要】
1.建立一种鉴定蜈蚣的方法：提取蜈蚣样品的DNA，通过PCR扩增、电泳检测等过程，鉴定蜈蚣及其提取物、极限条件提取物和制剂的真伪。2.权利1的特征在于可以鉴定混合制剂中蜈蚣的真伪，过程包括下列步骤：1)制备样品：蜈蚣粉末，蜈蚣水提物和醇提物、极限(高温、高压、长时间)条件提取的蜈蚣水提物和醇提物，蜈蚣与其他蛇类药材的混合制剂和极限(高温、高压、长时间)条件处理的蜈蚣与其他动物类药材的混合制剂。2)样品DNA提取：从样品中提取DNA。3)PCR反应：采用PCR方法得到PCR产物，93～95℃5min，30～40个循环(95℃30～45s，55～65℃30～45s，72℃30～45s)，72℃5min，得到扩增产物。4)电泳鉴定：根据扩增产物大小，鉴定蜈蚣真伪。3.权利2中样品：蜈蚣粉末，蜈蚣水提物和醇提物，极限条件提取的蜈蚣水提物和醇提物，蜈蚣混合制剂，极限条件处理的蜈蚣制剂：1)蜈蚣粉碎，得蜈蚣细粉。2)采用加热冷凝回流法提取，温度为100℃，料水比为1∶10，时间为2h，...
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