黄瓜霜霉菌孢子囊离体保存方法技术

本发明专利技术提供的是一种黄瓜霜霉菌孢子囊离体保存方法。它包括黄瓜霜霉菌孢子囊的保存处理方法及条件、保存后孢子囊萌发率及致病性的测定等过程。本发明专利技术的方法是将黄瓜霜霉菌孢子囊保存于１０％二甲基亚砜加５％脱脂乳的混合液中，并存放于－２０℃、－７０℃或预先在－２０℃条件下处理２４小时，然后在－７０℃的条件下进行保存。其中以预先在－２０℃冷冻处理２４小时，然后在－７０℃条件下保存的方法保存效果最好，保存１２个月后孢子囊的萌发率为４６％，接种黄瓜子叶７天后发病率与病情指数分别为５０％和４０，保持了较高的致病力。采用本发明专利技术的方法适于黄瓜霜霉病菌的离体长期保存，可以从根本上解决黄瓜霜霉菌离体保存致病力下降严重的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及的是一种黄瓜霜霉菌孢子囊长期离体保存方法。
技术介绍
黄瓜霜霉病是保护地黄瓜上的一种毁灭性病害。该病害是由鞭毛菌亚门，卵菌纲，霜霉科，古巴假霜霉菌〔Pseudoperonospora cubensis(Berk.&M.A.Curtis)Rostovzev〕侵染引起的一种气传病害。迄今为止，对该病害的生理分化及遗传多样性的研究尚不完善。究其原因主要是因为古巴假霜霉菌是专性寄生菌，用人工培养基无法培养和保存。目前菌种保存方法主要有①寄主活体保存在适宜环境条件下，定期将病菌接到新的寄主上。这是一种简单却费时的方法，并且要求一定的设备，但可较长期保存。②离体叶保存沈阳农业大学的傅淑云(1983)研究出了带菌叶的离体培养法，在-5℃条件下，可将病叶保存26天，但其孢子囊萌发率只有3.5％。台湾的Tsai W.(1987)研究的离体叶保存法，可使病叶保存1个月。Parkas小时(1989)用含有5％蔗糖液或者一定浓度激动素液的棉花保湿，可将病叶保存30d。③低温冷冻保存周凤珍等人1987年报导，采用低温保存，在-20℃条件下，孢子囊保存60天后仍有致病力。石延霞(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄瓜霜霉菌孢子囊离体保存方法，其特征是：采集黄瓜霜霉病新鲜病叶，冲去叶面上的杂物和原有的孢子囊，在２０℃～２５℃，保湿２４小时，待长出大量浓密新鲜的孢子囊之后，用消毒软毛刷将孢子囊刷入１０％二甲基亚砜与５％脱脂乳的混合保存液中，然后在－２０℃～－８０℃条件下保存。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张艳菊，秦智伟，周秀艳，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]