利用抗菌剂、农药、微生物的植物病害的防除方法、及新型枯草芽孢杆菌技术

一种抗菌剂，其包含：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者，前述枯草芽孢杆菌在通过使用了基质辅助激光解吸电离法的飞行时间型质谱法(MALDI‑TOF MS)进行的质谱分析中，在选自由3045.5±0.58的范围、6942.5±0.58的范围和9140.5±0.58的范围(m/z)组成的组中的至少1个质荷比(m/z)具有峰。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用抗菌剂、农药、微生物的植物病害的防除方法、及新型枯草芽孢杆菌
[相关申请的相互参照]本申请主张基于2016年3月4日申请的、日本专利申请第2016-042659号说明书(通过参照在该说明书中援用其全部公开内容)的优先权。本专利技术涉及利用抗菌剂、农药、微生物的植物病害的防除方法、及新型枯草芽孢杆菌。
技术介绍
农作物的栽培时，由微生物导致的对农作物的病害正成为问题。作为对于前述病害的处置方法，例如尝试了散布其它微生物且利用前述微生物所产生的抗菌物质来防除前述病害的方法。然而，如专利文献1记载的那样，尚不知晓对于水稻所感染的真菌等显示出抗菌活性的抗菌物质。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开2003-199558号公报
技术实现思路
专利技术要解决的问题因此，本专利技术的目的在于提供例如对于水稻所感染的真菌等显示出抗菌活性的、新型的利用抗菌剂、农药、微生物进行的植物病害的防除方法、及新型枯草芽孢杆菌。用于解决问题的方案为了实现前述目的而进行了深入研究，结果完成了以下的专利技术。本专利技术的抗菌剂为如下微生物，其包含：枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者，前述枯草芽孢杆菌在通过使用了基质辅助激光解吸电离法的飞行时间型质谱法(MALDI-TOFMS)进行的质谱分析中，在选自由3045.5±0.58的范围、6942.5±0.58的范围和9140.5±0.58的范围(m/z)组成的组中的至少1个质荷比(m/z)具有峰。本专利技术的农药包含前述本专利技术的抗菌剂。本专利技术的利用微生物的植物病害的防除方法(以下也称为“防除方法”)包括使前述本专利技术的抗菌剂与植物接触的接触工序。本专利技术的新型枯草芽孢杆菌(以下也称为“新型微生物”)为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，前述枯草芽孢杆菌在通过使用了基质辅助激光解吸电离法的飞行时间型质谱法(MALDI-TOFMS)进行的质谱分析中，在选自由3045.5±0.58的范围、6942.5±0.58的范围和9140.5±0.58的范围(m/z)组成的组中的至少1个质荷比(m/z)具有峰。专利技术的效果根据本专利技术，可以提供例如针对水稻所感染的真菌等显示出抗菌活性的、新型的利用抗菌剂、农药、微生物进行的植物病害的防除方法、及新型枯草芽孢杆菌。附图说明图1是实施例1中的培养后的琼脂培养基的照片。图2是示出实施例1中的质谱的结果的图。图3是示出实施例2中的各馏分的电泳的结果的照片。图4是示出实施例2中的各馏分的抗菌活性的照片。图5是示出实施例2中的各区域的抗菌活性的照片。图6是示出实施例2中的HPLC的分析结果的图。图7是示出实施例2中的包含电喷雾离子化的液相色谱质谱法的分析结果的图。具体实施方式关于本专利技术的抗菌剂，例如前述枯草芽孢杆菌和前述枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者是前述枯草芽孢杆菌和前述枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者中的显示出抗菌活性的抗菌物质，前述抗菌物质的分子量在聚丙烯酰胺凝胶电泳中为15KDa以下，且前述抗菌物质的碎片离子的质量在通过电喷雾离子化质谱法进行的质谱分析中，为1460±1的范围和1474±1的范围。关于本专利技术的抗菌剂，例如，前述抗菌剂是针对真菌的抗菌剂。前述真菌例如是选自由梨孢菌属(Pyriculariasp.)、丝核菌属(Rhizoctoniasp.)、木霉菌属(Trichodermasp.)、镰刀菌属(Fusariumsp.)和腐霉菌属(Pythiumsp.)组成的组中的至少一种真菌。关于本专利技术的防除方法，例如，前述植物为水稻。前述水稻例如是前述水稻的苗或种子(以下也称为“稻种”。)。＜抗菌剂＞关于本专利技术的抗菌剂，如上所述，其特征在于，其包含枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者，前述枯草芽孢杆菌在通过使用了基质辅助激光解吸电离法的飞行时间型质谱法(MALDI-TOFMS)进行的质谱分析中，在选自由3045.5±0.58的范围、6942.5±0.58的范围和9140.5±0.58的范围(m/z)组成的组中的至少1个质荷比(m/z)具有峰。本专利技术的抗菌剂的特征在于：包含前述枯草芽孢杆菌和前述枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者，前述枯草芽孢杆菌具有前述峰，其它构成和条件没有特别限制。本专利技术人等进行了深入的研究，结果发现：在利用MALDI-TOFMS进行的质谱分析中，具有前述峰的新型枯草芽孢杆菌(新型微生物)产生针对真菌、细菌等微生物显示出抗菌活性的抗菌物质。另外，前述抗菌物质的碎片离子例如在通过包含电喷雾离子化的液相色谱质谱法进行的质谱分析中，与公知的枯草芽孢杆菌所产生的、伊枯草菌素(iturin)、表面活性素(surfactin)、芬荠素(fengycin)等抗菌物质不同的质荷比具有峰，由此推断前述抗菌物质为新型的抗菌物质。因此，根据本专利技术，可以提供例如针对水稻的苗、稻种所感染的真菌、细菌等微生物显示出抗菌活性的新型的抗菌物质、包含其的新型微生物、包含前述新型微生物的培养物等的新的抗菌剂。在本专利技术中，抗菌活性可以是抑菌活性，也可以是杀菌活性。如下所述，将前述抗菌剂用于真菌时，前述抗菌活性例如可以是前述真菌的菌丝的伸长阻碍或抑制、前述真菌的分生孢子形成阻碍或抑制、及前述真菌的菌丝体的形成阻碍或抑制等的任意种。将前述抗菌剂用于细菌时，前述抗菌活性例如可以是前述细菌的增殖的阻碍或抑制、及灭菌的任意种。在本专利技术中，前述枯草芽孢杆菌在利用前述MALDI-TOFMS进行的质谱分析中，在选自由3045.5±0.58的范围、6942.5±0.58的范围和9140.5±0.58的范围组成的组中的至少1个、优选为在选自由3046、6943和9141、或3045、6942和9140(m/z)组成的组中的至少1个质荷比(m/z)具有峰。前述枯草芽孢杆菌例如可以具有上述峰中的任意1个峰、也可以具有多个峰，但优选具有全部峰。供于前述MALDI-TOFMS的枯草芽孢杆菌的培养方法和条件没有特别限制，例如，可列举出后述实施例的培养方法和条件。用于利用前述MALDI-TOFMS进行的质谱分析的质谱仪和质谱条件例如可分别列举出AXIMA(注册商标)ConfidenceMALDI-TOF型质谱仪(株式会社岛津制作所制)和下述质谱分析条件。(质谱分析条件)加速电压：20kV(线性模式)离子源部的激光：波长337nm的氮激光脉冲重复值：3纳秒激光辐射功率：50Hz以下腔室内的真空度：1.0E-3Pa以下前述新型微生物的培养物没有特别限制，例如可列举出前述新型微生物的菌体、前述新型微生物的培养上清液、前述新型微生物的菌体提取物等。另外，本专利技术的抗菌剂还可以进一步包含除了前述新型微生物以外的微生物的培养物。作为除了前述新型微生物以外的微生物的培养物，没有特别限制，例如可列举出其它微生物的菌体、前述其它微生物的培养上清液、前述其它微生物的菌体提取物等。前述培养物例如也可以是前述菌体的处理物、前述培养上清液的处理物、前述菌体提取物的处理物等。前述处理物没有特别限制，例如可列举出：前述培养物的浓缩物、干燥物、冷冻干燥物、溶剂处理物、表面活性剂处理物、酶处理物、蛋白质馏分、超声波处理物、磨碎处理物、前述抗菌物质的纯化物等。另外，前述培养本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗菌剂，其包含：枯草芽孢杆菌(

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.04 JP 2016-0426591.一种抗菌剂，其包含：枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者，所述枯草芽孢杆菌是如下微生物：在通过使用了基质辅助激光解吸电离法的飞行时间型质谱法(MALDI-TOFMS)进行的质谱分析中，在选自由3045.5±0.58的范围、6942.5±0.58的范围和9140.5±0.58的范围(m/z)组成的组中的至少1个质荷比(m/z)具有峰。2.根据权利要求1所述的抗菌剂，其中，所述枯草芽孢杆菌和所述枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者是所述枯草芽孢杆菌和所述枯草芽孢杆菌的培养物的至少一者中的显示出抗菌活性的抗菌物质，所述抗菌物质的分子量在聚丙烯酰胺凝胶电泳中为15KDa以下，且所述抗菌物质的碎片离子的质量在利用电喷雾离子化质谱法进行的质谱分析中，为1460±1的范围和1474±1的范围。3.根据权利要求1或2所述的抗菌剂，其中，所述抗菌剂是针对真菌的抗菌剂。...

【专利技术属性】
技术研发人员：原富次郎，高塚由美子，杉村祐哉，横田健治，
申请(专利权)人：有机科技农业株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP