苯酚降解微生物菌剂、固定化小球及制备方法技术

一种苯酚降解微生物菌剂、固定化小球及制备方法，所述微生物菌剂中的微生物从自来水厂的生物锰砂滤池的表层滤料中分离提取，经过在含锰MSVP液体培养基、含锰MSVP固体培养基中培养筛选、以及在TSB培养基中活化后，制成微生物菌剂。本发明专利技术还提供了将该微生物菌剂制备成微生物固定化小球的方法，制备了以二氧化硅或二氧化锰和海藻酸钠的交联聚合产物为载体，包埋微生物菌剂而形成的凝胶小球。所述的微生物菌剂可应用于地下水的低温无氧中性条件，快速降解苯酚。所述的微生物菌剂固定小球可以提供稳定降解环境，更适应毒性环境，处理浓度更高的地下水苯酚污染。

Phenol degrading microbial inoculants, immobilized pellets and preparation methods

An agent, immobilized microbial degradation of phenol and preparation method of the microorganism agent in microorganisms extracted from the biological manganese sand filter tap water factory of the surface of the filter, through the medium, in manganese containing MSVP liquid medium, and screened in TSB medium containing MSVP solid culture activated manganese made, microorganism. The invention also provides a method for preparing microorganism immobilized pellets by using the microbial agent, and has prepared a gel ball formed by embedding microbial inoculants on the cross linking polymerization product of silica or manganese dioxide and sodium alginate. The microbial agent described in this paper can be applied to the low temperature oxygen free neutral condition of groundwater and the rapid degradation of phenol. The micropellet of the microbial inoculant can provide a stable degradation environment, more suitable for the toxic environment, and treat the higher concentration of the groundwater phenol pollution.

【技术实现步骤摘要】
苯酚降解微生物菌剂、固定化小球及制备方法
本专利技术属于微生物修复地下水有机污染物
，具体涉及一种苯酚降解微生物菌剂及其制备方法与应用。
技术介绍
苯酚是常见的有机污染物，是毒性最大的酚类化合物，在自然状态下难以降解，残留物在环境中可以维持较长时间，长期污染环境。苯酚是一种重要的有机合成原料，在造纸、农药、纺织、染料、医药、塑料等行业以及生产表面活性剂、炸药、化肥、脱漆剂、抗氧化剂、固化剂等方面有广泛应用。苯酚对人体和环境有极大危害。与人体接触会导致皮肤灼伤，神经、肝肾等损伤，长期饮用被酚污染的水可引起头昏、头痛、贫血、蛋白质凝固等各种症状，严重者引起蛋白尿及各种神经系统疾病。水体中低浓度酚(1.5-9mg/L)能使鱼类血细胞数目减少，机体破坏；较高浓度酚(5-20mg/L)能使鱼急性中毒而死亡。当饮用水中含酚0.002-0.015mg/L时，加氯消毒会产生毒性更大的氯酚，具有恶臭味，严重影响饮用水的质量。中国早在2001年就将苯酚列入“优先污染物”，并规定III类地下水苯酚浓度的最大限值为0.002mg/L。我国部分地区地下水苯酚污染程度较为严重，污染浓度在2mg/L以上，因本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苯酚降解微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选取自来水厂的生物锰砂滤池的表层滤料，对所述表层滤料接种和活化培养制备第一菌液；(2)将第一菌液接种至含锰MSVP液体培养基中培养，生成黑褐色颗粒物，制成第二菌液，其中，含锰MSVP液体培养基为加入有Mn

【技术特征摘要】
1.一种苯酚降解微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选取自来水厂的生物锰砂滤池的表层滤料，对所述表层滤料接种和活化培养制备第一菌液；(2)将第一菌液接种至含锰MSVP液体培养基中培养，生成黑褐色颗粒物，制成第二菌液，其中，含锰MSVP液体培养基为加入有Mn2+浓度为20-40mg/L的MnCl2的MSVP液体培养基，pH为7.25-7.3；(3)将第二菌液接种至含锰MSVP固体培养基中，倒置培养，生成黑褐色颗粒物，挑取生成黑褐色颗粒物的菌落接种至1-3％TSB培养基，活化后制成微生物菌剂，其中，含锰MSVP固体培养基为加入有0.1-0.5mLMn2+浓度为1g/L的MnCl2溶液的MSVP固体培养基，pH为7.25-7.3。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，接种和活化培养方法包括以下步骤：(11)选取的自来水厂的水源为高锰地下水，将所述表层滤料接种至加入2.38g/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、pH为7.25-7.3的LB培养基中，活化12-24h；(12)将活化后的菌液再次接种LB培养基中培养12-24h，制备所述第一菌液。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述第一菌液在含锰MSVP液体培养基中的接种量按体积计为1-1.5％，接种时OD600值为0.9-1.1，培养温度为25-28℃，培养时间为12-24d；所述步骤(3)中，所述第二菌液在含锰MSVP固体培养基中的接种量为0.5-1mL，接种时OD600值为0.9-1.1，培养温度为25-28℃，培养时间为10-20d；筛选的菌落在1-3％质量含量的TSB培养基中在25-28℃温度下，活化12-24小时。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)，中含锰MSVP液体培养基成分为：(NH4)2SO40.24g/L，MgSO4·7H2O0.2g/L，无水CaCl20.06g/L，KH2PO40.02g/L，Na2HPO4·12H2O0.03g/L，丙酮酸钠0.24g/L，4-羟乙基哌嗪乙磺酸2.38g/L，VB120.002g/L，Mn2+浓度为20-40mg/L的MnCl2，pH为7.25-7.3；所述步骤(3)中，含锰MSVP固体培养基成分为：(NH4)2SO40.24g/L，MgSO4·7H2O0.2g/L，无水CaCl20.06g/L，KH2PO40.02g/L，Na...

【专利技术属性】
技术研发人员：席北斗，姜永海，杨昱，廉新颖，孙晓玲，马志飞，彭星，徐祥健，
申请(专利权)人：中国环境科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京,11