微流控放射免疫两步检测法制造技术

本发明专利技术公开一种微流控放射免疫两步检测法，包括微流控板和测试仪，按以下步骤进行检测首先将放射性标记抗体滴加在微流控板的标记物区，接着将样液滴在微流控板的样品区，间隔X分钟后利用测试仪测试并分析微流控板上检测区的放射性强度，采用本发明专利技术的有益效果是由于放射性元素为短半衰期，不适宜采用普通的荧光标记抗体或抗原预包备的方法，本发明专利技术提供的方法中，直接在检测前滴加标记抗体或抗原，不再需要事先进行预备包被，放射性标记抗体或抗原为单独包装，放射性标记抗体在快速检测领域的使用不再受限制。

Two step detection method for microfluidic radioimmunoassay

The invention discloses a microfluidic radioimmunoassay two step detection method, including microfluidic board and testing instrument, the following steps were detected first, radiolabeled antibodies dripped on the marker region microfluidic board, then the sample droplet in the microfluidic sample plate area, using radioactive strength tester test and analysis in microfluidic detection zone on the interval of X minutes, the beneficial effect of the invention is due to radioactive elements for short half-life, not suitable for ordinary fluorescent labeled antibody or antigen pre package preparation method, the method of the invention, directly in the detection before dropping labeled antibody or antigen, no longer need to advance preparation of coated, radiolabeled antibody or antigen as separate packaging, the use of radiolabeled antibodies in the rapid detection field is no longer restricted.

【技术实现步骤摘要】
微流控放射免疫两步检测法
本专利技术涉及快速检测
，具体涉及一种微流控放射免疫两步检测法。
技术介绍
随着材料科学、微纳米加工技术和微电子学所取得的突破性进展，微流控芯片也得到了迅速发展。微流控芯片(microfluidicchip)又称为“芯片上的实验室”(lab-on-a-chip)，它是以微机电加工技术为基础，在硅片、玻璃或聚二甲基硅氧烷(PDMS)等材料上制作微通道网络，使得可控流体在微通道网络中流动，从而实现生物和化学领域中的反应、分离、检测等操作。放射免疫检测技术是开始应用较早的一项标记免疫技术，放射免疫检测技术的特点是：灵敏度高，能对抗体含量很低的样本进行检测。与现有的其他免疫检测技术相比，比如荧光免疫检测，放射性免疫检测的检测灵敏度更高，并且试剂成本也较荧光免疫检测低。但是，现有的放射免疫检测技术也存在一些缺点：比如，有潜在的放射污染可能，因为需要用放射性物质标记抗原，所以，检测后的废弃物具有放射性。现有的放射性免疫检测是将样本、放射性标记抗原和一定量的抗体加入试管，然后进行一系列的复杂、多步操作后才能进行检测，操作复杂会带来更大的测试误差，同时产生较多的放射性废物，这些废弃物需要专门的回收处理，这就给废弃物的回收处理带来了较大的困难。
技术实现思路
为解决以上技术问题，本专利技术提供一种微流控放射免疫两步检测法。技术方案如下：一种微流控放射免疫两步检测法，其关键在于：包括微流控板和测试仪，按以下步骤进行检测：首先将放射性标记抗体或抗原滴加在所述微流控板的标记物区，接着将样液滴在微流控板的样品区，间隔X分钟后利用测试仪测试并分析微流控板上检测区的放射性强度。采用上述技术方案由于放射性元素为的短半衰期，不适宜采用普通的荧光标记抗体或抗原预包备的方法，本专利技术提供方法中，直接在检测前滴加标记抗体或抗原，不再需要事先进行预备包被，放射性标记抗体或抗原为单独包装，放射性标记抗体在快速检测领域的使用不再受限制。作为优选：上述放射性标记抗体为放射性碘标记抗体。上述放射性碘为碘125。上述微流控板包括芯板和底板，所述芯板覆盖在所述底板上，所述芯板的内侧面上顺着样液的流动方向设有依次连通的样品区、标记物区和检测区，所述芯板上对应样品区和标记物区分别设有加样孔和标记物加入孔，所述检测区上顺着样液的流动方向依次设有检测反应带和反应参考带。采用该方案样液通过芯板上预留有加样孔和标记物加入孔，方便滴加样液或者标记抗体。上述测试并分析微流控板上检测区的结果的方法为：将所述微流控板插入测试仪，分别测试检测反应带和反应参考带的放射性强度，并根据标准曲线计算样液中目标抗原的浓度。采用该方案可直接计算出目标抗原的具体浓度，从而达到定量检测的目的。上述制作标准曲线的方法为：配置具有浓度梯度的标准抗原，在所述微流控板上滴加所述放射性标记抗体后，滴加不同浓度的标准抗原，间隔X分钟后利用测试仪分析检测反应区和反应参考区的放射性强度，以检测反应区和反应参考区的放射性强度的比值为纵坐标、以标准抗原浓度为横坐标绘制标准曲线。其中X根据免疫反应特征而定，根据不同的反应X的取值可为3min、5min或10min不等。采用此方案由于微流控板的生产差异、样品与标记物的溶解反应程度等的不同带来的误差会同时反应在检测反应区和反应参考区，导致二者的放射性强度同时升高或降低，以检测反应区和反应参考区的比值作为标准曲线的纵坐标则能有效的降低这种误差带来的影响。上述测试仪包括检测箱，该检测箱顶面嵌设有控制面板，前端面开有微流控板插口，微流控板插口用于插装所述微流控板，所述检测箱内部设置有检测机构；所述检测机构设置有抗射线干扰铅块，抗射线干扰铅块的底部开有竖直向下的射线入射孔，该射线入射孔的孔口处设置有闪烁晶体，孔底安装有光电倍增管，射线入射孔中部安装有光耦合器；所述微流控板插口处设置有传送机构，该传送机构将微流控板的反应参考带和检测反应带依次水平传送到所述闪烁晶体的正下方；所述控制面板、光电倍增管和传送机构分别与控制器连接。采用上述方案在检测时，只需要把滴加了放射性标记抗体和样液的微流控板插入判读仪，判读仪即可对微流控板进行检测，操作简单。检测完毕后，废弃物被存放在微流控板中，便于废弃物的回收处理，也对操作区域的放射性污染达到最小程度。有益效果：采用本专利技术的有益效果是由于放射性元素为短半衰期，不适宜采用普通的荧光标记抗体或抗原预包备的方法，本专利技术提供的方法中由于在微流控板上预留了样品孔和标记抗体孔，不再需要事先制备包被，检测时直接将放射性标记抗体、样品分别滴加在标记物池和样品池内，样品通过微流通道进入标记物池内与里面刚加入的放射性标记抗体直接反应，放射性标记抗体在快速检测领域的使用不再受限制。附图说明图1为微流控板的结构示意图；图2为图1中a部的放大图；图3为图1的A-A’剖视图；图4为图3中b部的放大图；图5为测试仪的立体结构示意图；图6为测试仪的内部结构示意图；图7为检测机构的机构示意图；图8为传送电路的电路图；图9为判读仪的判读方法流程图；图10为确认微流控板正常流程图；图11为判读仪的检测流程图；图12为云数据中心生成结论确认信息的流程图。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步说明。实施例1，如图1-4所示，一种微流控板，包括芯板1和底板2，所述芯板1覆盖在所述底板2上，所述芯板1的内侧面上顺着液体的流动方向依次设有样品区3、标记物区4以及检测区7，所述标记物区4通过缓流通道18与样品区3连通，所述检测区7通过微通道17与所述标记物区4连通，所述检测区7上顺着液体的流动方向依次设有检测反应带5和反应参考带6，所述底板2上对应样品区3和标记物区4分别设有加样孔9和标记物加入孔10。所述底板2为透明板，所述缓流通道18和微通道17分别由芯板1和底板2之间的间隙形成，所述底板2和所述检测区7之间形成微流虹吸通道19，所述微流虹吸通道19的进液端通过所述微通道17和所述标记物区4连通。所述样品区3和标记物区4之间的芯板1上设有样液减速区11，所述样品区3和样液减速区11内顺着液体的流通方向分别设有样液减速凸台12，所述样品区3和样液减速区11之间设有样液溢流台阶21，液体可通过该样液溢流台阶21溢流进入样液减速区11，所述缓流通道18通过所述样液减速区11，所述加样区3、标记物区4和样液减速区11分别向外凹陷形成槽状，所述加样区3的凹陷深度小于所述样液减速区11的凹陷深度，所述检测区7的进液端设有混合液流速控制区13，该混合液流速控制区13向上凹陷形成槽状，所述混合液流速控制区13的凹陷深度小于所述标记物区4的凹陷深度，所述混合液流速控制区13内设有混合液减速凸台，所述检测区7出液端后方的所述芯板1上设有废液收集池14，所述微流虹吸通道19的出液端与该废液收集池14连通，所述废液收集池14内设有废液减速凸台15，所述废液收集池14入口处的废液减速凸台15的直径大于所述废液收集池14出口处的废液减速凸台15的直径。从图中还可以看出，所述样液减速区11两侧的所述芯板1上分别设有透气孔16，所述检测区7两侧的所述芯板1上设有条形的底板固定台20，所述底板2的两侧下部通过粘接剂粘接到对应的所述底板固定台20上，所述芯板1上还设置有二维码(图中未本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微流控放射免疫两步检测法，其特征在于：包括微流控板和测试仪，按以下步骤进行检测：首先将放射性标记抗体或抗原滴加在所述微流控板的标记物区(4)，接着将样液滴在微流控板的样品区(3)，间隔X分钟后利用测试仪测试并分析微流控板上检测区(7)的放射性强度。

【技术特征摘要】
1.一种微流控放射免疫两步检测法，其特征在于：包括微流控板和测试仪，按以下步骤进行检测：首先将放射性标记抗体或抗原滴加在所述微流控板的标记物区(4)，接着将样液滴在微流控板的样品区(3)，间隔X分钟后利用测试仪测试并分析微流控板上检测区(7)的放射性强度。2.根据权利要求1所述的微流控放射免疫两步检测法，其特征在于：所述放射性标记抗体为放射性碘标记抗体。3.根据权利要求2所述的微流控放射免疫两步检测法，其特征在于：所述放射性碘为碘125。4.根据权利要求1、2或3所述的微流控放射免疫两步检测法，其特征在于：所述微流控板包括芯板(1)和底板(2)，所述芯板(1)覆盖在所述底板(2)上，所述芯板(1)的内侧面上顺着样液的流动方向设有依次连通的样品区(3)、标记物区(4)和检测区(7)，所述芯板(1)上对应样品区(3)和标记物区(4)分别设有加样孔(9)和标记物加入孔(10)，所述检测区(7)上顺着样液的流动方向依次设有检测反应带(5)和反应参考带(6)。5.根据权利要求4所述的微流控放射免疫两步检测法，其特征在于：所述测试并分析微流控板上检测区(7)的放射性强度的方法为：将所述微流控板插入测试仪，分别测试检测反应带(5)和反应参考带(6)的放射性强度，并根据标准曲线计算样液中目标抗原的浓度。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘江，王雷，徐栋，段志超，
申请(专利权)人：天津派普大业仪器科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12