一种突变体植株及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种突变体植株及其制备方法，属于植物生物技术领域。所述突变体植株包括：第一突变体植株和第二突变体植株中的至少一种，所述第一突变体植株在Xa21基因编码区的第1869位～1878位碱基缺失，所述第二突变体植株在所述Xa21基因的第1867位碱基后插入A和T两个碱基。本发明专利技术实施例提供了一种突变体植株，该突变体植株在Xa21基因的第一外显子处发生突变，使得该突变体植株丧失了Xa21基因的功能，在该突变体植株上，没有骨架载体序列残留，这使得突变体植株成功的排除了位置效应和骨架载体序列对Xa21基因功能的影响，且和受体植株的主要农艺性状保持一致，这使得该突变体植株能够准确的判定Xa21基因的效应，是较为理想的研究Xa21基因抗病机理的材料。

【技术实现步骤摘要】
一种突变体植株及其制备方法
本专利技术涉及植物生物
，特别涉及一种突变体植株及其制备方法。
技术介绍
水稻是我国重要的粮食作物，而各种病害严重的影响水稻的产量。水稻白叶枯病是影响水稻产量最严重的病害之一。利用水稻抗病基因选育抗病品种是控制水稻病害最经济有效的方法。1995年，song等通过图位克隆技术克隆了第一个水稻白叶枯病抗病基因Xa21基因。Xa21基因对白叶枯病具有广谱高抗性，因此，一直以来，Xa21基因不仅被广泛应用于水稻的抗病育种中，其介导的抗病机理也是研究的热点。对Xa21基因介导的抗病机理的研究，理想的研究材料为只在Xa21基因上存在差异的两个材料。通过将含Xa21基因的抗性材料和不含Xa21基因的材料进行对比，研究Xa21基因介导的抗病机理。其中，抗性材料的获得主要是通过转基因技术或回交技术获得的材料。在实现本专利技术的过程中，专利技术人发现现有技术至少存在以下问题：转基因技术使目的基因在受体染色体随机整合以及骨架载体等共同整合，使得通过转基因技术获得的抗性材料受到位置效应和骨架载体序列的影响，从而难以准确判定Xa21基因的效应；回交技术获得的抗性材料受到与Xa本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种突变体植株，其特征在于，所述突变体植株包括：第一突变体植株和第二突变体植株中的至少一种，所述第一突变体植株在Xa21基因编码区的第1869位～1878位碱基缺失，所述第二突变体植株在所述Xa21基因编码区的第1867位碱基后插入A和T两个碱基。

【技术特征摘要】
1.一种突变体植株，其特征在于，所述突变体植株包括：第一突变体植株和第二突变体植株中的至少一种，所述第一突变体植株在Xa21基因编码区的第1869位～1878位碱基缺失，所述第二突变体植株在所述Xa21基因编码区的第1867位碱基后插入A和T两个碱基。2.根据权利要求1所述的突变体植株，其特征在于，所述第一突变体植株的序列如序列表中SEQIDNO:1所示，所述第二突变体植株的序列如序列表中SEQIDNO:2所示。3.一种制备权利要求1或2所述的突变体植株的方法，其特征在于，所述方法包括：将所述Xa21基因编码区的第1852位～1871位碱基作为编辑靶点；将所述编辑靶点引入启动子驱动的编辑靶点表达框；将所述编辑靶点表达框插入骨架载体上，得到重组载体；将所述重组载体转入农杆菌中，得到重组菌；将所述重组菌转入含有所述Xa21基因的抗性材料中得到T0代转基因植株；将所述T0代转基因植株进行PCR鉴定，获得阳性T0代转基因植株；将所述阳性T0代转基因植株进行白叶枯菌侵染，得到感病的T0代突变植株；将所述感病的T0代突变植株进行PCR鉴定，筛选出所述第一突变体植株和所述第二突变体植株。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述将所述编辑靶点引入启动子驱动的编辑靶点表达框，包括：以含U6表达框的载体作为模板，采用靶点正向引物与模板反向引物进行第一轮PCR扩增，得到第一轮扩增产物，采用靶点反向引物与模板正向引物进行第二轮扩增，得到第二轮扩增产物；以所述第一轮扩增产...

【专利技术属性】
技术研发人员：高利芬，周俊飞，李甜甜，彭海，李丽丽，陈利红，
申请(专利权)人：江汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42