一种微型器官的处理方法技术

本发明专利技术提供了一种微型器官的处理方法，包括：依次将固定后的微型器官在透析液Ⅰ中1～10℃透析2～5天，在透析液Ⅱ中‑40～‑15℃透析4～8h，所述透析液Ⅰ配方为1M Tris碱液中含10%的Triton‑X 100、2%的BSA以及0.05M的NaCl，pH 6.8；透析液Ⅱ配方为体积比为4:1的乙醇和二甲基亚砜。本发明专利技术是对微型器官进行定型和整体通透处理，保持其原有形态，实现器官和组织细胞结构形态不变而大分子物质能充分渗透到各个部位的目的。经过这样处理的微型器官可以利用分子物质的特异性结合反应，再通过相应的观察手段如荧光显微镜等，就可以准确、灵敏地在微型器官上对分子进行细胞或亚细胞定位、定性以及相对定量分析。本发明专利技术针对生物领域微小动物内部器官很小、难以实施组织切片技术的困境，发明专利技术了一种适合体内微型器官在分子和细胞水平上进行研究的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种微型器官的处理方法
本专利技术涉及组织器官的处理方法，特别涉及动物体内的微小组织器官。技术背景动物机体是各种组织器官的结合体，动物的生命活动必需依靠各个组织器官正常行使各自的生理学和生物学功能来维持。研究组织器官是深入认识动物以及控制和利用动物的前提基础和重要纽带。医学诊断上常用的组织器官病理检测方法-组织化学，伴随分子及细胞生物学的发展，在生物领域升华为免疫组织化学。免疫组织化学是将抗原与抗体结合的免疫反应特异性和组织化学的可见性巧妙地结合起来，在细胞、亚细胞水平检测抗原物质，对其进行定位、定性及相对定量分析，从而可大大提高研究深度和水平。因此，免疫组织化学技术50年代以来得到快速发展并广泛应用各个研究领域。科学研究中通用的免疫组化技术是通过对保持原有形态的组织进行连续切片、以每张切片作为抗原-抗体特异性反应单元为基础来进行蛋白分子在组织中的定性、定位等分析的。但免疫组织化学实验包括固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→脱蜡→水化→抗原修复→抗体结合染色等多个环节，步骤繁琐，技术难度高，要想最终获得满意结果，需集扎实的技术理论和丰富的操作经验为一体方可如愿。稍有不慎，组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微型器官的处理方法，包括：依次将固定后的微型器官在透析液Ⅰ中1～10℃透析2～5天，在透析液Ⅱ中‑40～‑15℃透析4～8h，所述透析液Ⅰ配方为1M Tris碱液中含10%的Triton‑X 100、2%的BSA 以及0.05M 的NaCl，pH 6.8；透析液Ⅱ配方为体积比为4:1的乙醇和二甲基亚砜(DMSO)。

【技术特征摘要】
1.一种微型器官的处理方法，包括：依次将固定后的微型器官在透析液Ⅰ中1～10℃透析2～5天，在透析液Ⅱ中-40～-15℃透析4～8h，所述透析液Ⅰ配方为1MTris碱液中含10%的Triton-X100、2%的BSA以及0.05M的NaCl，pH6.8；透析液Ⅱ配方为体积比为4:1的乙醇和二甲基亚砜(DMSO)。2.如权利要求1所述的微型器官的处理方法，所述固定是采用4%的多聚甲醛（溶于0.1MPBS）在1～10℃中浸泡微型器官12～16h。3.如权利要求1或2所述微型器官的处理方法，包括采用体积比为1:1000的Tween-20和0.01MPBS配置的处理液中轻微震荡微型器官4次，固定前1次，固定后透析前1次，透析后2次。4.如权利要求1或2所述微型器官的处理方法，所述处理液处理步骤为两段式，每段采...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈萍，李田，张亮，陈曦，李亚腾，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50