一种寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗制造技术

本发明专利技术提供了一种寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，属于生物制品制备技术领域。本发明专利技术的联合灭活疫苗中含有0.5‑10ug/ml黄热病毒和0.5‑10ug/ml寨卡病毒。本发明专利技术还提供了寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗的制备方法，包括黄热病毒和寨卡病毒的接种、纯化和灭活步骤，其中黄热病毒接种MOI为0.01‑1PFU/ml，寨卡病毒接种MOI为0.001‑0.1CCID50/ml。本发明专利技术的疫苗能够同时免疫寨卡病毒和黄热病毒，避免了减毒疫苗导致的感染和过敏反应，具有良好的防控寨卡病毒和黄热病毒引起疾病的能力。

A Zika virus and yellow fever virus combined vaccine

The invention provides a Zika virus and yellow fever virus combined inactivated vaccine preparation, which belongs to the technical field of biological products. The invention of the combined inactivated vaccine containing 0.5 10ug/ml and 0.5 yellow fever virus 10ug/ml Zika virus. The invention also provides a method for preparing Zika virus and yellow fever virus combined with inactivated vaccine, including yellow fever virus and Zika virus inoculation, purification and inactivation steps, including yellow fever virus inoculation of MOI was 0.01 1PFU/ml, Zika virus inoculated MOI 0.001 0.1CCID50/ml. The invention of the vaccine to immune Zika virus and yellow fever virus, avoid attenuated vaccine induced infection and allergic reactions, has good prevention and control of Zika virus and yellow fever virus ability to cause disease.

【技术实现步骤摘要】
一种寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗
本专利技术属于生物制品制备
，具体地说，涉及一种含有寨卡病毒和黄热病毒的联合灭活疫苗。
技术介绍
目前全球广泛使用的黄热疫苗均为使用17D减毒株接种鸡胚组织制备的。我国自1953年开始生产黄热疫苗，至今已有50余年。多年临床应用表明，减毒黄热疫苗较安全有效，但也有因注射减毒黄热疫苗引起的严重副反应，主要是与黄热病毒有关的嗜内性疾病(yellowfeverassociatedviscerotropicdisease,YEL-AVD)和嗜神经性疾病(yellowfeverassociatedneurotropicdisease,YEL-AND)。YEL-AVD是一种引发肝脏和其它脏器急性爆发的感染，可导致60％的死亡率。而YEL-AND引发神经性疾患，可导致1-2％死亡率。从安全角度出发，本专利技术人利用细胞培养黄热病毒17D株，制备灭活疫苗，可杜绝YEL-AND和YEL-AVD的发生，并且避免了受试者因鸡胚导致的过敏反应。寨卡病毒自20世纪中期发现，主要在南美、非洲以及东南亚等热带地区流行，尚无疫苗保护。而2015年至2016年，在巴西由寨卡病本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，含有寨卡病毒和黄热病毒，且两种病毒均灭活。

【技术特征摘要】
1.一种寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，含有寨卡病毒和黄热病毒，且两种病毒均灭活。2.根据权利要求1所述的寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，含有0.5-10ug/ml黄热病毒和0.5-10ug/ml寨卡病毒。3.根据权利要求1所述的寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，含有1-8ug/ml黄热病毒和1-8ug/ml寨卡病毒。4.根据权利要求1所述的寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，含有3-6ug/ml黄热病毒和3-6ug/ml寨卡病毒。5.根据权利要求1所述的寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，所述黄热病毒为黄热病毒17D，用于培养黄热病毒17D的宿主细胞为Vero细胞。6.根据权利要求1-5任一所述的寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，含有0.25％-1％谷氨酸钠、0.5％-1％甘露醇、0.5％-1％甘氨酸氧化三甲胺及0.2％-0.62％氢氧化铝，所述％均为质量体积比。7.根据权利要求1-5任一所述的寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗，其特征在于，疫苗pH为7.0-8.0。8.一种寨卡病毒与黄热病毒联合灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括制备黄热病毒灭活液、制备寨卡病毒灭活液、将两种病毒灭活液按照蛋白含量进行稀释后混合，添加添加剂，使联合疫苗中含有0.5-10ug/ml黄热病毒和0.5-10ug/ml寨卡病毒。9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：制备黄热病毒灭活液的方法包括以下步骤：(1)黄热病毒按照分种或混种的方式接种宿主细胞MOI为0.01-1PFU/ml，培养温度25-37℃，细胞病变60％-100％时收获病毒液；(2)黄热病毒收获液澄清、超滤后得到浓缩液，采用两步层析法纯化浓缩液，得到黄热病毒纯化液；(3)黄热病毒纯化液过滤，调节pH值7.5-8.5，灭活即得。10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中黄热病毒按照分种或混种的方式接种宿主细胞MOI为0.1-1PFU/ml。11.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中培养温度为33-37℃，细胞病变60％-85％时收获病毒液。12.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中灭活是向黄热病毒纯化液中添加0.05-0.2％β丙内酯，于4℃下搅拌灭活20-26小时后，37...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴君兰，吕哲，王琳，李育蓉，郑翔，姜德玉，姚志东，高强，尹卫东，
申请(专利权)人：北京科兴生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11