大戟二萜千金子二萜A的制备方法和应用技术

一种大戟科千金子二萜Epoxyboetiranes A的制备方法和应用，采用液相色谱技术从千金子中提取千金子二萜A，该方法通过色谱柱、溶解液、流动相等的合理选择，使得整个分离纯化方法切实可行，且得到千金子二萜A纯度高，最高可达98%以上，整个操作流程简便，分离效率高。千金子二萜A经细胞毒活性实验，对部分肿瘤细胞株具有较好的细胞毒活性，可作为抗癌药物的先导化合物，因此显示了较好的应用前景。

Preparation and application of two terpenoid two terpenoid A from Euphorbia Euphorbia

Preparation method and application of Euphorbiaceae Leptochloa Epoxyboetiranes two terpene A, extraction of Leptochloa A from two terpene Leptochloa by liquid chromatography, the method through reasonable selection of chromatographic column, dissolved liquid flow, equal, purification method is feasible and makes the whole separation, get thousands of gold two from A high purity up to 98%, the whole operation process is simple, high separation efficiency. The two terpene A of Euphorbia chinensis has good cytotoxicity to some tumor cell lines through cytotoxicity test. It can be used as a leading compound of anticancer drugs, so it shows a good application prospect.

【技术实现步骤摘要】
大戟二萜千金子二萜A的制备方法和应用
本专利技术属于特色民族药用植物中的有效成分提取分离以及活性筛选的
，具体涉及一种大戟二萜类化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
千金子系大戟科植物续随子的干燥成熟种子,是我国传统中药材之一。千金子性温,味辛,有小毒,主要功效为逐水消肿、破血消瘤,用于治疗水肿、痰饮、积滞胀满、二便不通、血癖经闭,外治顽癣、疵赘。在国外,该植物种子早有用于癌症治疗的记载,并且其甲醇提取物对于抗恶性肿瘤相关活性的初步筛选测定中已显示具有抗癌的效果。就是这样的一类化合物,是广泛存在于大戟科植物的一种重要的天然活性成分,其结构如下：。
技术实现思路
本专利技术的第一目的是提供一种大戟二萜类化合物；第二目的在于提供所述大戟二萜类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述大戟二萜类化合物在制备抗癌中的应用。本专利技术的第一目的是这样实现的，所述的大戟二萜类化合物是以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，其结构式为：所述的大戟二萜A化合物，其特征是：分子式为C26H36O8，该化合物命名千金子二萜A，英文名为EpoxyboetiranesA。本专利技术的第二目的是这样实现的，所述的大戟二萜类化合物是以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，具体为：一种权利要求1所述的大戟二萜类化合物的制备方法，其特征在于以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，具体为：A、样品浸膏有机溶剂提取过程：将大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，或者冷浸提取2~5次，每次3天，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；B、有机溶剂萃取：A步骤所得的浸膏a中加入重量比1~2倍量的乙醇，用与乙醇等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；C、硅胶柱层析：将B步骤所得的浸膏b用重量比1.5~3倍量的甲醇或者丙酮溶解，用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样，然后上硅胶柱层析（装柱硅胶为160~200目），用量为浸膏b重量6~10倍量；用体积比为1:0~0:1的混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；D、高效液相色谱分离：将以体积含量50~90%的石油醚乙酸乙酯溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的大戟二萜类化合物千金子二萜A；该步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以60-80%的甲醇或者45~75%的乙腈为流动相，流速8~12ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为202~280nm，每次进样10~100μL，收集10~40min的色谱峰，多次累加后蒸干。即得所述的大戟二萜类化合物千金子二萜A。根据权利要求3所述的大戟二萜类化合物的制备方法，其中A步骤所述的有机溶剂为100%的二氯甲烷或70~100%的丙酮。根据权利要求3所述的大戟二萜类化合物的制备方法，其中B步骤所述的有机溶剂为乙酸乙酯、石油醚、氯仿或二氯甲烷。根据权利要求3所述的大戟二萜类化合物的制备方法，其中C步骤所述的混合有机溶剂石油醚和乙酸乙酯的体积配比为20:1,9:1,8:2,7:3,6:4和1:1。本专利技术大戟二萜类千金子二萜结构是通过核磁共振和质谱测定方法确定为大戟二萜类化合物，并表征其具体结构为：化合物千金子二萜A能通过本专利技术的方法分离出来。本专利技术的第三目的是这样实现的，所述的大戟二萜类化合物在制备抗癌中的应用。本专利技术的第三目的是以千金子二萜A为原料，经对白血病急性早幼粒NB4细胞、肺腺癌A549细胞、人骨髓神经母细胞瘤SHSY5Y细胞、人前列腺癌PC3细胞、人乳腺癌MCF7细胞的细胞毒别达5.8、6.5、和8.6μM。本专利技术化合物结构简单活性好，可作为抗癌的先导性化合物，在药物发现方面有良好的应用前景。附图说明图1为化合物千金子二萜A的核磁共振碳谱（13CNMR）。图2为化合物千金子二萜A的核磁共振氢谱（1HNMR）。图3化合物的1H和13CNMR数据（溶剂为CDCl3）(100and400MHz)。图4化合物腊肠素A的细胞毒活性。具体实施方式下面结合附图对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或改进，均落入本专利技术的保护范围。本专利技术所述的大戟二萜类化合物是以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，其结构式为：所述的大戟二萜A化合物，其特征是：分子式为C26H36O8，该化合物命名千金子二萜A，英文名为EpoxyboetiranesA。本专利技术的第二目的是这样实现的，所述的大戟二萜类化合物是以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，具体为：一种权利要求1所述的大戟二萜类化合物的制备方法，其特征在于以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，具体为：A、样品浸膏有机溶剂提取过程：将大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，或者冷浸提取2~5次，每次3天，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；B、有机溶剂萃取：A步骤所得的浸膏a中加入重量比1~2倍量的乙醇，用与乙醇等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；C、硅胶柱层析：将B步骤所得的浸膏b用重量比1.5~3倍量的甲醇或者丙酮溶解，用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样，然后上硅胶柱层析（装柱硅胶为160~200目），用量为浸膏b重量6~10倍量；用体积比为1:0~0:1的混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；D、高效液相色谱分离：将以体积含量50~90%的石油醚乙酸乙酯溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的大戟二萜类化合物千金子二萜A；该步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以60-80%的甲醇或者45~75%的乙腈为流动相，流速8~12ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为202~280nm，每次进样10~100μL，收集10~40min的色谱峰，多次累加后蒸干。即得所述的大戟二萜类化合物千金子二萜A。根据权利要求3所述的大戟二萜类化合物的制备方法，其中A步骤所述的有机溶剂为100%的二氯甲烷或70~100%的丙酮。根据本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大戟二萜类化合物，其特征是：所述的大戟二萜类化合物是以大戟科大戟属药用植物续随子（

【技术特征摘要】
1.一种大戟二萜类化合物，其特征是：所述的大戟二萜类化合物是以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高效液相色谱分离步骤而得到的，其结构式为：。2.根据权利要求1所述的大戟二萜A化合物，其特征是：分子式为C26H36O8，该化合物命名千金子二萜A，英文名为EpoxyboetiranesA。3.一种权利要求1所述的大戟二萜类化合物的制备方法，其特征在于以大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子为原料，经有机溶剂提取、萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，具体为：A、样品浸膏有机溶剂提取过程：将大戟科大戟属药用植物续随子（EuphorbialathylrisL）的种子用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，或者冷浸提取2~5次，每次3天，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；B、有机溶剂萃取：A步骤所得的浸膏a中加入重量比1~2倍量的乙醇，用与乙醇等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；C、硅胶柱层析：将B步骤所得的浸膏b用重量比1.5~3倍量的甲醇或者丙酮溶解，用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样，然...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶艳青，董伟，王月德，周堃，周敏，胡秋芬，杨光宇，
申请(专利权)人：云南民族大学，
类型：发明
国别省市：云南,53