一种以改性纳米羟基磷灰石为载体的固定化纤维素酶的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种以改性纳米羟基磷灰石为载体的固定化纤维素酶的制备方法，涉及生物酶制剂制备领域，具体过程为：首先制备改性纳米羟基磷灰石，然后配制质量浓度为1‑2％的纤维素酶水溶液，将其和水杨酸、水杨酸钠组成的缓冲液混合搅拌，并调节溶液pH为3‑5，加入上述制得的改性纳米羟基磷灰石，搅拌1‑4h，最后加入质量浓度为5％的戊二醛水溶液，室温搅拌1‑2h，然后过滤，得到的固体用去离子水洗涤2‑3次，干燥，得到固定化纤维素酶。本发明专利技术制得的固定化酶稳定性好，重复使用性能优异，安全无毒，制备成本低。

【技术实现步骤摘要】
一种以改性纳米羟基磷灰石为载体的固定化纤维素酶的制备方法
：本专利技术涉及生物酶制剂制备领域，具体的涉及一种以改性纳米羟基磷灰石为载体的固定化纤维素酶的制备方法。
技术介绍
：纤维素是地球上最丰富的可再生资源，纤维素酶是降解纤维素的一组酶系的总称，主要用于医药、纺织、日用化工、造纸、食品发酵、工业洗涤、烟草、石油开采、废水处理及饲料等领域。纤维素酶及其作用的底物非常复杂，影响因素繁多，水解速度缓慢，酶解效率不高，酶的利用率低，所以实际应用还存在许多困难。酶的固定化技术是现代生物技术及其工业化环节中的一个核心技术，固定化酶在工业、医学、分析与分离技术以及化学合成等领域有着广泛的用途。固定化酶催化反应技术具有能回收、易分离、反复多次使用等优点，为提高纤维素酶的使用效率、降低生产成本提供了可能性，因此纤维素酶的固定化研究长期以来备受关注。羟基磷灰石具有较高的机械强度和较好的化学稳定性，不易发生形变。且无机纳米羟基磷灰石生物相容性好，但是其脆性大，降解速度慢，用其制得的固定化酶重复使用性能差，限定了其应用于生物酶制剂固定化制备。
技术实现思路
：本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种以改本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以改性纳米羟基磷灰石为载体的固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将海藻酸钠、水溶性壳聚糖和去离子水混合，在30℃±5℃下搅拌至固体溶解，得到混合溶液；(2)将氯化钙和去离子水混合搅拌至固体溶液，得到氯化钙水溶液；(3)将上述制得的混合溶液置于三口烧瓶中，然后将制得的氯化钙水溶液缓慢滴加到三口烧瓶中，边滴加边搅拌，滴加完毕后，继续搅拌30min，得到混合水凝胶；(4)将四水硝酸钙水溶液缓慢滴加到磷酸氢二钠水溶液中，滴加完毕后室温搅拌5‑10min，然后将混合液转移至反应釜中，60‑70℃下反应10‑20min，反应结束后冷却至室温，反应产物90‑100℃下浓缩5min，...

【技术特征摘要】
1.一种以改性纳米羟基磷灰石为载体的固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将海藻酸钠、水溶性壳聚糖和去离子水混合，在30℃±5℃下搅拌至固体溶解，得到混合溶液；(2)将氯化钙和去离子水混合搅拌至固体溶液，得到氯化钙水溶液；(3)将上述制得的混合溶液置于三口烧瓶中，然后将制得的氯化钙水溶液缓慢滴加到三口烧瓶中，边滴加边搅拌，滴加完毕后，继续搅拌30min，得到混合水凝胶；(4)将四水硝酸钙水溶液缓慢滴加到磷酸氢二钠水溶液中，滴加完毕后室温搅拌5-10min，然后将混合液转移至反应釜中，60-70℃下反应10-20min，反应结束后冷却至室温，反应产物90-100℃下浓缩5min，得到纳米羟基磷灰石浓缩液；(5)在烧杯中将甘油和硅烷偶联剂混合搅拌均匀后，然后将上述制得的混合水凝胶以及纳米羟基磷灰石浓缩液同时分别加入到烧杯中，加入完毕后40℃，5000rpm下搅拌处理10min，然后冰浴条件下搅拌处理10-30min，处理结束后过滤，固体洗涤后干燥，制得改性纳米羟基磷灰石；(6)配制质量浓度为1-2％的纤维素酶水溶液，将其和水杨酸、水杨酸钠组成的缓冲液混合搅拌，并调节溶液pH为3-5，加入上述制得的改性纳米羟基磷灰石，搅拌1-4h，最后加入质量浓度为5％的戊二醛水溶液，室温搅拌1-2h，然后过滤，得到的固体用去离子水洗涤2-3次，干燥，得到固定化纤维素酶。2.如权利要求1所述的一种以改性纳米羟基磷灰石为载体的固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述海藻酸钠、水溶性壳聚糖、去离子水的质量比为1:1:80。3.如权利要求1所述的一种以改性纳米羟基磷...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯海燕，
申请(专利权)人：苏州凯邦生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32