壳寡糖治疗新生儿缺血缺氧性脑病的制药用途制造技术

本发明专利技术公开了壳寡糖(Chitosan oligosaccharide)作为治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤药物的用途。本发明专利技术的实验结果表明在安全剂量范围内使用时，剂量为400mg/kg的壳寡糖可以显著改善新生大鼠缺血缺氧模型自主神经功能障碍，降低缺血区域脑梗死体积以及神经元坏死，证明壳寡糖具有预防新生儿缺血缺氧性脑病后致死致残和促进神经功能恢复的作用。

【技术实现步骤摘要】
壳寡糖治疗新生儿缺血缺氧性脑病的制药用途
本专利技术涉及壳寡糖的应用，特别涉及壳寡糖作为治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤药物的用途。
技术介绍
新生儿缺血缺氧性脑损伤(hypoxic-ischemicbraindamage，HIBD)系指围生期窒息所引起的缺氧、脑血流减少或短期脑血流灌注中断所致的脑缺血缺氧性损伤，呈现一系列中枢神经异常的临床症状与体征，是严重威胁新生儿健康、导致新生儿死亡和儿童伤残的常见原因。据统计，我国每年出生婴儿1800万-2000万，窒息的发病率为13.9％。其中，大学有15-25％患儿在新生儿期死亡，有高达25％的存活儿在以后的成长过程中出现智力障碍、脑瘫、癫痫、智力发育迟缓、视听障碍、学习障碍而存留永久性神经心理障碍。造成这种严重后果的原因除了疾病本身的发生发展因素外，还与是否进行早期干预和开始干预的早晚密切相关。新生儿HIBD的发病机制尚不明确，目前临床主要采用综合治疗，迄今为止对其损伤后的治疗尚无根本性有力措施。如何通过有效的干预，防止和逆转HIBD引起的脑神经损伤及促进损伤后修复，改善预后，是围产医学和神经医学领域的重大课题，寻求有效的神经保护药一直是研究的重点。壳聚糖(chitosan)是由甲壳素(chitin)经脱乙酰化处理脱去大部分乙酰基后得到的动物多糖。以壳聚糖为原料经水解后得到的低聚糖称为壳寡糖(chitooligosaccharideCOS)，又称甲壳低聚糖，由2-10个氨基葡萄糖通过β-1,4糖苷键连接而成的低聚糖，是唯一的带正电荷的天然碱性寡糖，水溶性好易被机体吸收。具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗感染、保护视网膜等多种药理作用。虽己有多位学者试图证明壳寡糖的神经保护活性，但绝大部分实验仅局限于细胞水平，很少有研究者在整体水平探讨其活性，也难以确定其临床应用价值。壳寡糖能通过血脑屏障，已有研究报道壳寡糖对脑缺血再灌注损伤有良好的改善作用，但关于其对新生儿缺血缺氧性脑损伤的保护作用目前未见文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是通过对壳寡糖的药理作用研究，提供壳寡糖作为治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤药物的用途。本专利技术通过以下技术方案来实现专利技术目的：本专利技术提供壳寡糖作为治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤药物的用途，所述壳寡糖的结构式如式(1)所示：本专利技术所用的壳寡糖均可经商购获得。具体地，所述新生儿缺血缺氧性脑损伤为急性期或修复期的新生儿缺血缺氧性脑损伤。进一步地，所述壳寡糖单次应用剂量为25～400mg/kg。优选地，所述壳寡糖单次应用剂量为100～400mg/kg。优选地，所述壳寡糖单次应用剂量为400mg/kg。具体地，所述壳寡糖单次应用剂量仅限于不引起中枢抑制的剂量。具体地，所述药物的剂型为药剂学上允许的口服剂型或注射剂型。本专利技术提供的壳寡糖作为治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤药物的用途具有以下有益效果：(1)壳寡糖在不降低血糖的剂量下能显著减少脑梗死体积和细胞坏死率；(2)壳寡糖能减弱氧化应激脂质过氧化作用，显著抑制了缺血后脑组织IL-1β，TNF-α蛋白的表达以及促进IL-10蛋白的表达。实验结果表明壳寡糖具有治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤所致神经元损伤的作用，可用于制备新生儿缺血缺氧性脑损伤的治疗药物。附图说明图1：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤保护作用的TTC染色图；图2：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧后脑组织病理变化影响的大脑皮层病理变化HE染色图；图3：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧后脑组织病理变化影响的海马CA3区病理变化HE染色；图4：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧后脑组织病理变化影响大脑皮层病理变化尼式染色图；图5：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧后脑组织病理变化影响海马CA3区病理变化尼式染色图；图6：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧后脑组织病理变化影响大脑皮层病理变化FJB染色图；图7：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧后脑组织病理变化影响海马CA3区病理变化FJB染色图；图8：壳寡糖对新生大鼠大脑缺血缺氧侧大脑皮层GFAP免疫阳性细胞表达的免疫荧光图；图9：壳寡糖对新生大鼠大脑缺血缺氧侧大脑皮层OX-42免疫阳性细胞表达的免疫荧光图；图10：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧侧脑组织IL-1β蛋白表达水平的影响(与假手术组比较：##P<0.01，与模型组比较：＊P<0.05，＊＊P<0.01(n＝6))；图11：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧侧脑组织TNF-α蛋白表达水平的影响(与假手术组比较：##P<0.01，与模型组比较：＊P<0.05，＊＊P<0.01(n＝6))；图12：壳寡糖对新生大鼠缺血缺氧侧脑组织IL-10蛋白表达水平的影响(与假手术组比较：##P<0.01，与模型组比较：＊P<0.05，＊＊P<0.01(n＝6))；具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步详细的说明，以下实施例中使用的壳寡糖均为式(1)所示的寡糖结构。壳寡糖(n＝2～10，纯度＞90％，平均分子质量1500，脱乙酰度＞90％)实施例1壳寡糖治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤，其中，新生儿缺氧缺血为急性期缺血缺氧性脑损伤，壳寡糖单次应用剂量为新生大鼠25mg/kg，药物的剂型为注射液剂型。实施例2壳寡糖治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤，其中，新生儿缺氧缺血为修复期缺血缺氧性脑损伤，壳寡糖单次应用剂量为新生大鼠100mg/kg，药物的剂型为粉针剂型。实施例3壳寡糖治疗新生儿缺血缺氧性脑病，其中，新生儿缺氧缺血性为修复期新生儿缺血缺氧性脑损伤，壳寡糖单次应用剂量为新生大鼠400mg/kg，药物的剂型为粉针剂型。下面的动物实验进一步说明了上述实施例1至3的效果：一、实验材料1.1动物处理7日龄，新生SD大鼠，12-18g，购自宁夏医科大学实验动物中心，动物生产许可证号：NCXK(宁)2016-0001。喂养条件包括标准饲料，自来水，室温保持在(24±2)℃，湿度50-60％，每日光照与黑暗时间各12h。实验前，将动物置于实验环境适应3天。1.2实验药品及仪器壳寡糖(日本TCI公司)，以生理盐水配制，母液浓度120mg/mL，-20℃贮存。2，3，5-氯化三苯基四氮唑(2，3，5-triphenyltetrazoliumchloride，TTC，购自sigma公司)，SOD、MDA、GSH-px、T-AOC、MPO、ATP、Lacticacid试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)，兔抗IL-1β、IL-10(购自protein公司)、TNF-α、(购自Abcam公司)，酶标仪(1510，ThermoFisher公司)，激光共聚焦显微镜(TCS-SP，德国公司)，电泳仪、电转仪(Powerpacbasic,美国Bio-Rad公司)，凝胶成像分析仪(JS-860B,上海培清公司)。1.3实验动物分组及给药新生大鼠随机分为缺血缺氧(HIBD)模型组，壳寡糖不同剂量组。新生大鼠在手术造模后按0.1ml/10g体重12h/次腹腔给药。假手术组同法给予等量的生理盐水。在新生大鼠缺氧缺血48h后进行脑梗死体积、组织病理与形态学改变、分子生物学表达变化等药效学评价。1.4新生大鼠缺血缺氧(HIBD)模型建立参照Rice法，将7日龄SD大鼠放入一个含乙醚的密闭玻璃缸内，吸入麻醉30-90秒后取出，固定于操本文档来自技高网...

【技术保护点】
壳寡糖在制备治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤的药物中的用途，其特征在于：所述壳寡糖的结构式如式(1)所示：

【技术特征摘要】
1.壳寡糖在制备治疗新生儿缺血缺氧性脑损伤的药物中的用途，其特征在于：所述壳寡糖的结构式如式(1)所示：2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述脑损伤为急性期或修复期的新生儿缺血缺氧性脑损伤。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：壳寡糖单次应用剂量为不引起中枢抑制的剂量。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：壳寡糖单次应用剂量为25～400m...

【专利技术属性】
技术研发人员：余建强，吴巍，李玉香，赵玉萍，刘宁，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：宁夏,64