通过酰胺键将环糊精接枝至醚交联的透明质酸及其用途制造技术

透明质酸产品包含交联的透明质酸和一种或更多种环糊精分子。透明质酸通过醚键交联，并且一种或更多种环糊精分子通过酰胺键被接枝至交联的透明质酸上，优选地使用基于三嗪的偶联试剂。

Use of amide bonds to graft cyclodextrin to ether crosslinked hyaluronic acid and its use

Hyaluronic acid products contain crosslinked hyaluronic acid and one or more kinds of cyclodextrin molecules. Hyaluronic acid is cross-linked by ether bonds, and one or more cyclodextrins are grafted onto cross-linked hyaluronic acid through amide bond, preferably using coupling agents based on three azine.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过酰胺键将环糊精接枝至醚交联的透明质酸及其用途专利技术的
本专利技术涉及包含交联多糖的水凝胶的领域以及此类水凝胶在医学应用和/或化妆品应用中的用途。更具体地，本专利技术涉及用环糊精官能化的交联的透明质酸水凝胶。专利技术背景最为广泛使用的用于医学用途的生物相容性聚合物之一是透明质酸(HA)。它是天然存在的、属于糖胺聚糖(GAG)的组的多糖。透明质酸和其他GAG是带负电荷的杂多糖链，其具有能够吸收大量水的能力。透明质酸和衍生自透明质酸的产品在生物医学和化妆品领域被广泛使用，例如在弹性手术(viscosurgery)期间和作为真皮填充剂(dermalfiller)。吸水凝胶或水凝胶在生物医学领域被广泛使用。它们通常经过聚合物的化学交联至无限网状结构而制备。虽然天然透明质酸和某些交联的透明质酸产品吸收水直到它们完全溶解，但交联的透明质酸凝胶典型地吸收一定量的水直到它们被饱和，即，它们具有有限的液体保留能力、或溶胀度。由于透明质酸除了其分子量外以相同的化学结构存在于多数活有机体中，其给出了最少的反应并且允许先进的医学用途。交联和/或其他对透明质酸分子的修饰对改进其在体内的持续时间是必要的。此外，这样的修饰影响透明质酸分子的液体保留能力。其结果是，透明质酸已经成为许多修饰尝试的主题。环糊精(cyclodextrin)(有时被称为环糊精(cycloamylose))，在本文还被称作CD或CDx，是由一起结合成环的糖分子(环状寡糖)组成的化合物的家族。环糊精从淀粉通过酶转化产生。通常，环糊精由6-8个吡喃葡萄糖苷单元构成，并且具有类似超环面(toroid)的结构构象，所述超环面具有沿着超环面的较小开口布置的吡喃葡萄糖苷单元的伯羟基和沿着超环面的较大开口布置的吡喃葡萄糖苷单元的仲羟基。由于这种布置，超环面的内部与水相环境相比是非常不亲水的并且因此能接受(host)其他疏水性分子。与此相反，外部是足够亲水的以赋予环糊精(或其复合物)水溶性。当疏水性分子(客体)被全部地或部分地包含在环糊精(主体)的内部中时，这被称作包合复合物或客体/主体复合物。客体/主体复合物的形成可以大大改变客体分子的理化性质，通常是关于水溶性。这是为何环糊精在药学应用中吸引了很大兴趣的原因：因为环糊精与疏水性分子的包合化合物能够穿入体组织，这些可以被用来在特定条件下释放生物活性化合物。在多数情况下这样的复合物的受控降解的机制是基于pH的变化，pH的变化导致主体分子和客体分子之间的氢键或离子键的断裂。用于破坏复合物的其他机制包括能够使葡萄糖单体之间的α-1,4连接断裂的加热或酶的作用。US2014/0094433公开了同时发生HA的交联和环糊精的接枝的一步法。接枝可以通过HA和环糊精之间的直接共价键例如酯键，或者通过共价键合至HA和环糊精两者上的连接基团例如通过酯、醚、胺、酰胺或其他共价键来进行。JP3847405B2涉及在内切葡糖苷酶(endoglucosidase)存在下单糖与环糊精的偶联，其酶促降解寡糖。专利技术概述本专利技术的目标是提供用于药物和/或化妆品物质的施用的改进的制剂。特别地，本专利技术的目的是提供稳定的交联的透明质酸凝胶产品，其具有相当大量的接枝的环糊精。本专利技术的目标还是提供用于制备用于施用药物和/或化妆品物质的改进的制剂的工艺。特别地，本专利技术的目的是用于提供具有相当大量的接枝的环糊精的稳定的交联的透明质酸凝胶产品的工艺。对于将从本公开内容是明显的这些和其他目的，根据第一方面，本专利技术提供透明质酸产品，所述透明质酸产品包含交联的透明质酸和一种或更多种环糊精分子，其中透明质酸通过醚键交联，并且其中一种或更多种环糊精分子通过酰胺键被接枝至交联的透明质酸。有利的是，将环糊精分子接枝在已经交联的透明质酸上，该交联的透明质酸可以已经以具有定义的物理-化学性质的合意的形式来制备。这允许用环糊精明显修饰交联的HA，伴随着交联的HA的有限的解聚。根据优选的实施方案，交联的透明质酸产品呈凝胶颗粒的形式，该凝胶颗粒具有在0.01mm-5mm、优选地0.1mm-0.8mm的范围内的平均大小。根据一种优选的实施方案，透明质酸链通过衍生自双官能交联剂或多官能交联剂(诸如二缩水甘油醚，例如1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE))的连接基团彼此交联。根据优选的实施方案，环糊精分子含有具有氨基基团的连接基团，并且其中环糊精分子的连接基团与交联的透明质酸的羧基基团形成所述酰胺键。某些连接基团含有C1-6烷基或C1-6烷基连接基。根据另一种优选的实施方案，环糊精分子是氨基环糊精，例如α-、β-、或γ-环糊精，其中2-氨基环糊精、3-氨基环糊精和6-氨基环糊精是优选的。如本文所使用的，术语氨基环糊精是指在环糊精骨架上具有氨基基团的环糊精，即在环糊精骨架和胺基团之间没有任何连接基团。透明质酸和环糊精之间通过其氨基基团得到的直接酰胺键对于实现从接枝的环糊精的缓释概况是有利的。氨基环糊精也可以用小的烷基(C1-4)基团在羟基位置上官能化。用甲基基团或羟丙基基团官能化的氨基环糊精是优选的。根据一种优选的实施方案，透明质酸产品还包含能够与充当主体的环糊精分子形成客体-主体复合物的客体分子。客体分子可以选自用于治疗皮肤病学、美学、眼科学、妇科学、肿瘤学、血管学、神经学、矫形术、风湿病学或美学皮肤病学的领域中的紊乱的药物和/或生物活性物质。根据另一个方面，本专利技术提供了制备透明质酸产品的工艺，所述透明质酸产品包含交联的透明质酸和一种或更多种环糊精分子，所述工艺包括以下步骤：(a)提供(i)透明质酸和(ii)一种或更多种环糊精分子；(b)使用双官能交联剂或多官能交联剂通过醚键使透明质酸交联；和(c)通过酰胺键将所述一种或更多种环糊精分子接枝至所述交联的透明质酸上。已经惊异地认识到，通过酰胺键将环糊精分子接枝至已经交联的透明质酸上与交联的透明质酸的低解聚度有关。根据优选的实施方案，环糊精分子含有具有氨基基团的连接基团，并且其中环糊精分子的连接基团与交联的透明质酸的羧基基团形成所述酰胺键。某些连接基团含有C1-6烷基或C1-6烷基连接基。根据另一种优选的实施方案，环糊精分子是氨基环糊精，例如α-、β-、或γ-环糊精，其中2-氨基环糊精、3-氨基环糊精和6-氨基环糊精是优选的。透明质酸和环糊精之间通过其氨基基团得到的直接酰胺键对于实现从接枝的环糊精的缓释概况是有利的。氨基环糊精也可以用小的烷基(C1-4)基团在羟基位置上官能化。用甲基基团或羟丙基基团官能化的氨基环糊精是优选的。在优选的实施方案中，步骤(c)的接枝包括：(i)用肽偶联试剂使交联的透明质酸上的羧基活化以形成活化的交联的透明质酸；和(ii)通过酰胺键将一种或更多种环糊精分子的连接基团偶联至活化的交联的透明质酸的羧基基团。在一种优选的实施方案中，肽偶联试剂选自由以下组成的组：基于三嗪的偶联试剂、碳二亚胺偶联试剂、咪唑鎓衍生的偶联试剂、Oxyma和COMU。肽偶联试剂优选地为基于三嗪的偶联试剂，例如在叔胺碱或其相应的季铵盐的存在下的2-氯-4,6-二取代-1,3,5-三嗪类，例如2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(CDMT)以及N-甲基吗啉(NMM)、或4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物(DMTM本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种透明质酸产品，包含交联的透明质酸和一种或更多种氨基环糊精分子，其中所述透明质酸通过醚键交联，并且其中所述一种或更多种氨基环糊精分子通过在所述氨基环糊精分子的氨基基团和所述交联的透明质酸的羧基基团之间的直接酰胺键接枝至所述交联的透明质酸上。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.18 EP 14198793.31.一种透明质酸产品，包含交联的透明质酸和一种或更多种氨基环糊精分子，其中所述透明质酸通过醚键交联，并且其中所述一种或更多种氨基环糊精分子通过在所述氨基环糊精分子的氨基基团和所述交联的透明质酸的羧基基团之间的直接酰胺键接枝至所述交联的透明质酸上。2.根据权利要求1所述的透明质酸产品，其中所述氨基环糊精分子由6-8个吡喃葡萄糖苷单元构成。3.根据权利要求2所述的透明质酸产品，其中所述氨基环糊精分子选自由2-氨基环糊精、3-氨基环糊精和6-氨基环糊精组成的组。4.根据权利要求1-3中任一项所述的透明质酸产品，其中得到的透明质酸产品的所述氨基环糊精分子和所述交联的透明质酸的二糖具有大于2％的摩尔比。5.根据权利要求1-4中任一项所述的透明质酸产品，其中所述透明质酸产品呈凝胶颗粒的形式，所述凝胶颗粒具有在0.01mm-5mm、优选地0.1mm-0.8mm的范围内的平均大小。6.根据权利要求1-5中任一项所述的透明质酸产品，还包含能够与充当主体的所述氨基环糊精分子形成客体-主体复合物的客体分子，其中所述客体分子选自用于治疗皮肤病学、美学、眼科学、妇科学、肿瘤学、血管学、神经病学、矫形术、风湿病学或美学皮肤病学的领域中的紊乱的药物和/或生物活性物质，例如抗感染剂、抗微生物剂、抗炎剂、细胞抑制剂、细胞毒素剂、抗病毒剂、麻醉剂、止血剂、血管收缩剂或生长因子。7.一种制备透明质酸产品的工艺，所述透明质酸产品包含交联的透明质酸和一种或更多种环糊精分子，所述工艺包括以下步骤：(a)提供(i)透明质酸和(ii)一种或更多种环糊精分子；(b)使用双官能交联剂或多官能交联剂通过醚键使所述透明质酸交联；和(c)通过酰胺键将所述一种或更多种环糊精分子接枝至所述交联的透明质酸上。8.根据权利要求7所述的工艺，其中所述环糊精分子是氨基环糊精分子，并且其中所述氨基环糊精分子的氨基基团与所述交联的透明质酸的羧基基团形成所述酰胺键。9.根据权利要求7-8中任一项所述的工艺，其中步骤(c)的所述接枝包括：(i)用基于三嗪的偶联试剂使所述交联的透明质酸上的所述羧基基团活化以形成活化的交联的透明质酸；和(ii)通过酰胺键将所述一种或更多种环糊精分子偶联至所述活化的交联的透明质酸的所述羧基基团。10.根据权利要求9所述的工艺，其中所述基于三嗪的偶联试剂是4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-...

【专利技术属性】
技术研发人员：吉恩盖伊·博伊特奥，埃琳·萨文，
申请(专利权)人：盖尔德玛公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH