酵母多糖在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，具体是酵母多糖(Zymosan‑A)或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用。本发明专利技术通过小鼠体内实验，证明酵母多糖能够明显减轻电离辐射引起的骨髓造血系统的破坏程度，促进造血系统的恢复，抑制电离辐射引起的外周血白细胞下降；通过体外细胞学实验，酵母多糖能够减少照后细胞凋亡率，提高照后细胞增殖活力；通过TLR2敲除小鼠证明酵母多糖通过靶向激活TLR2信号通路发挥辐射防护作用。说明照前运用酵母多糖能够通过激活TLR2信号通路减轻小鼠骨髓造血系统放射性损伤，保护外周血白细胞，为酵母多糖防护急性放射性骨髓损伤提供了新的依据。

Application of yeast polysaccharide in the preparation of drugs against acute radiation induced bone marrow injury

The present invention relates to the field of biomedicine, in particular Yeast Polysaccharides (Zymosan A) or its derivatives in preparation and application of protection of acute radiation injury of bone marrow in medicine. The present invention by in vivo experiments, proved that the extent of damage of bone marrow hematopoietic system of yeast polysaccharide can obviously reduce the induced by ionizing radiation, promote hematopoietic recovery, peripheral blood leukocyte inhibition induced by ionizing radiation decreased; in vitro study, yeast polysaccharide can reduce the rate of cell apoptosis after irradiation, enhance cell proliferation after irradiation activity; through TLR2 knockout mice proved that Yeast Polysaccharides play radiation protective effect to the activation of TLR2 signaling pathway by target. According to instructions before using a yeast polysaccharide can activate the TLR2 signaling pathway to reduce radiation injury of bone marrow hematopoietic system in mice, the protection of peripheral white blood cells, provides a new basis for the yeast polysaccharide protection of acute radiation injury of bone marrow.

【技术实现步骤摘要】
酵母多糖在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用
本专利技术涉及生物医药领域，具体地说，是酵母多糖或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用，以及含有酵母多糖或其衍生物的药物组合物。
技术介绍
目前，核工业、核能与核辐射技术已经广泛用于国民经济、军事领域和医疗领域，核与辐射的广泛应用，使得放射工作人员和公众受到核辐射损伤的几率大大增加，核辐射损伤及防护也受到学界及公众越来越多的关注。在受到大剂量电离辐射之后，暴露人员可发生急性放射病，其中急性放射性骨髓损伤(又称骨髓型急性放射病)因其发生率高、难预防而日益受到关注。急性放射性骨髓损伤的发生机制主要为：高能射线的电离作用通过直接作用和间接作用作用于细胞内生物大分子如DNA、蛋白质等，导致骨髓造血系统出血，血窦破坏，骨髓细胞死亡，进而导致白细胞数减少、感染、出血等临床表现。目前对于急性放射性骨髓损伤的防护药物主要为氧自由基清除剂(如W2721)，抗炎药物(如糖皮质激素)，细胞因子类(如G-CSF)。但这些药物由于副毒作用较大、缺乏特异性，限制了其在临床中的广泛应用。因此，找到一种新型有效、毒副作用小、特异性强的核辐射防护药物，是目前放射生物学和放射医学研究的重点和难点。酵母多糖(Zymosan-A，CAS号：58856-93-2)提取自酵母真菌细胞壁，研究证明其为TLR2(Toll-likereceptor2)配体(参见文献：LiJT,WangWQ,WangL,LiuNN,ZhaoYL,ZhuXS,LiuQQ,GaoCF,YangAG,JiaLT:Subanestheticisofluranerelieveszymosan-inducedneutrophilinflammatoryresponsebytargetingNMDAglutamatereceptorandToll-likereceptor2signaling.Oncotarget2016；7:31772-31789.)。对于酵母多糖的研究主要集中在其可以激活机体免疫系统，增强机体免疫力。既往研究发现，TLR2信号通路的激活可以促进NF-κB核转位，上调多种细胞因子，发挥其对急性放射性骨髓损伤的防护(参见文献：GaoF,ZhangC,ZhouC,SunW,LiuX,ZhangP,HanJ,XianL,BaiD,LiuH,ChengY,LiB,CuiJ,CaiJ,LiuC:Acriticalroleoftoll-likereceptor2(TLR2)andits'invivoligandsinradio-resistance.SciRep2015；5:13004.)目前尚未有文献报道酵母多糖通过激活TLR2信号通路发挥急性放射性骨髓损伤防护的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种酵母多糖或其衍生物的新的医药用途，以及含有酵母多糖或其衍生物的药物组合物。本专利技术的第一方面，提供酵母多糖或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用。进一步，所述的防护急性放射性骨髓损伤药物为减轻电离辐射引起的骨髓造血系统破坏程度，减少照后细胞凋亡率，提高照后细胞增殖活力的药物。更进一步，所述的减轻电离辐射引起的骨髓造血系统破坏程度的药物为减少骨髓造血系统出血、骨髓结构破坏的药物。进一步，所述的防护急性放射性骨髓损伤药物为靶向激活TLR2的药物。由前所述可知，TLR2信号通路的激活可以促进NF-κB核转位，上调多种细胞因子发挥辐射防护作用。本专利技术中的酵母多糖及其衍生物指的是能够发挥药理作用的酵母多糖化合物，为由β-1，3糖苷键连接而成的葡聚糖聚合物。为了验证酵母多糖对于急性放射性骨髓损伤的防护效果，及其是否通过TLR2信号通路发挥辐射防护作用，本专利技术通过对小鼠体内实验和细胞学的体外实验两个方面验证了酵母多糖对小鼠骨髓造血系统和人淋巴B细胞AHH-1、人小肠上皮细胞HIEC的辐射防护作用。对于小鼠体内实验选择C57/BL6，8周龄的雄性野生型小鼠进行实验，照射前24小时和照射前2小时予以小鼠腹腔注射酵母多糖(25mg/kg/次)。防护小鼠的照射方式为单次全身照射，照射剂量为7.0Gy，剂量率为1Gy/min，照射源采用60Coγ射线；对TLR2敲除型小鼠照射前24小时和照射前2小时予以小鼠腹腔注射酵母多糖(25mg/kg/次)。防护小鼠的照射方式为单次全身照射，照射剂量为6.0Gy，剂量率为1Gy/min，照射源采用60Coγ射线；对于细胞学的体外实验，照射前12小时和照前2小时，40ug/ml的酵母多糖处理HIEC和AHH-1细胞，防护的HIEC和AHH-1细胞所接受的照射剂量梯度为4.0Gy、8.0Gy，剂量率1Gy/min，照射源采用60Coγ射线。通过实验发现，小鼠照前给药能明显减轻照射引起的野生型小鼠骨髓出血、血窦破坏，并保护骨髓有核细胞数，减少骨髓有核细胞的凋亡，并加快骨髓损伤修复；通过TLR2敲除型小鼠实验证实酵母多糖通过靶向激活TLR2发挥辐射防护作用；对HIEC和AHH-1进行实验，照射能诱导细胞发生凋亡、抑制细胞增殖，而照前给药能减少细胞照后凋亡率，改善增殖抑制情况。说明照前运用酵母多糖能减轻小鼠急性放射性骨髓损伤，保护骨髓内有核细胞，加快照后骨髓造血系统的恢复。进一步，所述的防护急性放射性骨髓损伤药物是酵母多糖或其衍生物作为唯一活性成份或者是包含酵母多糖或其衍生物的药物组合物。所述的药物或药物组合物可以和药学上常用的辅料制成任何剂型，例如其可以是汤剂、散剂、丸剂、酒剂、锭剂、胶剂、膏药、茶剂、曲剂、糕剂、露剂、棒剂、线剂、条剂、钉剂，灸熨剂，膏剂、丹剂、微型胶囊、静脉乳剂、脂质体制剂、气雾剂、前体药制剂、注射剂、合剂、口服安瓿剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、乳剂、软膏剂、橡胶硬膏、膜剂、海绵剂、离子透入剂，或透皮吸收剂。本专利技术的第二方面，提供一种防护急性放射性骨髓损伤的药物组合物，由酵母多糖或其衍生物以及药学上可接受的辅料组成。本专利技术的酵母多糖或其衍生物用于预防急性放射性骨髓损伤，特别适用于核战争、核事故、放射工作人员、肿瘤放疗治疗患者等伴有的急性放射性骨髓损伤。本专利技术的酵母多糖或其衍生物尤其可用于预防急性放射性骨髓损伤，即提前给药于可能遭遇放射性骨髓损伤的人群，给药方式不限于口服、注射等。本专利技术有益效果在于：本专利技术通过小鼠体内实验，酵母多糖能够明显减轻电离辐射引起的骨髓造血系统的破坏程度，促进造血系统的恢复，抑制电离辐射引起的外周血白细胞下降；通过体外细胞学实验，酵母多糖能够减少照后细胞凋亡率，提高照后细胞增殖活力；通过TLR2敲除型小鼠证实酵母多糖通过靶向激活TLR2发挥辐射防护作用；通过体外细胞学实验，酵母多糖能够减少细胞照后凋亡率，改善增殖抑制情况，说明照前运用酵母多糖能够通过靶向激活TLR2减轻小鼠急性放射性骨髓损伤，保护骨髓有核细胞，保护外周血白细胞，降低小鼠骨髓造血系统对放射的敏感性。因此，本专利技术为酵母多糖或其衍生物防护急性放射性骨髓损伤提供了新的依据。目前研究已证实酵母多糖具有吸附病原菌、抗肿瘤以及增强免疫功能等作用，而本专利技术提供了酵母多糖的新适应症，为防护核辐射带来的损伤提供了新的药物。附图说明图1为酵母多糖对小鼠照射后骨髓损伤的影响结果图。其中，A为酵母多糖减轻小本文档来自技高网...

【技术保护点】
酵母多糖或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.酵母多糖或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用。2.根据权利要求1所述的酵母多糖或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用，其特征在于，所述的防护急性放射性骨髓损伤药物为减轻电离辐射引起的骨髓造血系统破坏程度，减少照后细胞凋亡率，提高照后细胞增殖活力的药物。3.根据权利要求2所述的酵母多糖或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用，其特征在于，所述的减轻电离辐射引起的骨髓造血系统破坏程度的药物为减少骨髓造血系统出血、骨髓结构破坏的药物。4.根据权利要求1所述的酵母多糖或其衍生物在制备防护急性放射性骨髓损伤药物中的应用，其特征在于，所述的防护急性放射性骨髓损伤药物为靶向激活TLR2的药物。5.根据权利要求1-4任一所述的酵母多糖或其衍生...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜继聪，蔡建明，高福，刘聪，程赢，杨彦勇，刘虎，张沛，赵海男，东肃河，韩家琦，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海,31