一种逆转顺铂耐药的药物组合制造技术

本发明专利技术提供一种逆转顺铂耐药的药物组合物，该药物组合物包含作为活性成分的黄芪和白花蛇舌草。其中，黄芪和白花蛇舌草的原料药材的重量份配比为：黄芪9～30份，白花蛇舌草3～30份；优选为黄芪12～20份，白花蛇舌草5～15份；更优选为黄芪15份，白花蛇舌草10份。

【技术实现步骤摘要】
一种逆转顺铂耐药的药物组合
本专利技术涉及一种治疗肿瘤的药物组合，能够逆转顺铂耐药。技术背景目前全世界的肺癌发病率与死亡率均高居恶性肿瘤首位。在肺癌的综合治疗中，化疗占有重要的地位，尽管新的化疗药物不断问世，化疗方案日趋完善，但肿瘤细胞的多药耐药性(MDR)严重限制化学药物的治疗效果。据统计，90％以上接受化疗的肿瘤患者，其死亡与耐药有关，因此对MDR的产生机制、检测方法、逆转方法的研究一直是肿瘤治疗领域的焦点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种治疗肿瘤顺铂耐药的药物组合物及其制备方法和应用。本专利技术提供了一种治疗肿瘤顺铂耐药的药物组合物，该药物组合物包含作为活性成分的黄芪和白花蛇舌草。该组合物中，以黄芪为君药，黄芪健脾补气，亦又补肾，《本草纲目》云：芪者，长也，黄芪色黄，为补药之长，故名。所以自古至今，黄芪均以补药之长率先，尤以补脾肾为重，此其第一要药，用量当重，生用者，取其益气固表之功，固表者，益卫气而防外邪也。以白花蛇舌草为臣药，其药味苦、淡,性寒。主要功效是清热解毒、消痛散结、利尿除湿。两药合用共奏“益气解毒”之功效。因此对于本虚邪实的肿瘤有治疗作用。现代药理表明：黄芪具有增强肌体的免疫功能，强心、降压、降血糖、利尿、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、抗病毒、镇静、镇痛等作用。白花蛇舌草具有清热解毒、消痛散结、利尿除湿。尤善治疗各种类型炎症。这些药理研究为本品用于治疗肿瘤疾病提供了科学依据。在本专利技术提供的药物组合物中，所述黄芪和白花蛇舌草的原料药材的重量份配比可以为：黄芪9～30份，白花蛇舌草3～10份；优选为黄芪12～20份，白花蛇舌草5～8份；更优选为黄芪15份，白花蛇舌草6份。在本专利技术的一种实施方案中，所述药物组合物包含作为活性成分的黄芪和白花蛇舌草水提浸膏。在本专利技术提供的药物组合物中，还可以含有药剂学可接受的辅料。其中，所述药剂学可接受的辅料可以包括：乳糖、糊精、淀粉、可压性淀粉、微晶纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、微粉硅胶和木糖醇中的一种或多种。根据本专利技术提供的药物组合物，其中，所述药物组合物可以为口服剂型，优选为口服液、颗粒剂、片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、煎膏剂和糖浆剂。具体实施方式实施例：观察对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞多药耐药基因调控作用的研究1材料与方法1.1药物:由黄芪15g、白花蛇舌草6g二味中药组成，水煎浓缩相当于原生药材1.5g/mL的药液，冷却装入灭菌药瓶，置4℃冰箱备用。1.2动物与分组:SPF级健康BalB/C雄性裸鼠，60只，4～6周龄，体质量18～20g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，动物许可证号SCXK-(军)2014-0004。1.3细胞系:人肺腺癌细胞系A549，耐顺铂(DDP)肺腺癌细胞系。1.4A549裸鼠皮下移植瘤模型的建立:体外复苏、培养A549细胞，在细胞的对数生长期收集细胞。1000r/min离心5min，PBS溶液洗涤两次，离心弃上清，离心管外周以冰袋维持温度在4℃左右，以此保持瘤细胞的活性。用生理盐水稀释，调整细胞浓度到5×106cell/mL。小鼠随机分为样品高、低剂量组和对照组，每组20只。在各组中每只小鼠右前腋下皮下接种0.2mL。待所有裸小鼠的皮下肿瘤的平均直径达到约5mm时开始ig给药，每次给药间隔24h。小鼠给药剂量分别为40、20g/kg，对照组给予等容量生理盐水。10d后眼眶取血法采血。1.4含药血清的制备:末次给药1h后，小鼠称质量，眼眶取血法采血，8000r/min离心15min，取淡蓝色血清于2mLEP管中，标识组别；14000r/min高速离心5min，重复2次。分别提取上清，分装，56℃水浴灭活30min，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，-20℃保存。1.5细胞传代与培养:常规实验方法1.6对A549/DDP细胞耐药基因P-gP表达的影响:组织样品加适量预冷的蛋白裂解液RIPA，匀浆，14000r/min离心15min，上清转入新管。BCA法测定蛋白含量。用PBS调至等浓度，加6×SDS上样缓冲液，沸水浴5min备用。取100μg处理好的样品，按《分子克隆》方法进行SDS-PAGE电泳，积层胶6％，分离胶8％，胶厚0.75mm。胶于转移液(含甲醇15％)中平衡10min；从下至上分别放置滤纸、胶、PVDF膜(0.45μm)、滤纸，夹子夹好放入倒好转移液的转移槽中，250mA转膜90min。将膜取出，放入含5％脱脂奶粉的PBST，室温封闭2h。取出膜，对应一抗按照抗体说明书稀释，室温结合2h；PBST洗3次，每次10min；二抗1:10000稀释，室温结合1h；分别用PBST和PBS各洗3次，每次10min。等比例混合显色基质A液和B液，均匀滴加膜上，静置1min，放入暗箱成像。1.7统计学方法:使用SPSS11.0软件进行统计。计量资料比较采用单因素方差分析，数据以x±s表示。2结果:A549/DDP细胞经不同浓度含药血清作用72h后收集细胞提取总蛋白，WesternBlot检测P-gP蛋白表达量的变化，结果表明，与对照组比较，随着样品含药血清药物浓度的增加，P-gP蛋白表达逐渐减弱(P＜0.05)，说明样品能够抑制多药耐药蛋白的表达，且随着药物浓度的增加，蛋白表达抑制的越明显，且与剂量呈负相关。表1样品对A549/DDP细胞P-gP蛋白表达的影响(x±s，n＝20)与对照组比较：*P＜0.05结论：该组合物可逆转肺癌耐药，可能机制为通过抑制细胞膜上P-gP阻止细胞对顺铂的输出，从而聚集细胞内的药物浓度达到有效逆转肺癌耐药的效果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种逆转顺铂耐药的药物组合物，该药物组合物包含作为活性成分的黄芪和白花蛇舌草。

【技术特征摘要】
1.一种逆转顺铂耐药的药物组合物，该药物组合物包含作为活性成分的黄芪和白花蛇舌草。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述黄芪和白花蛇舌草的原料药材的重量份配比为：黄芪9～30份，白花蛇舌草3～10份；优选为黄芪12～20份，白花蛇舌草5～8份；更优选为黄芪15份，白花蛇舌草6份。3.根据权利要求1或2所述的药物组合...

【专利技术属性】
技术研发人员：张莹，李小江，贾英杰，
申请(专利权)人：天津中医药大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：天津,12