植酸酶突变体制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别涉及一种植酸酶突变体、其制备方法及应用、编码该植酸酶突变体的DNA分子、载体、宿主细胞。本发明专利技术植酸酶突变体，包含N126D单点突变的植酸酶突变体Phy7.1，包含V211W单点突变的植酸酶突变体Phy7.2，包含N126D和V211W两点突变的植酸酶突变体Phy8。与植酸酶PHY6相比，80℃处理10min后，突变体Phy7.1、Phy7.2和Phy8的残留酶活分别提高了12.48％、15.50％和20.90％；85℃处理5min后，突变体Phy7.1、Phy7.2和Phy8的残留酶活分别提高了13.05％、18.50％和27.56％，其耐热性显著高于植酸酶PHY6，从而有利于植酸酶在饲料中的广泛应用。

Phytase mutant

The invention relates to the technical field of biology, in particular to a phytase mutant, a preparation method and an application thereof, a DNA molecule, a carrier and a host cell for encoding the phytase mutant. The phytase mutant of the present invention comprises a N126D single point mutant phytase mutant Phy7.1 comprising a V211W single point mutant phytase mutant Phy7.2, a phytase mutant V211W containing two point mutations in N126D and Phy8. Compared with phytase PHY6, 80 degrees 10min, Phy7.1, Phy7.2 and Phy8 mutants of residual enzyme activity were increased by 12.48%, 15.50% and 20.90%; 85 5min after treatment, Phy7.1, Phy7.2 and Phy8 mutants of residual enzyme activity were increased by 13.05%, 18.50% and 27.56%, the heat resistance was significantly higher than that of the PHY6, and it is widely used for phytase in feed.

【技术实现步骤摘要】
植酸酶突变体
本专利技术涉及生物
，特别涉及一种植酸酶突变体、其制备方法及应用、编码该植酸酶突变体的DNA分子、载体、宿主细胞。
技术介绍
植酸酶是一种能水解植酸的磷酸酶类。它能将植酸磷(六磷酸肌醇)降解为肌醇和无机磷酸。此酶分为两类:3-植酸酶(EC.3.1.3.8)和6-植酸酶(EC.3.1.2.6)。植酸酶广泛存在于植物、动物和微生物中,如玉米、小麦等高等植物,枯草芽孢杆菌、假单孢杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌等原核微生物及酵母、根霉、曲霉等真核微生物中。在谷物、豆类和油料等作物籽实中，磷的基本贮存形式是植酸磷，其含量高达1％～3％，它占植物中总磷的60％～80％。但是以植酸磷形式存在的磷却因单胃动物体内缺乏能分解植酸的酶而难以被利用，其利用率仅在0％～40％，从而造成了许多问题：首先是造成磷源浪费，一方面饲料中的磷源不能得到有效利用，另一方面为了满足动物对磷的需求，又必须在饲料中添加无机磷,提高了饲料成本；其次是形成高磷粪便污染环境。饲料中85％左右的植酸磷会被动物直接排出体外，粪便中大量的植酸磷使水和土壤受到严重污染。另外，植酸磷还是一种抗营养因子，它在动物胃肠道的消化吸收本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植酸酶突变体，其特征在于，其具有(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示的氨基酸序列中任意一个：(Ⅰ)与植酸酶的氨基酸序列SEQ ID NO:1具有至少70％同源性的序列；(Ⅱ)具有所述植酸酶的至少一个免疫表位，且所述植酸酶的氨基酸序列SEQ ID NO:1经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；(Ⅲ)由如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其互补序列或因遗传密码的简并性而与如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其互补序列的核苷酸序列不同的序列编码的氨基酸序列；所述取代为取代1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、1...

【技术特征摘要】
1.一种植酸酶突变体，其特征在于，其具有(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示的氨基酸序列中任意一个：(Ⅰ)与植酸酶的氨基酸序列SEQIDNO:1具有至少70％同源性的序列；(Ⅱ)具有所述植酸酶的至少一个免疫表位，且所述植酸酶的氨基酸序列SEQIDNO:1经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；(Ⅲ)由如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列或其互补序列或因遗传密码的简并性而与如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列或其互补序列的核苷酸序列不同的序列编码的氨基酸序列；所述取代为取代1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17或18个氨基酸。2.根据权利要求1所述的植酸酶突变体，其特征在于，所述取代为第46位、第62位、第70位、第73位、第75位、第80位、第114位、第126位、第137位、第142位、第146位、第159位、第161位、第176位、第187位、第211位、第255位或第380位中的一个或多个氨基酸被取代。3.根据权利要求1所述的植酸酶突变体，其特征在于，所述取代为第46位、第62位、第70位、第73位、第75位、第80位、第114位、第137位、第142位、第146位、第159位、第161位、第176位、第187位、第255位和第380位的氨基酸被取代。4.根据权利要求3所述的植酸酶突变体，其特征在于，所述植酸酶突变体的氨基酸序列如SEQIDNO:3所示，编码该...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴秀秀，王华明，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37