The invention provides an electrochemical sensor for detecting mercury ion, the first through the Au capture probe S key will be fixed to the electrode surface, and then after the reaction was modified on the electrode surface with 2H at 37 DEG C for the RCA product and the electrode surface were phase capture probe hybridization reaction. So that the RCA product is fixed to the electrode surface, and then the electrode was immersed in methylene blue solution for 10 minutes, with three working electrode oxidation reduction peak detection system MB. The invention achieves amplification of signals by means of target cyclic amplification and rolling ring amplification, thereby realizing high sensitivity detection of mercury ions and obtaining lower detection lower limit.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物传感器
,特别涉及检测二价汞离子的生物传感器。
技术介绍
作为全球性环境污染物,汞具有致畸、致癌作用,是蓄积性毒物,有生物不可降解性,其人为释放及其对生态系统功能和人类健康的影响受到国际社会的普遍关注。汞污染大多数来源于固体废物焚烧和化石燃料的燃烧,能在大气中长期稳定存在,从而严重污染了一些水源和土壤。而且,无机汞能在海洋环境中的一些微生物作用下转化为毒性更大的甲基汞,并在食物链的各个环节中积累,最终通过食物链进入人体,会沉积在脑、肝和其它器官中,产生慢性中毒,损害肾、脑、胃和肠道,甚至引起死亡。汞是一种剧毒的全球性环境污染物,严重危害环境和人类健康。因此,对环境、食品中痕量汞的检测十分重要,简单快速、高灵敏、高选择性的检测汞的方法备受关注。目前测定汞常用方法主要有冷原子吸收法、冷原子荧光法、色谱法和等离子体电感耦合质谱法,虽然这些方法的准确度较高,但往往需要大型的仪器设备,且成本比较高,处理过程繁琐耗时,不能满足实际监测中高效低成本的需要。而现存汞离子传感技术还在起步阶段,开发出更灵敏、更简单快捷的汞离子的检测技术依旧是摆在人们面前的一大挑战。
技术实现思路
为了解决以上技术问题,本专利技术提供了一种检测汞离子的电化学传感器,本专利技术利用“T-Hg2+-T”的复合结构实现了对目标物汞离子的高特异性检测,利用核酸外切酶三对DNA双链3'端的切割作用,实现了目标物的循环利用,另外采用滚环复制放大技术,起到了信号放大,并利用亚甲基蓝的氧化还原特性构建了电化学生物传感器。本专利技术对“T-Hg2+-T”的复合结构和RCA进行结合应用,使信 ...
【技术保护点】
一种检测汞离子的电化学传感器,其特征在于,由以下方法制备而成:1)金电极首先在0.3μM和0.05μM的氧化铝浆中进行抛光处理,直到呈镜面,用PBS和二次水反复冲洗;2)将10μL的10 μM的 capture probe滴加到电极表面,在室温下孵育2h;通过Au‑S键将巯基链固定到电极表面;3)均相反应中的主要步骤:a、将灭菌水,10X的缓冲液buffer,2μL外切酶三、2μL 浓度为1μM的HAP和2μL目标物加入到预先准备好的灭菌的离心管中;震荡30s,然后将混匀的混合液放入30℃的恒温箱中孵育50min;b、继续向a步的离心管中加入2μL 10μM Padlock,1μL T4链接酶,2μL Phi29聚合酶和2μL dNTP;震荡30s,然后将混匀的混合液继续放入37℃的恒温箱中孵育1h;c、将b步反应后的溶液滴加到预先修饰好capture probe的电极上;然后将电极继续放在37 ℃的恒温箱中孵育1h;d、用磁力搅拌器在PBS溶液中清洗电极,每次10min,共清洗3次;e、将清洗好的电极浸泡在8×10‑5 M 的亚甲基蓝溶液中10min;f、用磁力搅拌器在PBS溶液中清 ...
【技术特征摘要】
1.一种检测汞离子的电化学传感器,其特征在于,由以下方法制备而成:1)金电极首先在0.3μM和0.05μM的氧化铝浆中进行抛光处理,直到呈镜面,用PBS和二次水反复冲洗;2)将10μL的10μM的captureprobe滴加到电极表面,在室温下孵育2h;通过Au-S键将巯基链固定到电极表面;3)均相反应中的主要步骤:a、将灭菌水,10X的缓冲液buffer,2μL外切酶三、2μL浓度为1μM的HAP和2μL目标物加入到预先准备好的灭菌的离心管中;震荡30s,然后将混匀的混合液放入30℃的恒温箱中孵育50min;b、继续向a步的离心管中加入2μL10μMPadlock,1μLT4链接酶,...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘素,冷雪琪,王玉,裴倩倩,崔雪君,韩聪,徐成功,刘学娇,秦艺菲,
申请(专利权)人:济南大学,
类型:发明
国别省市:山东;37
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