β‑1,4‑异木聚糖、其硫酸化衍生物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术提供一种从铁皮石斛中获得的β‑1,4‑异木聚糖、其硫酸化衍生物及其制备方法和用途。具体而言，采用氢氧化钠提取铁皮石斛中粗多糖，再经醇沉，结合多种柱层析与酶法纯化，经鉴定得到均一的β‑1,4‑异木聚糖。使所述β‑1,4‑异木聚糖硫酸化得到其硫酸化衍生物。体外药理实验证明，β‑1,4‑异木聚糖的硫酸化衍生物可在低浓度下显著抑制血管生成，且几乎没有毒性，有望被开发成为无毒高效的抗血管生成类药物。

Beta 1,4 trees, sulfated derivatives of chitosan and its preparation method and application thereof

The present invention provides a gain from Dendrobium 1,4 beta trees, sulfated derivatives of chitosan and its preparation method and application thereof. Specifically, using sodium hydroxide extraction of crude polysaccharide from Dendrobium candidum, followed by ethanol precipitation, combined with a variety of column chromatography and enzyme purification method, identified homogeneous beta 1,4 rare chitosan. The beta 1,4 rare sulfated chitosan and its sulfated derivatives. That pharmacological test in vitro, sulfated derivatives of beta 1,4 rare chitosan can significantly inhibit angiogenesis in low concentrations, and almost no toxicity, are expected to be developed as efficient and non-toxic anti angiogenesis drugs.

【技术实现步骤摘要】
β-1,4-异木聚糖、其硫酸化衍生物及其制备方法和用途
本专利技术涉及一种中草药多糖及其制备方法，更具体地说，涉及一种铁皮石斛β-1,4-异木聚糖、其硫酸化衍生物以及它们的制备方法及所述硫酸化衍生物在抗血管生成方面的应用。
技术介绍
道家经典《道藏》曾把铁皮石斛列为“中华九大仙草之首”，主要分布在浙江、安徽、云南等地。它的干燥茎具有滋阴养胃，增强免疫力，调节血糖水平等的功效。早期研究表明，多糖是一种重要的活性物质，多糖的含量也间接反映药材品质。因此，对石斛多糖的定性研究不仅可以为石斛品种鉴别提供依据还可以规范中药市场。前期研究主要集中在水提多糖，因为铁皮石斛多糖的分离纯化及结构解析仍然面临很多挑战，迄今为止从铁皮石斛中只获得少数水提均一多糖。然而，对铁皮石斛碱提多糖知之甚少。作为碱提多糖中重要的组成成分之一的木聚糖是一种重要的复杂多糖，不同来源的木聚糖之间也存在着很大的区别。因此，它的结构也可以作为品种鉴定的参考指标之一。更重要的是，功能性木聚糖衍生物作为新一代的生物制品具有广泛的药理活性。与其它衍生物相比，硫酸化多糖则具有更强的生物活性。硫酸化多糖具有多种生物活性，如抗凝、抗补体、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种β‑1,4‑异木聚糖，其结构式如下：

【技术特征摘要】
1.一种β-1,4-异木聚糖，其结构式如下：其中，在上式中，Rx为α-L-Araf-(1→4)-α-D-Glcp-(1→；β-D-Xylp-(1→；α-L-Araf-(1→或β-D-Galp-(1→3)-α-L-Rhap-(1→，并且n＝3-42，并且优选地，n＝19-21。2.根据权利要求1所述的β-1,4-异木聚糖，其中，所述β-1,4-异木聚糖的尖峰分子量为3.7×104Da。3.一种β-1,4-异木聚糖的制备方法，所述方法包括以下步骤：a.多糖提取：铁皮石斛干燥茎经脱脂后，用碱提取，经醇沉洗涤后得到粗多糖；以及b.多糖纯化：得到的粗多糖经阴离子交换柱分离、去除淀粉后，经凝胶柱纯化得到所述β-1,4-异木聚糖。4.根据权利要求3所述的制备方法，其中，所述方法包括以下步骤：a.多糖提取：铁皮石斛干燥茎经乙醇浸泡脱脂，风干，粉碎后沸水反复提取，过滤后残渣用浓度为0.1-2M，优选为1M的氢氧化钠溶液提取，滤液用盐酸中和后浓缩，透析，透析内液经离心，乙醇沉淀，离心后经无水乙醇和丙酮交替洗涤后干燥得到铁皮石斛碱提粗多糖；以及b.多糖纯化：取铁皮石斛碱提粗多糖，去离子水溶解，离心，上清液经阴离子交换柱分离，收集洗脱的包含淀粉的多糖组分；进一步除去所述包含淀粉的多糖组分中的淀粉，将得到的产物进一步用凝胶色谱柱纯化得到β-1,4-异木聚糖。5.一种制备如权利要求1所述的β-1,4-异木聚糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁侃，乐晗，刘砚秋，曲欢欢，
申请(专利权)人：中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：上海,31