制备腺垂体或其前体组织的方法技术

本发明专利技术提供用于在体外从人多能干细胞衍生腺垂体或其前体组织的方法。在该方法中：通过在含有骨形态发生因子信号转导途径激活剂和Shh信号途径活性物质的培养基中对人多能干细胞聚集体进行悬浮培养而得到包含下丘脑神经上皮组织和表皮外胚层的人细胞聚集体；并且通过在含有骨形态发生因子信号转导途径激活剂和Shh信号途径活性物质的培养基中对所得到的包含下丘脑神经上皮组织和表皮外胚层的人细胞聚集体进行进一步悬浮培养，在表皮外胚层中诱导垂体基板和/或拉特克囊的形成，从而得到包含1)下丘脑神经上皮组织和2)垂体基板和/或拉特克囊的人细胞聚集体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】制备腺垂体或其前体组织的方法[
]本专利技术涉及用于在体外诱导多能干细胞分化成腺垂体或其祖先组织的技术。[
技术介绍
]垂体(hypophysis)是邻近间脑下部的小的内分泌器官，并且作为多种激素的控制中心起主要作用。例如，其产生多种垂体激素，包括促进生命支持所必需的皮质类固醇产生的促肾上腺皮质素(ACTH)，促进儿童生长的生长激素等。因此，垂体的机能障碍引起严重的系统疾病。然而，由于垂体是通过胚胎中极其复杂的发育过程形成的，所以难以由干细胞如胚胎干(ES)细胞等形成垂体组织。本专利技术人应用快速聚集胚状体样聚集体无血清悬浮培养(Serum-freeFloatingcultureofEmbryoidBody-likeaggregateswithquickreaggregation，SFEBq法，所述方法被确定为一种有效地由诸如ES细胞等的多能干细胞分化神经细胞和视网膜细胞的方法)，并且在体外成功地由小鼠ES细胞自组织了垂体(非专利文件1)。在该方法中，通过在包含SAG的无血清培养基中悬浮培养小鼠ES细胞的聚集体激活hedgehog信号，并且同时在所述聚集体中形成下丘脑和口腔外胚层，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于制备包含腺垂体或其前体组织的人细胞聚集体的方法，所述方法包括在含有骨形态发生蛋白信号转导途径激活物质和作用于Shh信号途径的物质的培养基中悬浮培养人多能干细胞的聚集体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.25 JP 2014-1523841.用于制备包含腺垂体或其前体组织的人细胞聚集体的方法，所述方法包括在含有骨形态发生蛋白信号转导途径激活物质和作用于Shh信号途径的物质的培养基中悬浮培养人多能干细胞的聚集体。2.根据权利要求1所述的制备方法，其包括在含有骨形态发生蛋白信号转导途径激活物质和作用于Shh信号途径的物质的培养基中悬浮培养人多能干细胞的聚集体，从而获得包含下丘脑神经上皮组织和表面外胚层的人细胞聚集体，并且将所获得的包含下丘脑神经上皮组织和表面外胚层的人细胞聚集体在含有骨形态发生蛋白信号转导途径激活物质和作用于Shh信号途径的物质的培养基中进一步悬浮培养，从而诱导在所述表面外胚层中形成垂体基板和/或拉特克囊，由此获得包含1)下丘脑神经上皮组织和2)垂体基板和/或拉特克囊的人细胞聚集体。3.根据权利要求2所述的制备方法，其中用于所述进一步悬浮培养的培养基还包含FGF2。4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其包括将所述包含1)下丘脑神经上皮组织和2)垂体基板和/或拉特克囊的人细胞聚集体在包含作用于Shh信号途径的物质的培养基中进一步悬浮培养，从而诱导垂体基板和/或拉特克囊向垂...

【专利技术属性】
技术研发人员：笹井芳树，大曾根亲文，须贺英隆，
申请(专利权)人：国立研究开发法人理化学研究所，住友化学株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP